血清維生素D、糖類抗原125及高遷移率簇蛋白B1水平與子宮內膜異位癥患者臨床分期的相關性分析

張 倩，李娟娟，賈麗華

(北京市通州區婦幼保健院婦產科，北京 101100)

子宮內膜異位癥(Endometriosis，EMS)是一類婦科常見病，發病率占女性群體的6%～10%，雖然被歸類為良性疾病，但有惡變風險，卵巢子宮內膜異位囊腫惡變率約為1%[1]。EMS診治指南指出，目前EMS診斷的通行手段是腹腔鏡下對病灶形態的觀察[2]，但腹腔鏡為有創檢查方法，臨床應用受限，EMS診斷尚缺乏有效的無創檢查措施。有研究顯示，糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)等腫瘤標志物在EMS病理中發揮著重要作用，聯合檢查有助于EMS的診斷及病情評估[3]。但相關研究對不同種類的血清標志物診斷效能仍有爭議，目前尚無確切定論的理想檢測方法。有文獻指出，維生素D(VitD)可通過VitD-VitD受體系統及調節免疫、炎癥反應、細胞增殖及凋亡、血管生成、細胞黏附及侵襲等方面參與子宮內膜異位癥的發病[4]。此外，高遷移率簇蛋白B1(HMGB1)是近年研究發現可能參與EMS病理生理機制的晚期炎性介質，在EMS中表達水平升高[5]。以上研究表明，血清VitD、CA125、HMGB1均與EMS的發生發展密切相關，或可為EMS的診斷和病情評估提供有效信息。基于此，本研究納入80例EMS患者和40例同期健康體檢者作為研究對象，以探究血清VitD、CA125、HMGB1水平變化與EMS的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料納入2018年12月至2019年12月我院收治的70例EMS患者和40例健康體檢者。納入標準：均為育齡女性，EMS患者均經腹腔鏡確診；近3月內無激素、維生素D用藥史者。排除標準：嚴重器官功能障礙、惡性腫瘤者；免疫系統疾病者；婦科急性炎癥及其他盆腔病變者。研究對象均已簽署知情同意書，本研究經我院倫理委員會審核通過。

1.2 方法收集患者臨床資料，均于入院后采集患者外周靜脈血，3000 r離心10 min后采集上清液保存，采用酶聯免疫法(ELISA)測定患者VitD、CA125、HMGB1，試劑盒購自上海酶聯生物科技有限公司和江萊生物科技有限公司，均使用318C+型全自動酶標儀(上海沛歐分析儀器有限公司生產)，檢測流程均嚴格按照試劑盒說明書和儀器操作手冊進行。ELISA：取適量標準品、質控品和血清樣本加入到包被了單抗抗體的微孔中，震蕩混勻，根據說明書進行孵育，洗滌劑洗板3～5次，吹干后加入酶標試劑，根據說明書進行孵育，重復洗板，利用底物顯色，加入反應終止液，采用酶標儀450 nm讀數。

1.3 觀察指標觀察兩組VitD、CA125、HMGB1水平，評估不同R-AFS分期EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平，不同病理類型EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平。

1.4 統計學方法應用SPSS 19.0統計軟件進行數據分析。偏態分布計量數據以中位數(P25，P75)表示，多組間對比行Kruskal-Walls檢驗，兩組組間對比行Mann-WhitneyU檢驗；正態分布計量資料據以均數±標準差表示，多組間對比行單因素方差分析，兩組間比較行t檢驗；計數資料以[n(%)]表示，行χ2檢驗，相關性分析采用Spearman相關分析法，指標評估效能采用受試者工作曲線(ROC)。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組基線資料、血清VitD、CA125、HMGB1水平比較兩組年齡比較差異無統計學意義，觀察組VitD低于對照組，CA125、HMGB1高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組基線資料、血清VitD、CA125、HMGB1水平比較

2.2 不同病理類型EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平比較不同病理類型EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)；腹膜型、混合型VitD、CA125、HMGB1水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)，卵巢型CA125、HMGB1水平高于腹膜型、混合型(P<0.05)，卵巢型VitD水平低于腹膜型、混合型(P<0.05)。見表2。

表2 觀察組不同病理類型EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平比較

2.3 不同R-AFS分期EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平比較觀察組Ⅳ期VitD低于Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ期，且Ⅲ期VitD低于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05)；觀察組Ⅳ期CA125、HMGB1水平高于Ⅰ～Ⅱ期和Ⅲ期，且Ⅲ期CA125、HMGB1水平高于Ⅰ～Ⅱ期(P<0.05)。見表3。

