藍莓粗提物HPLC色譜條件考察*

李冰晶，羅麗平，趙景芳，王代波，劉國華，文光琴

(1貴州省生物研究所，貴州 貴陽 550009；2貴州省植物園，貴州 貴陽 550009)

藍莓(Vacciniumuliginosum)，又稱越桔或藍漿果，屬杜鵑花科越桔屬落葉灌木植物，藍莓中含有非常豐富的營養成分，被譽為“漿果之王”[1]，果實中含有豐富的維生素、膳食纖維、蛋白質和礦物質等營養元素，其中藍莓中花青素含量較高。藍莓果實中含有的活性物質具有抗衰老、緩解視疲勞、改善記憶力、抗氧化、抗癌癥等功效[2]。

藍莓中含有多種活性物質，花青素為其中含量較高的一種[3]。為了更好地研究藍莓粗提物中成分，利用高效液相色譜(HPLC)對藍莓提取物進行分析[4-10]，通過單因素分析法，考察流動相組成、流速、柱溫、進樣量和時間梯度等對藍莓粗提物分離的影響，從而確定出HPLC測定藍莓粗提物的最佳條件。

1 實驗材料

1.1 實驗原料與試劑

藍莓，由麻江羊蓋藍莓基地提供；乙醇(食品級)；乙腈(色譜純)；甲醇(色譜純)；磷酸(分析純)；乙酸(分析純)；蒸餾水；AB-8型大孔樹脂，購于上海藍季。

1.2 實驗儀器

Agilent1260高效液相色譜；BUCHI R114旋轉蒸發儀；DZF-6021真空干燥箱；722S型可見光分光光度計；GTR16-2型離心機；DKS-28型電熱恒溫水浴鍋；電子天平A2004；PHSJ-4A型PH計；DW-4OL262型醫用低溫保存箱；BCD-206SM型海爾冰箱。

2 實驗方法

2.1 樣品制備

將新鮮藍莓稱重置于燒瓶中，加入75 %的乙醇密封避光浸泡15 d。過濾，濃縮提取液，用大孔樹脂對濃縮液進行初步分離，得到水洗脫的蒸餾水流份和乙醇洗脫的藍莓提取物流份，濃縮藍莓提取物流份，得到藍莓粗提物。

2.2 HPLC色譜條件考察

影響高效液……