萊菔頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

◎ 陽(yáng)文武，黃艷萍，向春燕，周 濃

（1.重慶市萬(wàn)州食品藥品檢驗(yàn)所，重慶 404000；2.重慶三峽學(xué)院 生物與食品工程學(xué)院，三峽庫(kù)區(qū)道地藥材綠色種植與深加工重慶市工程實(shí)驗(yàn)室，重慶 404120；3.重慶市黔江食品藥品檢驗(yàn)所，重慶 409000）

萊菔頭為傳統(tǒng)食藥兩用藥，使用歷史悠久，全國(guó)各地均有栽培，被收載于各地地方標(biāo)準(zhǔn)，來(lái)源于十字花科蘿卜屬植物蘿卜（Raphanus sativusL.）開(kāi)花結(jié)實(shí)后的老根，其新鮮根是大眾喜愛(ài)的蘿卜，具有行氣消積、宣肺化痰、利水消腫等功效，用于治療食積氣滯、腹脹痞滿、痢疾、咳嗽痰多、腳氣以及水腫等[1-6]。萊菔頭含黃酮、有機(jī)酸、維生素C以及氨基酸等化學(xué)成分[4]。目前，各類標(biāo)準(zhǔn)中萊菔頭的質(zhì)量控制指標(biāo)尚無(wú)顯微鑒別和成分含量測(cè)定等項(xiàng)目[4]，為此本試驗(yàn)采集7批不同產(chǎn)地萊菔頭，考察其顯微特征、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物以及總黃酮等指標(biāo)，旨在確立萊菔頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

島津UV-2501紫外分光光度計(jì)；奧林巴斯BX53型顯微鏡；AB204S型萬(wàn)分之一天平；KH-2000DB超聲波清洗器；ED53干燥箱；SDLA-B-1101型超純水機(jī)；SX2-5-12電阻爐。

水為超純水，其余試藥為分析純；蘆丁對(duì)照品（批號(hào)：100080-201811，含量92.4%，中檢院）。

試驗(yàn)所用萊菔頭樣品采集自重慶、湖北、河南、山東及安徽等地，均由重慶三峽學(xué)院周濃教授鑒定為蘿卜（Raphanus sativusL.）開(kāi)花結(jié)實(shí)后的老根。樣品清洗后，切片，35 ℃烘干，粉碎過(guò)篩后備用。

1.2 方法

1.2.1 顯微特征分析

取萊菔頭粉末置于奧林巴斯BX53型顯微鏡下觀察。

1.2.2 水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物測(cè)定

參照2020年版《中華人民共和國(guó)藥典》四部方法對(duì)萊菔頭的水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物進(jìn)行測(cè)定[7]。

1.2.3 總黃酮含量測(cè)定

（1）對(duì)照品貯備溶液的制備。取蘆丁對(duì)照品精密稱定21.43 mg，置于50 mL量瓶中，以70%乙醇溶解并定容至刻度，制成0.396 mg·mL-1的蘆丁對(duì)照品貯備液。

（2）對(duì)照品溶液的制備。精密量取蘆丁對(duì)照品貯備液0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL及0.8 mL，置于10 mL量瓶中，分別補(bǔ)加70%乙醇至4 mL，加入5%亞硝酸鈉溶液0.4 mL，搖勻，靜置6 min；再分別加入10%硝酸鋁溶液0.4 mL，搖勻，靜置6 min；最后分別加入4%氫氧化鈉溶液4 mL，用水定容至刻度，搖勻，靜置15 min。

（3）供試品溶液制備。精密稱取萊菔頭粉末（過(guò)三號(hào)篩）1.0 g，置于錐形瓶中，加70%乙醇30 mL，超聲提取30 min，過(guò)濾，濾渣再重復(fù)提取1次，合并濾液，減壓回收至干，以70%乙醇溶解并定容至10 mL量瓶中，搖勻，精密量取4.0 mL，照1.2.3（2）項(xiàng)的方法，自“加入5%亞硝酸鈉溶液0.4 mL”起制備，即得。

