頸動脈超聲聯合血清微小RNA檢測對短期繼發腦梗死的診斷價值*

王適達，王海虹，張立娜

河北省保定市第二中心醫院：1.功能科；2.神經內科；3.老年病科，河北保定 072750

短期繼發腦梗死指缺血性腦卒中，屬于腦血管疾病，致病原因有腦部缺氧、血液循環障礙、腦部缺血等，按照臨床表現可分為腔隙性梗死、部分前循環梗死、全前循環梗死、后循環梗死[1-3]。有資料證明,動脈栓塞、血栓形成、載體動脈病變堵塞穿支動脈、心肌病等也會導致此病的發生[4]。目前可以通過超聲、CT、磁共振(MRI)等對該病進行檢查。血液檢查具有快速、簡便、經濟等優點。有研究顯示，通過微小RNA檢測可以很快地幫助醫生判斷短期繼發腦梗死患者病情嚴重程度，及時對患者給予正確的治療，避免不良事件的發生。除此之外，頸動脈超聲也可以很好地幫助醫生診斷此病，但目前臨床工作中關于miR-124、miR-155、miR-23與頸動脈超聲聯合檢測的相關文章較少，本文旨在研究頸動脈超聲與血清miR-124、miR-155、miR-23聯合檢測對短期繼發腦梗死的診斷價值及影像學特征，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年6月至2020年6月在本院治療的58例短期繼發腦梗死患者納入短期繼發腦梗死組，其中男28例，女30例；年齡60～74歲，平均(63.65±6.65)歲。選取同期在本院體檢的58例健康體檢者納入對照組，其中男29例，女29例；年齡61～75歲，平均(64.6±6.65)歲。兩組年齡、性別等一般資料比較，差異無統計意義(P>0.05)，具有可比性。本研究中的研究對象及家屬均知情并簽署知情同意書，經本院倫理委員會批準。納入標準：所有短期繼發腦梗死患者均經檢查后確診，符合《中國腦梗死中西醫結合診治指南(2017)》[5]中短期繼發腦梗死的診斷標準。排除標準：哺乳期、妊娠期女性，精神病患者，腦部創傷患者，合并其他腫瘤患者。

1.2方法

1.2.1頸動脈超聲 采用TOSHIBA公司Aplio300型彩色多普勒聲像儀進行頸動脈彩超檢查，并進行腦部超聲檢查，使用10 MHz線陣式探頭，對短期繼發腦梗死患者頸內外動脈、雙側頸總動脈、顱腦部進行檢查。觀察并判斷狹窄的位置，在狹窄處測定血管狹窄程度。狹窄程度判斷：≤50%為輕度狹窄，>50%～75%為中度狹窄，>75%～99%為重度狹窄。超聲檢查：雙側側腦室擴張，內充滿強回聲，腦組織內出現強回聲區，腦組織受壓變薄，中線移位，側腦室受壓變形為腦實質出血；側腦室下方尾狀核頭部一個或多個強回聲團，冠狀位前角出現為腦室出血；硬腦膜帶狀強回聲與顱骨之間顯示帶狀或不規則形無回聲，慢性呈低或強回聲為血腫。

1.2.2MRI檢查 采用西門子1.5T MRI掃描儀進行檢查，自旋回波，然后對顱腦部進行掃描。所得圖像均由兩位經驗豐富的心腦血管疾病醫生進行閱片。MRI檢查表現為血液長T1、長T2信號，彌散像呈高信號，血腫處T1、T2均呈明顯高信號，T2周邊見線樣低信號環的為腦實質出血；MRI檢查表現為局部不規則低密度區，腦血管造影處可見不規則且扭曲的血管團為腦室出血；MRI檢查表現為T1加權像上呈低信號，周圍可形成相對比較明顯的水腫帶為血腫。

1.2.3miR-124、miR-155、miR-23檢測 采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-PCR)法檢測血清miR-124、miR-155、miR-23水平，使用紫外分光光度儀檢測所提取的RNA純度，總RNA純度鑒定運用聚丙烯酰胺凝膠電泳。利用PCR試劑盒合成cDNA。反轉錄：14 μL模板RNA、2 μL Enzyme mix，4 μL 5×RT緩沖液補至20 μL，之后將所合成的cDNA放置于溫度為-20 ℃冰箱內進行保存。反應體系：8 μL cDNA模板、10 μL SYBRP Green mix、2 μL PCR Primer mix。反應條件：95 ℃ 10 min；95 ℃ 10 s；60 ℃ 1 min；40個循環。以U6為內參，采用2-ΔΔCt方法計算miR-124、miR-155、miR-23水平。miR-124引物序列：上游為5′-GAGGATCTTCATGAGGTAGTCAGT-3′，下游為5′-CTGGCACCACACCTTCTACAATGAGC-3′；miR-155引物序列：上游為5′TAGAAGGCACAGTCGAGG-3′，下游為5′-CAGGAAACAGCTATGAC-3′；miR-23引物序列：上游為5′-GCCTGAGACTCTGCCTTCTG-3′，下游為5′-CAGCTGCATTGGATTTACCA-3′。

2 結 果

2.1頸動脈超聲、MRI對短期繼發腦梗死患者頸動脈狹窄程度的檢出情況 以臨床診斷結果作為金標準，與頸動脈MRI檢查相比，頸動脈超聲檢查的檢出率升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 頸動脈超聲、MRI對短期繼發腦梗死患者頸動脈狹窄程度的檢出情況[n(%)]

