鼻咽癌病理組織中CXCR4表達(dá)與患者臨床病理特征、新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系

余花艷 倉順東 史中州

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)為臨床常見的頭頸部惡性腫瘤，多發(fā)于中國(guó)南方及東南亞各國(guó)[1-2]。NPC癌組織對(duì)射線較為敏感，目前放射治療仍為首選治療方案，新輔助化療具有減少癌組織體積，縮小放療的靶區(qū)的作用，近年來在NPC治療中應(yīng)用廣泛。然而病理特征相同，治療方法相同的NPC患者，臨床治療效果及預(yù)后生存狀況也存在較大差異[3]。越來越多臨床研究表明癌組織中存在多種趨化因子及其受體，與癌癥的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及臨床治療效果聯(lián)系緊密[4-5]，其中趨化因子受體4(chemokine receptor 4，CXCR4)在多種癌組織中存在過表達(dá)，為目前研究熱點(diǎn)。但現(xiàn)有研究多關(guān)于NPC患者病理組織中CXCR4表達(dá)水平的探究[6]，而NPC患者病理組織中CXCR4表達(dá)水平與新輔助化療療效及患者預(yù)后的關(guān)系的研究尚未見報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意后，以我院2017年5月以來收治的97例NPC患者為研究對(duì)象，以其活檢病理癌組織標(biāo)本作為觀察組(n=97)，癌旁組織標(biāo)本作為對(duì)照組(n=60)。男性62例，女性35例；年齡37～75歲，平均年齡(51.21±10.42)歲；TNM分期屬于Ⅰ期和Ⅱ期的39例，Ⅲ期和Ⅳ期的58例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例，未轉(zhuǎn)移55例；鱗狀細(xì)胞癌73例，其他癌24例；化療效果為部分緩解(partial response，PR)73例(腫瘤病灶縮小30%以上，且維持4周以上)；疾病穩(wěn)定(stable disease，SD)18例(腫瘤體積縮小不超過30%，或增大不超過20%，且維持4周以上)；疾病進(jìn)展(progressive disease，PD)6例(腫瘤病灶體積增大超過25%)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①經(jīng)活檢確診為NPC[7]；②具有完整臨床資料及隨訪資料；③無精神或意識(shí)障礙的患者；患者知情同意并簽署知情同意書；④首次確診為NPC并進(jìn)行治療。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①合并嚴(yán)重心、腦、肝、腎等器官疾病患者；②預(yù)計(jì)生存期≤3個(gè)月，無法完成治療的患者；③化療禁忌證的患者；④長(zhǎng)期使用免疫抑制劑者；⑤凝血功能異常者。

1.3 治療方法

入院后，對(duì)患者及家屬進(jìn)行健康宣講，忌煙、忌酒等[8]，完善相關(guān)檢查檢驗(yàn)后，均予以新輔助化療2周期。新輔助化療方案：每周期第1天使用多西他賽注射液60 mg·m-2，每周期第1天使用順鉑60 mg·m-2，每周期第1～14天使用替吉奧片60 mg·m-2。2組新輔助化療結(jié)束后均予以同步放化療。同步放療采用調(diào)強(qiáng)放療[9]，原發(fā)灶區(qū)處方劑量為72 Gy/32 f；累淋巴結(jié)區(qū)處方劑量為70.4 Gy/32 f；高危臨床靶區(qū)的處方劑量為64 Gy/32 f；低危臨床靶區(qū)的處方劑量為57.6 Gy/32 f；頸部預(yù)防照射區(qū)的處方劑量為50.4 Gy/28 f。同步化療為單藥順鉑70 mg/m2，治療持續(xù)2～3個(gè)周期。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 CXCR4表達(dá)情況 采用SP3步法免疫組化染色(鼠抗人CXCR4單克隆抗體及免疫試劑盒購(gòu)自北京中山公司)對(duì)癌組織及癌旁組織CXCR4表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。隨機(jī)抽取10個(gè)高倍鏡視野進(jìn)行觀察，綜合細(xì)胞染色數(shù)目及強(qiáng)度判斷CXCR4表達(dá)情況，CXCR4主要在胞膜和細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)。細(xì)胞染色強(qiáng)度計(jì)分分為4級(jí)：0分(無色)、1分(淡黃色)、2分(棕黃色)以及3分(棕褐色)。陽性細(xì)胞數(shù)百分率計(jì)分分為5級(jí)：0分(陽性細(xì)胞<5%)、1分(陽性細(xì)胞數(shù)5%～25%)、2分(陽性細(xì)胞數(shù)25%～50%)、3分(陽性細(xì)胞數(shù)50%～75%)，4分(陽性細(xì)胞數(shù)>75%)。兩項(xiàng)評(píng)分之積為0分則為陰性，反之則為陽性[10]。

