IFI 30、PD-L1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及與病人預(yù)后的關(guān)系

袁英淇 閆潤芝 范益民

人腦膠質(zhì)瘤是較常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，預(yù) 后較差，尤其膠質(zhì)母細(xì)胞瘤，5年生存率不足10%[1]。研究發(fā)現(xiàn)程序性死亡因子配體1（programmed deathligand 1，PD-L1）能與T細(xì)胞表面的PD-1受體結(jié)合，促進(jìn)T細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸[2]。另外，研究發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤γ干擾素誘導(dǎo)溶酶體硫醇還原酶（IFN-γ induced lysosomal thiol reductase，GILT）呈過表達(dá)，在敲除該基因表達(dá)后，能抑制腫瘤細(xì)胞增殖[3]。而 由γ 干 擾 素 誘 導(dǎo) 蛋 白30（interferon induced protein 30，IFI30）基因編碼的GILT 是現(xiàn)階段唯一知曉的溶酶體硫醇還原酶[4]。本文探討IFI 30、PD-L1在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及其與病人預(yù)后的關(guān)系，為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 納入標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)后病理證實(shí)為腦膠質(zhì)瘤；年齡≥18歲；原發(fā)性膠質(zhì)瘤，首次行手術(shù)；能獲取瘤體及瘤旁組織；術(shù)前未采用放療、化療；知曉研究內(nèi)容，并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：患其他原發(fā)性腫瘤；患免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾??；患腦膜炎、腦梗死等其他腦部疾?。桓?、腎等臟器損害；既往有精神病史；意識(shí)障礙。研究方案獲倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

最終納入2015 年5 月～2019 年5 月收治的人腦膠質(zhì)瘤及瘤旁組織103例，其中男57例，女46例；年齡30～75歲，平均（52.39±12.43）歲。

1.2 檢測方法 采用免疫組化法檢測膠質(zhì)瘤、瘤旁組織IFI 30、PD-L1 表達(dá)情況，參考說明書進(jìn)行。免疫組化染色評(píng)分[5]：陽性細(xì)胞計(jì)分，≤5%計(jì)0 分，6%～25%計(jì)1 分，26%～50%計(jì)2 分，51%～75%計(jì)3 分，＞75%計(jì)4分；染色強(qiáng)度計(jì)分，無色計(jì)0分，淡黃計(jì)1分，棕黃計(jì)2 分，棕褐色計(jì)3 分；以二者積分乘積作為最終判定結(jié)果，0～2 分為低表達(dá)，3～5 分為高表達(dá)。利用Envision 二步法檢測異檸檬酸脫氫酶1（isocitrate dehydrogenase 1，IDH1）突變情況，根據(jù)說明書完成，隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野分析，陽性染色率超過10%視為IDH1突變。見圖1。

圖1 免疫組織化學(xué)染色檢查膠質(zhì)瘤組織和瘤旁組織IFI 30、PD-L1表達(dá)（SP法，×200）

1.3 隨訪 術(shù)后開始隨訪，時(shí)間為24 個(gè)月，記錄無進(jìn)展生存期和總生存期。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0軟件分析；計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)；采用Spearman相關(guān)系數(shù)分析相關(guān)性；采用多因素logistic 回歸分析檢驗(yàn)?zāi)X膠質(zhì)瘤預(yù)后危險(xiǎn)因素；生存曲線分析IFI 30、PD-L1 表達(dá)水平與腦膠質(zhì)瘤病人生存期的關(guān)系；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦膠質(zhì)瘤組織IFI 30、PD-L1 的表達(dá)變化 膠質(zhì)瘤組織IFI 30、PD-L1 高表達(dá)率[分別為（70.87%，73/103）、（68.93%，71/103）]明顯高于瘤旁組織[分別為19.42%（20/103）、21.36%（22/103）；P＜0.001]。膠質(zhì)瘤組織IFI 30表達(dá)水平與PD-L1表達(dá)水平呈明顯正相關(guān)（r=0.583，P＜0.05）。

