核酸檢測與酶免檢測平行篩查血液在基層血站的應用有效性研究

曲 執

（葫蘆島市中心血站，遼寧 葫蘆島 125000）

控制并預防血液疾病的感染、傳播是血液防控中的重點，其中乙型肝炎病毒（HBV）、人類免疫缺陷病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）等，一直是臨床血液疾病預防中被關注的重點問題。在輸血前，對血液中傳播病原體進行有效的篩查，是保證輸血與治療安全性的關鍵。在臨床中，對于血液的傳染性病毒檢測多采用酶免檢測（enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA，又稱酶聯免疫吸附測定法），主要針對乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病毒（HIV）常見性的傳播性病毒進行檢測、篩查。雖然該檢測方式具有一定的準確性、靈敏度，能控制并預防輸血過程中的疾病傳播，但在臨床篩查中依舊存在局限性。近年來，隨著醫療技術的不斷發展與變化，核酸檢測（nucleic acid amplification techniques，NAT）逐漸應用于臨床血液疾病檢測中，具有較高的特異性與靈敏度，可在短時間內對乙型肝炎病毒、丙肝病毒、艾滋病毒等進行快速的篩查檢測，進一步保障輸血中的血液質量與安全[1]。為了進一步探究血液檢測的靈敏度與有效性，本文針對本站2019年4月至2020年5月100名無償獻血者的血液樣本，探討在基層血站中采用酶免檢測與核酸檢測平行篩查血液的應用效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料 本次100例試驗數據均選取于在本血站進行無償獻血者，所選時間區間為2019年4月至2020年5月，所有無償獻血者均符合我國《獻血者健康檢查要求》，所有無償獻血者在血液采集時，均保留酶免檢測與核酸檢測兩種不同的血液樣本。

1.2 方法 血液樣本采集后4 h之內，將樣本進行20 min的低溫離心處理，完成后，放置于2～8 ℃的溫度中進行保存，同時需保證在3 d內完成需要進行的核酸檢測。①儀器選用：酶免檢測選用TECANFREEDOM EVOLYER-200；核酸檢測所選用的機型為型號浩源ChiTas BSS1200+ABI7500。②試劑選用：HBsAg試劑（北京萬泰生物藥業有限公司）、抗-HCV試劑（北京萬泰生物藥業有限公司）、抗-HIV-1/2（北京萬泰生物藥業有限公司）、HBsAg試劑、抗-HCV試劑、抗-HIV試劑核酸檢測試劑（珠海麗珠試劑股份有限公司）[2]。③檢測方式：對血液樣本進行酶免檢測與核酸檢測，并根據試劑盒中所附帶的說明書按流程進行操作。酶免檢測：在丙型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病毒的試劑檢測中，若試驗結果有雙陽或單陽現象，則判定為陽性；若為灰區樣本，則需要重新進行雙孔再檢測，若雙孔或一孔中有陽性現象，則判定為陽性，作為檢測試驗不合格。若檢測結果中有陰性樣本，則需進行核酸檢測。此外，在HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2檢測中，若有2種反應試劑呈陽性狀態，則為陽性，若顯現為陰性狀態，則為陰性；若反應中僅存在1種反應為陽性狀態或反應均為陰性狀態，則實施核酸檢測[3]。核酸檢測流程嚴格按照核酸試劑說明書中的詳解步驟進行，若檢測結果中有單個陽性現象的Pool，則需要將其拆分后重新進行檢測。若混合的樣本中呈陽性，但拆分后為陰性的樣本，為判定為陰性；若混合樣本中呈陽性，且拆分后也有陽性的樣本，則判定為陽性[4]。

1.3 觀察指標 通過試驗記錄并對比兩種檢測方式中呈陽性的概率與核酸檢測試驗不合格的情況。

1.4 統計學處理 本次試驗中100例無償獻血者的數據均應用于SPSS20.0進行軟件處理，計數資料采用χ2檢驗，兩種檢測方式試驗中呈陽性的結果，以及核酸檢測試驗不合格用率（%）表示。

2 結果

2.1 兩種檢測方式試驗結果對比 由表1可以看出，經過酶免檢測，將HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2無反應性與1種反應型試劑的樣本總計88例，通過核酸檢測后呈陽性的樣本有7例，陽性概率為7.95%。

表1 兩種檢測方式試驗結果對比

2.2 核酸檢測試驗不合格對比 通過酶免檢測之后，乙型肝炎病毒檢測試驗不合格3例，艾滋病毒檢測試驗不合格2例，丙肝病毒檢測試驗不合格3例；經過核酸檢測試驗不合格的有7例，不合格的概率為7.14%。見表2。

表2 核酸檢測試驗不合格對比[n（%）]

3 討 論

在患者輸血治療過程中，血液質量的安全性是治療的基本與前提，而血液的安全性保障問題，在血站的工作中是最為關鍵的環節之一。血液的有效、安全篩查，是保障血液安全的重要方法，也是預防、控制血液傳播途徑的重要方式之一[5]。現階段，在臨床中對于血液的篩查，多采用酶免檢測與核酸檢測方式。酶免檢測主要是針對抗體、抗原進行篩查檢測，但病毒的抗體與抗原極易產生蛋白結構上的變異，使病毒在窗口期時容易造成誤檢、漏檢的現象。而病毒的窗口期，主要是指被病毒感染至該種病毒可被某種檢測方式篩查、檢測出的一段時間，而處在窗口期的病毒無法被檢測到，但其依然具有一定的傳染、傳播性[6]。而核酸檢測，具有較高的敏感性與特異性，在樣本檢測過程中，即使是含量較低的病毒核酸，也可將其檢測出，能有效減短酶免檢測中的病毒窗口期。據臨床研究調查指出，核酸檢測能有效縮短乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病毒（HIV）平均感染的窗口期，此外，核酸檢測還能有效規避病毒發生變異、隱藏性感染現象等，有效避免了誤檢、漏檢的發生[7]。通過本次試驗可知，血液樣本在通過酶免檢測后，對于HBsAg、抗-HCV、抗-HIV-1/2無反應性與只有1種試劑發生反應現象的篩查。由此可說明，血液經酶免檢測的同時，進行核酸檢測的平行篩查，有利于避免血液檢測中的漏檢，兩種檢測方式互相補充不足，提高血液檢測的有效性，保障血液的安全。該結論與李燕紅等[8]學者《病毒核酸檢測在無償獻血者中的應用及其質量控制方法的探討》一文中取得的結果一致，其將19210例無償獻血者的血液樣本，進行標本采集后進行酶免檢測，該數據也再次證明了，核酸檢測能有效彌補酶免檢測的不足之處，有效降低并控制血液檢測過程中的漏檢風險，阻止了血液疾病的傳播，有效保障了血液的安全性[9-10]。

綜上所述，在基層血站中應用核酸檢測與酶免檢測平行篩查血液，能有效避免單一檢測過程中出現的誤檢、漏檢風險，提高血液檢測的安全、有效性，預防并控制血液的傳染，保障了臨床中血液的安全供給，值得大力推廣與應用。