1.4.2 臨床特征 通過問卷調(diào)查收集2組患者性別、年齡、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分型以及化療效果的臨床特征資料。

1.4.3 生存時(shí)間 從患者治療結(jié)束后開始對(duì)患者進(jìn)行為期3年的隨訪，統(tǒng)計(jì)患者3年生存以及3年無進(jìn)展生存情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。本組數(shù)據(jù)均為計(jì)數(shù)資料，以例數(shù)(百分率)[n(%)]表示，使用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較，P<0.05，表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組病理組織中CXCR4表達(dá)情況比較

CXCR4在觀察組中陽性表達(dá)率為46.39%(45/97)，在對(duì)照組中陽性表達(dá)率為15.00%(9/60)，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.189，P<0.001)。

2.2 鼻咽癌患者病理組織中CXCR4表達(dá)與臨床特征和化療療效的關(guān)系

鼻咽癌患者病理組織中CXCR4表達(dá)陽性與否在性別構(gòu)成、年齡構(gòu)成以及病理分型方面差異不顯著(P>0.05)，而TNM分期Ⅲ期、Ⅳ期與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和化療效果SD、PD的CXCR4陽性表達(dá)率顯著高于陰性表達(dá)率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，見表1。

表1 鼻咽癌患者病理組織中CXCR4表達(dá)與臨床特征和化療療效的關(guān)系(例，%)

2.3 鼻咽癌患者病理組織中CXCR4表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系

病理組織中CXCR4表達(dá)陽性的鼻咽癌患者化療后3年生存率為57.78%、3年無進(jìn)展生存率為40.00%；CXCR4表達(dá)陰性的鼻咽癌患者3年生存率為96.15%、3年無進(jìn)展生存率為71.15%，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

表2 鼻咽癌患者病理組織中CXCR4表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系(例，%)

3 討論

NPC發(fā)病的高峰期為40～60歲的中年群體，以非角化型低分化鱗癌最為常見，其發(fā)病為多因素、多階段的過程，埃-巴二氏病毒感染、遺傳和環(huán)境因素等被認(rèn)為是NPC發(fā)生的重要因素[11-12]。由于NPC解剖位置特殊，鼻咽黏膜固有層淋巴管網(wǎng)分布極為豐富，極易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，研究顯示放療5年生存率不足5%，導(dǎo)致患者預(yù)后不良的主要由因素為NPC轉(zhuǎn)移[13]。腫瘤細(xì)胞以及腫瘤間質(zhì)細(xì)胞通過表達(dá)和分泌趨化因子及其受體，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞有絲分裂，抑制其凋亡，還可引起腫瘤細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白的聚合并形成偽足，進(jìn)而可提高腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力。但目前關(guān)于NPC病理組織中CXCR4表達(dá)與患者臨床病理特征、新輔助化療療效及預(yù)后的關(guān)系仍需進(jìn)一步探究。

