李 涵
(濮陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院,河南濮陽(yáng) 457000)
近年來(lái),由于世界范圍內(nèi)奶牛的繁殖性能不斷惡化,提高受胎率已成為奶牛生產(chǎn)養(yǎng)殖中面臨的重要問(wèn)題之一。雖然引起奶牛繁殖性能惡化的因素有很多,但最近的研究集中在提高黃體功能作為解決這一問(wèn)題的途徑。卵泡生長(zhǎng)過(guò)程中血漿孕酮水平降低被發(fā)現(xiàn)與胎齡降低有關(guān),同時(shí)早期妊娠期胚胎存活率低被證明與血漿孕酮濃度低有關(guān)(Inskeep,2004)。由于產(chǎn)后血漿孕酮水平與受孕率呈正相關(guān),因此,授精前內(nèi)源性孕酮濃度會(huì)影響胚胎恢復(fù)(劉廣振,2005),這些結(jié)果表明,產(chǎn)后黃體功能是影響生殖性能的關(guān)鍵因素之一。先前的研究已經(jīng)證明,日糧補(bǔ)充功能性原料或添加劑會(huì)導(dǎo)致血漿孕酮水平升高,如Petit 和Twagiramungu(2006)研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)充脂肪可以提高奶牛血漿孕酮水平,造成這種影響的機(jī)制可能與能量供應(yīng)有關(guān),但也被認(rèn)為與脂肪衍生亞油酸抑制前列腺素合成有關(guān)。此外,微量營(yíng)養(yǎng)素被認(rèn)為有助于黃體功能,如Kawashima等(2010)報(bào)道,β -胡蘿卜素的供應(yīng)支持奶牛產(chǎn)后黃體活性的重建以及增強(qiáng)卵巢功能和孕酮合成。本研究重點(diǎn)研究了硒對(duì)奶牛產(chǎn)后采食量和孕酮水平的影響。眾所周知,硒是動(dòng)物必需的微量礦物質(zhì),對(duì)動(dòng)物繁殖性能有重要作用。嚴(yán)廷英(2015)報(bào)道了硒可降低泌乳奶牛子宮炎、卵巢囊腫發(fā)生率及從產(chǎn)犢到受孕的間隔時(shí)間。Molina等(2009)報(bào)道,給荷斯坦奶牛注射維生素E和硒2~4周可以提高產(chǎn)犢數(shù)及受胎率。但硒對(duì)生殖產(chǎn)生積極作用的機(jī)制和硒的靶組織尚不清楚。雖然一些與動(dòng)物繁殖功能的酶已被證實(shí)與硒有關(guān),但這些酶對(duì)動(dòng)物生殖功能的影響機(jī)理仍在研究中。因此,本研究旨在探討日糧添加富硒酵母對(duì)分娩后奶牛采食量、血液生化及激素水平的影響。
1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼料管理試驗(yàn)將分娩后28 d、平均初始體重為(616.97±4.51)kg的20頭奶牛隨機(jī)分為2組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)2頭,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)全混合日糧(以亞硒酸鈉的形式補(bǔ)充0.2 mg/kg硒),處理組飼喂基礎(chǔ)全混合日糧+2 g/kg富硒酵母(硒含量為100 mg/kg)。試驗(yàn)從分娩后28 d持續(xù)至112 d。試驗(yàn)期間奶牛自由采食全混合日糧,整個(gè)生產(chǎn)管理、環(huán)境條件維持一致。全混合日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 全混合日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.2 數(shù)據(jù)記錄分別在試驗(yàn)當(dāng)天、28、56和84 d(即分娩后28、56、84和112 d)早上飼喂前對(duì)每頭奶牛進(jìn)行稱重,每天早上8點(diǎn)和下午2點(diǎn)各飼喂1次,記錄每天的飼喂量及剩余的飼料量。
1.3 樣品采集與分析試驗(yàn)期間對(duì)奶牛稱重后立即頸靜脈采血10 mL,其中5 mL用于分離血漿,另外5 mL分離血清。血清樣品用商品試劑盒測(cè)定葡萄糖和尿素氮濃度,血漿樣品用于測(cè)定孕酮濃度,測(cè)定方法參考南京建成生工所試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。不同時(shí)期血漿硒濃度參考秦順義等(2007)的研究方法進(jìn)行。
1.4 數(shù)據(jù)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件單因素方差分析,采用T檢驗(yàn)進(jìn)行多重比較,P<0.05表示差異顯著。