2.2短期繼發腦梗死患者頸動脈超聲、MRI檢查的影像學特征 與MRI檢查相比，超聲檢查出硬膜下出血、腦實質出血、腦室出血、血腫的檢出率升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 短期繼發腦梗死患者頸動脈超聲、MRI檢查的影像特征情況比較[n(%)]

2.3短期繼發腦梗死組與對照組miR-124、miR-155、miR-23水平比較 與對照組相比，短期繼發腦梗死組miR-124、miR-155、miR-23水平升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組miR-124、miR-155、miR-23水平比較

2.4頸動脈超聲、MRI分別聯合miR-124、miR-155、miR-23檢測對短期繼發腦梗死的診斷價值 與MRI聯合miR-124、miR-155、miR-23檢測相比，頸動脈超聲聯合miR-124、miR-155、miR-23檢測診斷短期繼發腦梗死的靈敏度、特異度、準確度更高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 頸動脈超聲、MRI分別聯合miR-124、miR-155、miR-23檢測對短期繼發腦梗死的診斷價值比較(%)

如圖1所示，超聲檢查發現短期繼發腦梗死患者左側大腦中動脈及中動脈上干閉塞，左側大腦前動脈通過軟膜支向大腦中動脈區域代償供血。圖2提示MRI檢查發現患者腦實質出血，基底核密度稍減低，右側顳葉腦溝變淺，增強后患者出血位置表現為不同程度的強化。

注：A為左側大腦中動脈及中動脈上干閉塞；B為左側大腦前動脈通過軟膜支向大腦中動脈區域代償供血。

2.5miR-124、miR-155、miR-23、頸動脈超聲對短期繼發腦梗死的診斷價值 ROC曲線分析提示，4項聯合檢測的診斷價值較高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表5。

注：A為腦實質出血；B為左側顳葉腦溝變淺。

表5 miR-124、miR-155、miR-23、頸動脈超聲對短期繼發腦梗死的診斷價值

3 討 論

短期繼發腦梗死是腦血管疾病中最常見的類型，占腦血管疾病的70%，發病人群主要集中在肥胖者、高血壓患者、糖尿病患者、中老年人群，其中老年人患病率較高[6]。短期繼發腦梗死可以從病因、梗死部位進行疾病分類[7]。其中中期短期繼發腦梗死患者多出現四肢癱、意識障礙、昏迷、應激性潰瘍等癥狀[8-9]。

醫學影像學可以擴大疾病在人體的檢查范圍，目前影像學診斷還在不斷發展。MRI是由射頻系統、計算機圖像重建系統、磁鐵系統組成的，分析的方式有灰度像素點、全局圖像、灰度定位，能有效區分患者腫瘤組織、炎癥信號等[10-11]。曹曉軒等[12]研究發現，通過MRI檢查可以幫助醫生快速掌握短期繼發腦梗死的病理特征，但是MRI檢查可能會對部分患者造成一定的不適感。頸動脈超聲檢查是檢測此類疾病最為常見的方法，屬于非創傷性檢查技術，可以很好地評估大動脈血管病變的程度及血液流動的情況，幫助醫生評估病情及判斷預后情況[13]。馮錦麗等[14]研究發現，動脈的狹窄程度與該病的發生有明顯的相關性，尤其是頸動脈狹窄超出50%的患者其患病率明顯增高，證實了頸動脈超聲可以用來判斷是否存在異常病變。以上結果說明，通過頸動脈超聲檢查可以很好地檢測并由此觀察短期繼發腦梗死的影像表現，可以很好地幫助醫生進行診斷，也可以更快地給出針對性的治療方案。

miR-124、miR-155、miR-23水平的變化可反映短期繼發腦梗死的嚴重程度，經研究發現miR-124、miR-155、miR-23參與腦梗死的發病過程，顯示出炎癥的損傷程度。miR-124是一種使巨噬細胞活化和小膠質細胞靜止的關鍵調節劑，可以達到促進康復的作用[15]。miR-124檢測為陽性的患者，病死率要高于陰性的患者(在正常值的范圍內可促進康復，在疾病狀態下該指標不處于正常值范圍，而是處于上升狀態，故病死率較高)[16]。多項研究發現，miR-124可能參與了疾病的進展及整個病理生理的過程，可影響炎性反應及對細胞凋亡的調控等，對預后同樣具有重要的影響[17-18]。而miR-155可調控急性炎癥，可以起到一定的免疫抑制作用。王興萍等[19]研究發現，miR-155的表達量可以反映出機體炎性反應，其中效應性T細胞以及特異性抗體的產生，可以在特異性免疫及固有免疫中起到關鍵的作用，并參與短期繼發腦梗死的炎性反應[20]。頸動脈超聲聯合血清miR-124、miR-155、miR-23檢測短期繼發腦梗死的靈敏度、特異度、準確度較高，說明4項聯合檢測的診斷效能較高[21]。本研究中短期繼發腦梗死患者以重度狹窄患者為主，患者分布較為集中，因此需要加大樣本量進一步研究。

綜上所述，本研究發現頸動脈超聲聯合血清miR-124、miR-155、miR-23檢測對短期繼發腦梗死具有較高的診斷價值。