臺灣狗牙花的生物堿類化學成分

謝 靜，范春林，徐 杰，張 建，葉文才，3，張曉琦，3*

（1暨南大學藥學院中藥及天然藥物研究所，廣州510632；2暨南大學廣東省現代中藥工程技術研究中心，廣州510632；3國家藥品監督管理局中成藥質量評價重點實驗室，廣州510632）

臺灣狗牙花（Ervatamia pandacaquiPichon）為夾竹桃科（Apocynaceae）狗牙花屬植物，原產于菲律賓，主要栽培于我國臺灣省臺南市及廣東省南部島嶼；具有清熱降壓和消腫解毒的作用，常用于治療高血壓、咽喉腫痛、癰疽瘡毒、跌打損傷等；其化學成分研究較少［1］。狗牙花屬植物約有120種，主要分布于從印度起經中國西南部、越南、緬甸、泰國、馬來西亞、印度尼西亞、菲律賓到澳大利亞地區；我國產狗牙花主要有15個種和5個變種，分布于西南到華南及臺灣省等地區［2］。狗牙花屬植物中富含的生物堿結構復雜多變，生物活性顯著，本課題組前期系統地對該屬植物藥用狗牙花、海南狗牙花和臺灣狗牙花中的生物堿類成分進行研究，從中發現了一系列具有新穎骨架且生物活性好的化合物［3-8］。本研究又從臺灣狗牙花枝葉中分離得到11個生物堿類化合物，分別鑒定為：voacris?tine 7-hydroxyindolenine（1），iboxygaine（2），19Shydroxyibogamine（3），3-oxotabersonine（4），派利文堿（perivine，5），佩西立文（pericyclivine，6），rhazin?alinol（7），geissoschizol（8），3，14-dihydroolivacine（9），瓦萊薩明堿（vallesamine，10），conolobine A（11）。所有化合物均為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

V-550型紫外-可見光譜儀，FT/IR-480 Plus Fourier Transform型紅外光譜儀（日本Jasco公司）；Advantage Max質譜儀（美國Thermo Finnigan公司）；6210 ESI/TOF質譜儀，1200分析及制備型高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；AV-400型超導核磁共振儀（美國Bruker公司）。

柱色譜用硅膠（100~200目、200~300目，青島海洋化工廠）；RP18柱色譜填料（C18，10~40μm，德國Merck公司）；Sephadex LH-20（美國Pharmacia公司）。所用試劑均為分析純或化學純。

臺灣狗牙花植物于2015年9月采集于臺灣省臺南市，經香港科技大學董婷霞博士鑒定為臺灣狗牙花（Ervatamia pandacaquiPichon）的干燥枝葉。標本（No.CP2015091001）存放于暨南大學藥學院植物標本室。

2 提取與分離

臺灣狗牙花枝葉5.0 kg，粉碎成粗粉，用95%乙醇滲濾提取3次，減壓濃縮后得到總浸膏450 g，加水混懸后，用10%HCl調pH至2~3后，氯仿萃取，酸水層用氨水調pH至9~10，萃取液減壓濃縮得到粗總生物堿12.5 g。粗總生物堿部位通過硅膠柱色譜（石油醚-丙酮，100∶0→0∶100）得到10個餾分（Fr.1~10）。Fr.5經Sephadex LH-20柱色譜（氯仿-甲醇，1∶1）得到Fr.5A~5C；Fr.5B經ODS反相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）以及制備型HPLC純化得到化合物1［16 mg，乙腈-水（30∶70），tR=25.0 min］、化合物2［23 mg，乙腈-水（32∶68），tR=18.0 min］、化合物3［19 mg，乙腈-水（35∶70），tR=15.0 min］。Fr.7經Sephadex LH-20柱色譜（氯仿-甲醇，1∶1）得到Fr.7A~7C；Fr.7B經ODS反相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）以及制備型HPLC純化得到化合物8［21 mg，乙腈-水（50∶50），tR=27.0 min］、化合物9［27 mg，乙腈-水（47∶53），tR=23.0 min］、化合物11［18 mg，乙腈-水（42∶58），tR=28.0 min］。Fr.9經Sephadex LH-20柱色譜（氯仿-甲醇，1∶1）得到Fr.9A~9E；Fr.9C經ODS反相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）以及制備型HPLC純化得到化合物4［25 mg，乙腈-水（35∶65），tR=29.0 min］、化合物5［28 mg，乙腈-水（30∶70），tR=27.0 min］、化合物6［17 mg，乙腈-水（28∶70），tR=25.0 min］。Fr.10經Sephadex LH-20柱色譜（氯仿-甲醇，1∶1）得到Fr.10A~10C；Fr.10B經ODS反相柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜（甲醇）以及制備型HPLC純化得到化合物7［23 mg，乙腈-水（35∶70），tR=20.0 min］、化合物10［18 mg，乙腈-水（40∶70），tR=16.0 min］。

3 結構鑒定

Figure1 Chemical structures of compounds 1–11

32.2（C-15），25.7（C-6），12.2（C-18）。綜上所述，化合物數據與文獻［13］報道一致，故鑒定化合物5為派利文堿（perivine）。

（C-14），24.8（C-6），12.9（C-18）。綜上所述，化合物數據與文獻［13］報道一致，故鑒定化合物6為佩西立文（pericyclivine）。