（4）測(cè)定。以相應(yīng)的試劑為空白，在510 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定各溶液的吸光度。

2 結(jié)果與分析

2.1 顯微特征

萊菔頭粉末為淺黃棕色，顯微特征如圖1所示。由圖1可知，導(dǎo)管多為具緣紋孔導(dǎo)管，較大，紋孔較密。木纖維呈長(zhǎng)條狀或不規(guī)則長(zhǎng)梭形，多彎曲，末端較尖，有的一端分枝，單斜紋孔或相交成十字形，稀疏。網(wǎng)紋細(xì)胞形狀不規(guī)則，具網(wǎng)狀紋孔，紋孔大，卵圓形或不規(guī)則形。

圖1 萊菔頭粉末顯微特征圖

2.2 水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物檢測(cè)結(jié)果

由表1可知，7批萊菔頭水分、總灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量范圍分別為8.1%～11.1%、15.1%～19.0%、1.2%～3.4%和14.5%～19.8%。

表1 萊菔頭中水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的含量表

2.3 總黃酮含量測(cè)定

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

取1.2.3（2）項(xiàng)下的各對(duì)照品溶液依法測(cè)定，以蘆丁的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程Y=10.351X+0.0218，r為0.999 8，蘆丁的線性范圍為0.001 98～0.031 68 mg·mL-1。

2.3.2 方法學(xué)考察

（1）精密度與重復(fù)性試驗(yàn)。取S6粉末約1 g，精密稱定，按照1.2.3（3）項(xiàng)方法制備樣品溶液，依法重復(fù)測(cè)定6次，得吸光度的平均值為0.155，RSD為0.05%，表明儀器精密度符合要求。精密稱取S6粉末6份，每份約1 g，按照1.2.3（3）項(xiàng)方法制備供試品溶液，依法測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得。結(jié)果顯示總黃酮的平均含量為0.16%，RSD為1.6%，結(jié)果表明方法重復(fù)性良好。

（2）加樣回收率試驗(yàn)。精密稱取已知含量的萊菔頭粉末6份，每份約0.5 g，分別精密加入濃度為0.396 mg·mL-1的蘆丁對(duì)照品貯備液2.0 mL，按照1.2.3（3）項(xiàng)方法制備供試品溶液，依法測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果表（n=6）

2.3.3 樣品測(cè)定

按照1.2.3（3）項(xiàng)方法制備各供試品溶液，依法測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得，結(jié)果見(jiàn)表3。7批萊菔頭中總黃酮含量為0.13%～0.47%，平均含量為0.26%。

表3 萊菔頭中總黃酮的含量表

3 結(jié)論與討論

水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物是評(píng)價(jià)藥材品質(zhì)的重要指標(biāo)。由結(jié)果可知，7批萊菔頭水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量范圍分別為8.1%～11.1%、15.1%～19.0%、1.2%～3.4%、14.5%～19.8%，大部分不符合《四川省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》2010年版標(biāo)準(zhǔn)中水分不得過(guò)9.0%，總灰分不得過(guò)18.5%，酸不溶性灰分不得過(guò)1.5%，浸出物不得少于18.0%的要求[4]，建議修訂其限量值。

黃酮類化合物有多種藥理作用，具有止咳、祛痰、平喘及抗菌的活性，同時(shí)具有護(hù)肝，解肝毒，抗真菌，治療急、慢性肝炎等功效。該試驗(yàn)測(cè)定了7批萊菔頭中總黃酮含量，結(jié)果為0.13%～0.47%，平均含量為0.26%，這是首次對(duì)萊菔頭中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定，對(duì)其質(zhì)量控制有重要的意義。

本試驗(yàn)通過(guò)研究不同產(chǎn)地萊菔頭，建議暫定萊菔頭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為水分不得過(guò)12.0%、總灰分不得過(guò)20.0%、酸不溶性灰分不得過(guò)4.0%、浸出物不得少于13.0%以及總黃酮以蘆丁計(jì)不得少于0.10%。