CXCR4屬于高度保守的蛋白偶聯(lián)的7次跨膜受體，是基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(Stromal cell derived factor-1，SDF-1)的趨化因子受體。SDF-1/CXCR4軸介導(dǎo)的信號(hào)傳遞與細(xì)胞移動(dòng)，不僅參與機(jī)體胚胎發(fā)生、免疫反應(yīng)和炎癥等生理過程，還參與淋巴細(xì)胞歸巢、腫瘤組織的血管生成及細(xì)胞轉(zhuǎn)移等多種病理過程[14]。文獻(xiàn)報(bào)道在乳腺癌、甲狀腺癌以及非小細(xì)胞肺癌等上皮、間葉、造血來源的腫瘤細(xì)胞中均有異常表達(dá)[15]。本研究結(jié)果顯示CXCR4在觀察組中陽性表達(dá)率為46.39%，顯著高于在對(duì)照組中陽性表達(dá)率15.00%，癌組織中CXCR4表達(dá)水平顯著高于癌旁組織，提示CXCR4在癌組織發(fā)生及發(fā)展過程中可能發(fā)揮重要作用。CXCR4一方面可通過自分泌或旁分泌的形式刺激腫瘤細(xì)胞增殖；另一方面與SDF-1受體結(jié)合后可引起靶細(xì)胞重構(gòu)、并產(chǎn)生定向遷移，控制其轉(zhuǎn)移。魯保才等研究顯示靶向沉默人鼻咽癌細(xì)胞系中CXCR4基因表達(dá)，可降低細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移能力，推測(cè)與CXCR4對(duì)Wnt/β-catenin 信號(hào)通路的介導(dǎo)作用有關(guān)[16]。

吳唯等研究顯示CXCR4在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分期高的乳腺癌組織中高表達(dá)[17]。本研究結(jié)果顯示，不同性別構(gòu)成、年齡構(gòu)成以及病理分型NPC患者癌組織中CXCR4陽性表達(dá)率與陰性表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而TNM分期為Ⅲ期及Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、化療效果為SD以及PD的NPC患者癌組織中的CXCR4陽性表達(dá)率顯著高于陰性表達(dá)率，提示CXCR4表達(dá)水平與NPC惡性程度及近期治療效果密切相關(guān)。TNM分期為Ⅲ期及Ⅳ期的患者及發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的CXCR4表達(dá)陽性率偏高，分析其原因可能為，CXCR4可介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移至SDF-1高表達(dá)的組織，促進(jìn)癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移至淋巴結(jié)、肺部等，導(dǎo)致NPC臨床分期升高[18]。此外分期靠后、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者往往腫瘤的惡性程度較高，有文獻(xiàn)指出腫瘤細(xì)胞中CXCR4表達(dá)具有缺氧誘導(dǎo)因子依賴性，腫瘤惡性程度高、缺氧誘導(dǎo)因子水平高也可能導(dǎo)致CXCR4高表達(dá)[19]。

NPC的臨床治療以減少腫瘤的轉(zhuǎn)移與局部復(fù)發(fā)，提高生存率及生存質(zhì)量為主要治療目的。本研究中患者均采用新輔助化療后同步放化療進(jìn)行治療，但患者預(yù)后水平存在較大差異。對(duì)癌組織中CXCR4表達(dá)水平不同的患者預(yù)后情況進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)癌組織中CXCR4表達(dá)陽性的NPC患者治療后3年生存率、3年無進(jìn)展生存率顯著低于CXCR4表達(dá)陰性的NPC患者(57.78% vs.96.15%，40.00% vs.71.15%)。CXCR4可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，提高腫瘤細(xì)胞活性，不僅降低治療效果，還增加放化療治療后淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，影響患者預(yù)后。此外宋現(xiàn)運(yùn)等研究認(rèn)為NPC順鉑耐藥細(xì)胞系中CXCR4水平上升，降低了CXCR4基因表達(dá)后，NPC順鉑耐藥細(xì)胞系的耐藥性降低，CXCR4可能通過調(diào)控B淋巴細(xì)胞瘤-2基因及l(fā)et-7a基因表達(dá)提高NPC癌細(xì)胞耐藥能力，從而降低化療治療效果[20]。

綜上所述，NPC患者癌組織中CXCR4表達(dá)水平高于癌旁組織，且與患者臨床病理特征、化療效果及生存時(shí)間密切相關(guān)，可能可以作為臨床治療及預(yù)后判斷的新靶點(diǎn)。