豬傳染性胃腸炎病毒疫苗株S 基因的克隆及其與流行株的比對分析

侯宏艷，潘孝成，尹 磊，張丹俊，趙瑞宏，胡曉苗，周學利

（安徽省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 安徽省畜禽疫病研究中心 畜禽產(chǎn)品安全工程安徽省重點實驗室， 安徽 合肥230031）

豬傳染性胃腸炎病毒（transmissible gastroenteritis virus，TGEV） 可引起各種年齡豬病毒性腸炎，感染后引起豬嘔吐、嚴重腹瀉和脫水，仔豬1～28 d 是該病最易感日齡，每年的1—2 月是該病高發(fā)期［1-4］。 TGEV 除了與引起豬腹瀉的豬輪狀病毒（porcine rotavirus，PoRV）、 豬 流 行 性 腹 瀉 病 毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV） 等混合感染，還能與豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome， PRRSV）、豬圓環(huán)病毒 （porcine circovirus，PCV）、 豬細小病毒（porcine parvovirus，PPV）等混合感染［5-8］，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大危害。

近年來， 我國多個地區(qū)對TGEV 進行了流行病學調(diào)查，報道的TGEV 檢測率存在差異。孫秋艷等［6］對2014—2016 年山東省部分地區(qū)TGE 流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，TGEV 檢測率為9.3%；徐麗華等［7］對2011—2017 年浙江省豬病毒性腹瀉的流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，TGEV 的陽性率為3.05%； 杜雅楠等［8］對內(nèi)蒙古地區(qū)采集的病料進行了TGEV 檢測，顯示陽性率為11.76%，赤峰市TGEV 陽性率為20.83%；祖立闖等［9］在2007—2016 年的39 篇流行病學監(jiān)測文獻中發(fā)現(xiàn)TGEV 整體陽性感染率在0～31.86%， 還發(fā)現(xiàn)外觀健康豬群仍可檢測出TGEV 病原或抗體，健康豬群中普遍存在TGEV 隱性感染。 因此，對豬場進行TGEV 檢測很有必要。

TGEV 為RNA 病毒， 存在遺傳變異的可能。在TGEV 基因組中，S 基因編碼的氨基酸是中和抗體的主要靶點［4-5，10］。因此，該研究選擇了國內(nèi)常用的3 個廠家的豬傳染性胃腸炎病毒疫苗進行TGEV RNA 提取和S 基因序列的擴增， 并與已公布流行毒株基因序列進行比對， 建立檢測豬傳染性胃腸炎病毒的RT-PCR 診斷方法， 初步判斷豬傳染性胃腸炎病毒疫苗與流行菌株S 基因的遺傳性，為臨床疫苗的應用提供參考。……