2.1 日糧添加富硒酵母對(duì)分娩后奶牛采食量和體重的影響由表2可知,對(duì)照組與富硒酵母組對(duì)奶牛分娩后28、56、84和112 d的采食量和體重的影響均無(wú)顯著差異(P>0.05)。
2.2 日糧添加富硒酵母對(duì)分娩后奶牛血清生化和血漿硒濃度的影響由表3可知,對(duì)照組與富硒酵母組對(duì)奶牛分娩后28、56、84和112 d血清葡萄糖和尿素氮濃度的影響均無(wú)顯著差異(P>0.05),與對(duì)照組相比,富硒酵母組奶牛分娩后28、56、84和112 d血漿硒濃度分別顯著提高57.60%、62.12%、62.01%和61.88%(P<0.05)。

表3 日糧添加富硒酵母對(duì)分娩后奶牛血清生化指標(biāo)和血漿硒濃度的影響
2.3 日糧添加富硒酵母對(duì)分娩后奶牛血漿激素水平的影響由表4可知,對(duì)照組與富硒酵母組奶牛分娩后28、56、84和112 d血漿雌激素濃度及分娩后28和112 d血漿孕酮濃度的影響均無(wú)顯著差異(P>0.05)。與對(duì)照組相比,富硒酵母組奶牛分娩后56和84 d血漿孕酮濃度分別顯著提高66.15%和80.10%(P<0.05)。

表4 日糧添加富硒酵母對(duì)分娩后奶牛血漿激素水平的影響
產(chǎn)后對(duì)照組與富硒酵母組采食量和體重?zé)o顯著差異,說(shuō)明試驗(yàn)期間奶牛的能量攝入量無(wú)顯著差異。Cutulli等(2012)報(bào)道,能量負(fù)平衡、粗蛋白質(zhì)供過(guò)于求、產(chǎn)奶量高延緩了卵裂后卵巢功能的恢復(fù),導(dǎo)致受胎率低。因此,試驗(yàn)中除添加來(lái)源不同的硒外,硒處理組和對(duì)照組飼喂相同的營(yíng)養(yǎng)水平,以研究硒對(duì)血漿孕酮水平的影響。綜合整個(gè)試驗(yàn)結(jié)果看,兩組體重、采食量、血清葡萄糖、尿素氮濃度及不同階段血漿雌激素水平無(wú)顯著差異。而富硒酵母組奶牛在不同時(shí)期血漿中硒的濃度都顯著高于對(duì)照組。
因?yàn)閰⑴c膽固醇代謝(孕酮前體)的側(cè)鏈切割酶多次使用分子氧,產(chǎn)生自由基,因此,孕酮在生物合成過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生過(guò)氧化物(Young等,1995)。硒是一種抗氧化劑,是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、磷脂氫過(guò)氧化物谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和硫氧還蛋白還原酶的必要成分。根據(jù)這些信息,我們假設(shè)硒可以降解黃體中的過(guò)氧化物,從而維持其功能。為了提高奶牛受胎率,必須盡早恢復(fù)產(chǎn)后卵巢功能。在本研究中,日糧補(bǔ)充10 g/kg富硒酵母可以顯著提高分娩后56和84 d奶牛血漿中孕酮濃度,提示硒補(bǔ)充可以改善產(chǎn)后卵巢功能的早期恢復(fù)。盡管硒可以提高各種動(dòng)物的繁殖性能,但其靶組織尚未確定。奶牛產(chǎn)后血漿孕酮濃度與受胎率呈正相關(guān),提示硒激活黃體功能可提高奶牛繁殖性能(Staples等,1998)。
據(jù)推測(cè),過(guò)氧化物的產(chǎn)生可以誘導(dǎo)黃體組織進(jìn)行黃體分解,研究發(fā)現(xiàn),在黃體退化過(guò)程中,過(guò)氧化氫或脂質(zhì)過(guò)氧化在黃體組織中積累(Hesla等,2012)。Kamada和Ikumo(2017)報(bào)道,在黃體細(xì)胞中添加硒降低了細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物水平。因此,硒對(duì)過(guò)氧化產(chǎn)物的解毒作用可能有助于維持黃體的功能。孕酮濃度升高也與硒的抗氧化作用有關(guān)。在本研究中,我們并沒(méi)有對(duì)奶牛血清抗氧化酶及黃體進(jìn)行活檢,或?qū)ζ溥^(guò)氧化脂含量進(jìn)行評(píng)估,因?yàn)槲覀兛紤]到樣品的采集會(huì)影響孕酮含量的測(cè)定,但后續(xù)還需要進(jìn)一步從黃體組織形態(tài)變化及抗氧化酶活方面進(jìn)行評(píng)估。
全混合日糧添加2 g/kg富硒酵母可以顯著提高奶牛分娩后28~112 d血漿硒濃度及分娩后56和84 d血漿孕酮濃度,對(duì)奶牛采食量和體重?zé)o負(fù)面影響。