黃連素治療2型糖尿病的療效及對患者血糖、腸道菌群及Cys C、AN、FFA水平的影響

陳誠，沙雯君，徐碧林，朱近悅，張翠平，夏娟，汪紅平，雷濤

上海中醫藥大學附屬普陀醫院內分泌科，上海 200062

根據世界衛生組織(WHO)預估，全球范圍內患有糖尿病的人數已超過2億，估計至2035年會超過3億，心血管疾病、腫瘤及糖尿病已成為世界上3 大非傳染性疾病[1]。中國成為僅次于印度的第二大糖尿病發病大國，患有糖尿病的人數有4 000萬左右，給經濟和社會造成了比較沉重的負擔[2]。黃連素又被稱為小檗堿，其是從含有小檗堿的植物藥如黃柏、黃連等中提煉的生物堿，是異喹啉生物堿，也能夠人工合成[3]。黃連素雖然是清熱解毒的代表藥物，但魏晉時期就有著作記載使用黃連治療消渴[4]。基于此，本研究觀察黃連素治療2 型糖尿病的療效，并探討其對患者血糖、腸道菌群及胱抑素C(Cys C)、脂聯素(AN)、游離脂肪酸(FFA)水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年7月至2020年12月上海中醫藥大學附屬普陀醫院治療的2型糖尿病患者124 例為研究對象，本研究經本院倫理委員會批準同意。納入標準：①與2 型糖尿病診斷標準相符[5]；②檢測血糖水平，餐后2 h 血糖(2 hPG)大于11.1 mmol/L，糖基化酶(FPG)大于7.0 mmol/L；③簽署了知情同意書。排除標準：①伴有嚴重臟器疾病者；②出現意識障礙或精神疾病者；③對研究所使用的藥物過敏。按照隨機數表法將患者分為觀察組和對照組，每組62例。對照組男性32例，女性30例；年齡43～74歲，平均(64.26±5.03)歲；病程1～11年，平均(6.34±2.96)年。觀察組男性33例，女性29例；年齡42～75歲，平均(64.67±4.85)歲；病程2～12年，平均(6.87±3.15)年；在對照組的基礎上選擇黃連素進行治療。兩組患者的性別、病程、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 治療方法 對照組患者選擇二甲雙胍腸溶片治療：①叮囑病患養成健康的飲食習慣，需低脂、低鹽、優質低蛋白、低呤飲食，禁煙酒，體育鍛煉每日都需進行，同時保證睡眠充足；②口服二甲雙胍腸溶片(生產商：貴州天安藥業股份有限公司；規格：0.25 g×100片/瓶；國藥準字：H52020960)，0.5 g/次，3次/d。觀察組患者在對照組治療的基礎上選擇黃連素(生產商：杭州賽諾菲民生健康藥業有限公司；規格：0.1 g×100片/瓶；國藥準字：H33021708)進行治療，口服0.2～0.5 g/次，3次/d。兩組均連續治療1個月。

1.3 觀察指標與評價(檢測)方法 治療1 個月后，比較兩組患者的臨床療效、餐后2 h 血糖(2 hPG)、空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、Cys C、AN、FFA水平及腸道菌群。(1)臨床療效[6]：①顯效：臨床癥狀全部消失，2 hPG為4.4～8.0 mmol/L，FPG為4.4～6.1 mmol/L；②有效：臨床癥狀得到改善，2 hPG<10 mmol/L，FPG<7 mmol/L；③無效：臨床癥狀沒有緩減。總有效率=顯效率+有效率。(2) 2 hPG、FPG、HbA1c、Cys C、AN、FFA水平：于清晨病患空腹狀態下收集病患6 mL靜脈血，EDTA抗凝后，3 500 r/min轉速離心10 min，血漿分離，于-80℃的超低溫冰箱中保存。選擇γ放射免疫計數器(SN-684M型)對2 hPG、FPG、HbA1c水平進行檢測，散射比濁法檢測CysC水平，酶聯免疫吸附法檢測AN 水平，比色法檢測FFA 水平。(3)腸道菌群：稀釋糞便后選擇直接涂片法：①試管中加入10 滴(50 μL/滴)無菌生理鹽水，之后加入糞便標本(水滴樣大小)攪拌混勻，抽取1 滴置于玻片上，涂抹成2 cm 直徑的標本膜，后晾干，等待染色；②固定涂片之后實施革蘭氏染色，后晾干，等待鏡檢；③剪一張大小為顯微鏡目鏡的圓形紙片，于中間剪一直徑是目鏡直徑一半的圓形孔，于目鏡中放置，4個視野于油鏡下觀察，對革蘭陰性桿菌(G-b)、革蘭陰性球菌(G-c)、革蘭陽性桿菌(G+b)、革蘭陽性球菌(G+c)、細菌總數與其他細菌數進行觀察；④按照記錄的細菌數分別對油鏡視野中的細菌總數進行計算(500個細菌中球菌、桿菌數與桿球比)。

