葛根中黃嘌呤氧化酶抑制劑對GES-1細(xì)胞誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激保護(hù)作用

馮 航，方一帆，劉心越，湯小勝

(湖北師范大學(xué) a.食用野生植物保育與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,b.生物學(xué)國家級實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心,c.生命科學(xué)學(xué)院，湖北 黃石435002)

黃嘌呤氧化酶(XO)是一種重要的胞漿酶，可以催化次黃嘌呤氧化為黃嘌呤，并進(jìn)一步催化黃嘌呤氧化為尿酸。XO功能異常會(huì)導(dǎo)致高尿酸血癥、痛風(fēng)等多種疾病[1]。別嘌呤醇、別嘌硫醇和3,5-二取代-1,2,4-三唑是傳統(tǒng)的XO抑制劑[2]。這些抑制劑因具有進(jìn)行性腎功能衰竭、皮膚問題、史蒂文斯-約翰遜綜合征和重型肝炎等許多不良副作用而被限制使用[3-4]。因此，需要從天然產(chǎn)物提取物中制備出副作用小、療效好的XO抑制劑[5-6]。

天然產(chǎn)物提取物中含有生物活性化合物，其中，異黃酮類化合物是葛根提取液中的主要活性成分，對抗氧化性、高血壓和糖尿病具有諸多益處[7-8]。然而，由于天然產(chǎn)物提取物的成分復(fù)雜、活性成分分離困難且費(fèi)時(shí)，使其在相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用受到限制[9]。超濾與液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(UF-LC-MS)是從天然化合物等復(fù)雜混合物中篩選生物活性化合物的一種有效和廣泛應(yīng)用的技術(shù)[10]。

本文借助UF-LC-MS法從葛根提取液中篩選XO抑制劑，對4種與XO有結(jié)合活性的化合物進(jìn)行鑒定，并通過測定IC50驗(yàn)證其抑制性。通過評價(jià)細(xì)胞活性、細(xì)胞內(nèi)ROS、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脫氫酶(LDH)釋放和細(xì)胞凋亡等指標(biāo)，研究4種抑制劑對過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的人正常胃上皮細(xì)胞(GES-1細(xì)胞)氧化應(yīng)激模型的保護(hù)作用，旨在為葛根提取液對XO抑制作用和氧化應(yīng)激保護(hù)方面的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。……