2.2 腦膠質(zhì)瘤預(yù)后的影響因素 隨訪24個(gè)月，生存75例，死亡28 例。單因素分析顯示膠質(zhì)瘤病理分級(jí)、腫瘤切除程度、IFI 30和PD-L1表達(dá)水平、術(shù)后放/化療、IDH1突變與病人預(yù)后有關(guān)（P＜0.05，表1）。多因素logistic回歸分析顯示，WHO分級(jí)Ⅲ～Ⅳ級(jí)、腫瘤未全切除、IFI 30 高表達(dá)、PD-L1 高表達(dá)是增加病人死亡風(fēng)險(xiǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05，表2），術(shù)后放/化療及IDH1 突變是降低病人死亡風(fēng)險(xiǎn)的保護(hù)因素（P＜0.05，表2）。

表1 本文103例膠質(zhì)瘤預(yù)后影響因素的單因素分析

表2 本文103 例膠質(zhì)瘤預(yù)后不良影響因素的多因素logistic回歸分析

2.3 IFI 30、PD-L1 表達(dá)水平與腦膠質(zhì)瘤病人生存期的關(guān)系 生存曲線分析顯示，IFI 30 高表達(dá)組2 年累積生存率（64.52%）和2 年累積無進(jìn)展生存率（65.56%）均明顯低于低表達(dá)組（分別為82.25%、89.45%；P＜0.05）。PD-L1 高表達(dá)組2 年累積生存率（61.78%）和2年累積無進(jìn)展生存率（60.14%）均明顯低于低表達(dá)組（分別為88.52%、79.86%；P＜0.05）。見圖2。

圖2 生存曲線分析IFI 30和PD-L1表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤病人生存預(yù)后的關(guān)系

3 討論

膠質(zhì)瘤手術(shù)治療難完全切除，術(shù)后放、化療效果欠佳，預(yù)后較差，與腫瘤細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)殺傷及監(jiān)視作用有關(guān)[6]。PD-L1參與腫瘤細(xì)胞免疫逃逸過程，通過促進(jìn)T 細(xì)胞凋亡，幫助腫瘤細(xì)胞逃逸免疫監(jiān)視[7]。此外，IFI30 基因編碼的GILT 參與腫瘤進(jìn)展，其過表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖[8]。本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)腦膠質(zhì)瘤組織IFI 30、PD-L1呈高表達(dá)。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)高表達(dá)的IFI 30對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的炎癥與免疫狀態(tài)具有調(diào)節(jié)作用，過表達(dá)IFI 30可見更明顯的免疫細(xì)胞浸潤，可能通過調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥與免疫，促使腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor associated macrophages，TAMs）聚集于病灶部位，參與腫瘤進(jìn)展[9]。PD-L1在腦膠質(zhì)瘤進(jìn)展中具有重要作用，TAMs能分泌前列腺素2、轉(zhuǎn)化生長因子β等因子，誘導(dǎo)PD-L1 高表達(dá)，降低抗原提呈能力，引起T 細(xì)胞功能異常，降低其對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷能力，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展[10]。本研究顯示腦膠質(zhì)瘤組織IFI 30 與PD-L1 表達(dá)呈正相關(guān)；腦膠質(zhì)瘤病人預(yù)后與WHO 分級(jí)、腫瘤切除程度、術(shù)后輔助放/化療、IDH1突變有關(guān)。這與既往研究類似[11]。本研究還發(fā)現(xiàn)IFI 30、PD-L1 高表達(dá)增加膠質(zhì)瘤病人死亡風(fēng)險(xiǎn)。IFI 30 能促使TAMs 在病灶部位聚集，加速腫瘤發(fā)展，而PD-L1高表達(dá)能通過影響T細(xì)胞功能，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，二者可能共同發(fā)揮促腫瘤作用，參與腦膠質(zhì)瘤進(jìn)展。

綜上所述，腦膠質(zhì)瘤IFI 30、PD-L1呈高表達(dá)，二者呈正相關(guān)，明顯增加病人死亡風(fēng)險(xiǎn)。