表3 觀察組不同R-AFS分期EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平比較

2.4 VitD、CA125、HMGB1與R-AFS分期的相關性分析Spearman相關分析顯示：VitD與R-AFS分期呈負相關關系(P<0.05)，CA125、HMGB1均與R-AFS分期呈正相關關系(P<0.05)。見表4。

表4 VitD、CA125、HMGB1與R-AFS分期的相關性分析

2.5 VitD、CA125、HMGB1水平評估EMS患者臨床分期的價值ROC曲線顯示：VitD、CA125、HMGB1均是評估EMD臨床分期的有效指標(P<0.05)，三者并聯具有更高的評估效能，見表5及圖1。

表5 VitD、CA125、HMGB1水平評估EMS患者臨床分期的價值

圖1 VitD、CA125、HMGB1鑒別R-AFS分期Ⅰ～Ⅱ期的ROC曲線

3 討論

目前仍以子宮內膜種植學說作為EMS病理機制的主導理論，根據此學說，內膜細胞必須完成黏附-侵襲-血管形成的三部曲，在這一過程中，雌激素、局部環境的多種酶、細胞因子等都起到重要的調節作用[6]。因此，分析EMS患者的各血清細胞因子水平，有利于進一步了解EMS發病機制，并為臨床診治提供有效信息。EMS與CA125的相關研究較多，楊曼春等[7]研究顯示，EMS患者血清CA125水平升高，且其水平與EMS嚴重程度有關。但目前EMS與VitD、HMGB1相關性的研究較少，有學者指出，EMS是一種類腫瘤及自身免疫性疾病，VitD可能通過抗增殖、抗炎和免疫調節等機制對其產生影響[8]。殷欣等[9]也表示，EMS體內HMGB1表達明顯增多，并增加炎性因子的釋放使機體產生疼痛。故本研究從此方面入手，探討EMS與VitD、HMGB1、CA125相關性。

本研究結果顯示，觀察組CA125、HMGB1均高于對照組，VitD均低于對照組，這說明EMS患者血清CA125、HMGB1均處于高表達狀態，VitD處于低水平狀態，各指標均與EMS有關。CA125是一種高分子糖蛋白，在人體的輸卵管內膜、子宮內膜、心包膜等組織中廣泛存在，正常情況下CA125基本不表達，但EMS患者異位的子宮內膜可促進CA125分泌，使EMS呈CA125高水平狀態[10]，CA125水平與EMS發生發展密切相關，與本研究結果相符。EMS發生還與免疫失調有關，有文獻指出，EMS患者外周血及腹腔液中CD4+CD25+Treg及Foxp3表達均增加，且Foxp3啟動了調節性T細胞的免疫抑制功能，使盆腔內免疫環境呈免疫耐受狀態[11]。而HMGB1、VitD均與免疫機制有關，相關文獻指出，單核細胞、巨噬細胞等受到炎性刺激會釋放HMGB1，介導免疫細胞的增殖、遷移、激活和成熟；同時有證據顯示HMGB1可能通過誘導Treg細胞向EMS病灶遷移并使其停留在病灶中，從而發揮免疫調控作用[12，13]。此外，新生血管生成是EMS的發病機制之一，而有研究發現，HMGB1可促進血管內皮生長因子和纖維細胞生長因子的表達，刺激血小板衍生生長因子的分泌等途徑，促進EMS病灶新生血管生成[14]。因此，HMGB1高表達在EMS發生進展中發揮重要作用，與本研究結果相符。而VitD能調節免疫功能，且與機體炎癥因子水平等有關，相關研究發現，VitD的活性成分1，25(OH)2D3具有調節th17細胞分化，抑制細胞因子分泌的作用[15]，且1，25(OH)2D3可通過抑制氧化應激、抑制細胞增殖等來減少新生血管形成[16]，因此，低水平VitD的EMS患者病情更嚴重，與本研究結果一致。

R-AFS分期可反映EMS疾病的嚴重程度，分期越高，疾病越嚴重[17]。而本研究數據顯示，觀察組各R-AFS分期EMS患者VitD、CA125、HMGB1水平對比差異有統計學意義，且CA125、HMGB1與R-AFS分期呈正相關關系，VitD與R-AFS分期呈負相關關系，這說明VitD、CA125、HMGB1均與EMS患者的病情嚴重程度有關。同時，本研究還發現，不同病理類型EMS患者各血清指標水平也存在差異，組間對比顯示卵巢型EMS患者CA125、HMGB1水平顯著高于腹膜型和混合型，VitD水平明顯低于腹膜型和混合型，卵巢型EMS病情進展程度或更高。進一步進行ROC曲線分析發現，VitD、CA125、HMGB1均可用于評估EMS患者臨床分期，其中單項指標評估中CA125效能最高，而并聯評估效能更高。故臨床診治EMS時，可通過監測血清CA125、HMGB1及VitD水平來輔助診斷，和了解患者病情進展狀況，也可根據實際情況適量補充外源性VitD以改善其療效。

綜上所述，不同R-AFS分期EMS患者CA125、HMGB1及VitD水平存在差異，卵巢型EMS患者各血清指標變化幅度更大，VitD與患者R-AFS分期呈負相關關系，CA125、HMGB1均與R-AFS分期呈正相關關系。