1.4 統計學方法 應用SPSS19.0 統計學軟件分析數據，計量資料以均數±標準差(x-±s)，組間比較采用t檢驗，計數資料組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者的臨床療效比較 觀察組患者的治療總有效率為95.16%，明顯高于對照組的74.19%，差異有統計學意義(χ2=10.504，P=0.001<0.05)，見表1。

表1 兩組患者的臨床療效比較(例)

2.2 兩組患者治療前后的2 hPG、FPG、HbA1c水平比較 治療前，兩組患者的2 hPG、FPG、HbA1c 水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，兩組患者的2 hPG、FPG、HbA1c 水平明顯降低，且觀察組明顯低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組患者治療前后的2HPG、FPG、HBA1C水平比較()

表2 兩組患者治療前后的2HPG、FPG、HBA1C水平比較()

注：與本組治療前比較，aP<0.05。

2.3 兩組患者治療前后的Cys C、AN、FFA 水平比較 治療前，兩組患者的Cys C、AN、FFA 水平比較差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，觀察組Cys C、FFA水平明顯低于對照組，AN水平明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 兩組患者治療前后的Cys C、AN、FFA水平比較()

表3 兩組患者治療前后的Cys C、AN、FFA水平比較()

注：與本組治療前比較，aP<0.05。

2.4 兩組患者治療前后腸道菌群比較 治療前及治療后，兩組患者的菌數、G-b、G+b、G-c、G+c及球桿比比較差異均無統計學意義(P>0.05)，見表4、表5。

表4 兩組患者治療前后菌數、G-b與G+b的比較()

表4 兩組患者治療前后菌數、G-b與G+b的比較()

注：菌數/FV表示每一油鏡視野下的細菌總數。

表5 兩組患者治療前后、G-c、G+c與球桿比的比較()

表5 兩組患者治療前后、G-c、G+c與球桿比的比較()

3 討論

近幾年，生活方式的變化、生活水平的提升使糖尿病的發生率逐年升高，其對人類的生命安全及身體健康造成了嚴重威脅，已經發展為三大主要慢性疾病之一[7]。糖尿病屬于環境與遺傳因素互相作用導致的一種由于破壞胰島細胞、胰島細胞功能出現缺陷、相對或絕對胰島素分泌不足、胰島素抵抗等造成的蛋白質、碳水化合物、電解質、水、脂肪等代謝紊亂的代謝不正常綜合征，在臨床上主要以慢性高血糖為特征[8]。長時間患有糖尿病會導致數個器官、系統發生慢性的并發癥，造成功能衰竭或障礙，最終致殘或致死，因為發生糖尿病的機制和原因還沒有完全的明確，到現在為止還沒有高效的治療手段[9]。

黃連素也稱為小檗堿，是從黃柏、黃連等中草藥中提煉出的生物堿，黃連素可以對高血糖進行抑制[10]。有研究表明，40 mg/kg黃連素已經出現比較明顯的降血糖功能，可以維持6 h的有效時間，對包含正常小鼠、葡萄糖性、腎上腺素性、四氧嘧啶性高血糖小鼠等在內的數種動物模型都有明顯的降血糖效果[11]。由于黃連素有較低的溶解度，人體不易吸收，同谷維素共同服用，能夠促進吸收，使療效增強[12]。

有關糖尿病腸道菌群的文獻顯示，糖尿病病患于糖化血紅蛋白與空腹血糖上升時腸桿菌科細菌就會升高，但是類桿菌及雙歧桿菌的數量降低[13]。本研究中，患者的糞便大多是成形軟便，沒有出現水樣便，并且通過觀察沒有持續腹瀉與發熱癥狀，腹脹、大便一次性次數增加沒有進行任何處理就恢復正常，能夠說明黃連素不會產生腸道菌群的現象。通過鏡檢，球桿菌比及各個油鏡下的細菌數，同服藥之前沒有明顯的差異。從本研究的結果中能夠說明，黃連素對病患腸道菌群沒有明顯影響。

CysC 屬于重要的一種內源性抑制半胱氨酸蛋白酶的堿性非糖化蛋白質，人體內有核細胞都能夠產生恒定的CysC，肝功能、炎癥不會對其造成影響[14]。AN的功能有抗動脈粥樣硬化、抗炎癥等，外源性AN能夠使人體對于胰島素的敏感度提高[15]。血清之中的FFA水平能夠對人體之內的糖代謝、脂質代謝、分泌情況進行直接的反映，FFA 的濃度同時也會由于糖尿病等疾病的發生、發展而升高[16]。血漿之中的FFA 水平提升亦或是人體細胞之內有過高的脂肪水平，也能夠導致胰島β細胞及IR 功能失調，進而出現2 型糖尿病[17]。本研究中，通過黃連素進行治療的患者的Cys C、FFA水平明顯低于使用二甲雙胍腸溶片進行治療的患者，AN水平明顯高于使用二甲雙胍腸溶片進行治療的患者，這在一定程度上論述了上述觀點。

綜上所述，黃連素治療2型糖尿病的療效顯著，能明顯降低病患2 hPG、FPG 水平，并對Cys C、AN、FFA水平進行改善，同時對病患腸道菌群沒有明顯影響，值得臨床應用推廣。