蒙藥材白石脂中二氧化硅和三氧化二鐵含量的測定方法

白文明 渠弼 王來兵 那生桑

白石脂為硅酸鹽類礦物多水高嶺石族多水高嶺石的一種白色塊狀物，具有愈傷、接骨、干膿、止血、除腦疾等功效，是蒙藥制劑常用藥材之一[1]?，F行《中華人民共和國藥典(一部)》收載的成方制劑復方珍珠散的處方包含該藥材的炮制品煅白石脂，但白石脂本身并不是《中華人民共和國藥典(一部)》收載的藥材品種[2]?，F在有關白石脂質量標準的研究仍停留在性狀描述、理化鑒別及檢查等階段[1]，既無完善的藥材質量標準，也缺乏科學、系統的研究案例。尤其對白石脂化學成分的定量分析尚未見任何研究報道，屬于空白階段。白石脂作為原礦物藥，受到采集礦區的自然環境及形成過程等復雜因素的影響，不同批次藥材的化學成分可能存在差異[3]，而且藥材及飲片在市場流通過程中存在以次充好、以假亂真等現象[4-5]，所以建立白石脂相應化學成分的定量分析方法是制訂白石脂質量標準體系的前提條件。本研究基于抗壞血酸與含硅成分、鄰菲羅啉與含鐵成分的顯色作用[6-7]，嘗試建立基于紫外—可視分光光度法測量白石脂中二氧化硅(SiO2)和三氧化二鐵(Fe2O3)含量的定量分析方法，并進行系統的方法學考察。

1 材料

1.1 藥材

6批次白石脂藥材分別購自河北安國中藥材市場、安徽毫州中藥材市場、河南禹州中藥材市場，經內蒙古醫科大學生藥教研室渠弼教授鑒定為硅酸鹽類礦物藥白石脂。

1.2 主要儀器和試劑

TU-1901型雙光束紫外—可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)；二氧化硅對照品(99.9%，aladdin industrial corporation)；三氧化二鐵對照品(99.9%，aladdin industrial corporation)；95%乙醇、鹽酸、硝酸、茜素磺酸鈉、鉬酸銨、抗壞血酸、無水碳酸鈉、碳酸鉀、硼砂等均為市售分析純。

2 二氧化硅含量測定的方法學考察

2.1 供試品溶液的制備及含量測定方法

取105℃干燥至恒重的本品細粉約0.5 g，精密稱定，置鉑金坩堝中，加3 g碳酸鉀—硼砂混合熔劑，攪拌均勻。蓋上坩堝蓋，從低溫開始升高溫度，再950～1000℃熔融10分鐘。取出，冷卻至室溫后，將坩堝和蓋一并放入加熱至微沸的盛有100 mL，2 mol/L硝酸溶液的300 mL燒杯中，繼續保持微沸狀態，直至熔融物完全溶解，用水洗凈坩堝及蓋，然后將溶液冷卻至室溫，移入250 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

精密量取上述溶液10.00 mL，置100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻后精密量取10.00 mL，置100 mL容量瓶中，加水至約40 mL，依次加入5 mL 1 mol/L鹽酸溶液、8 mL 95%乙醇溶液、6 mL 5%鉬酸銨溶液。放置30分鐘，加入20 mL 6 mol/L鹽酸溶液、5mL 1%抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，搖勻。放置1小時后，以水為空白。按照紫外—可見分光光度法(通則0401)[8]，在660 nm波長處測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含二氧化硅的含量(mg/mL)，按下列公式計算，即得白石脂樣品中二氧化硅的含量。

注：wSiO2：二氧化硅質量分數(%)；m2：100 mL測定溶液中二氧化硅的含量，單位為毫克(mg)；250：全部試樣溶液與所分取試樣溶液的體積比；m1：試樣的重量，單位為克(g)。

2.2 線性關系試驗

取經1000～1100 ℃灼燒至恒重的二氧化硅對照品0.20 g，精密稱定，置鉑金坩堝內，加2 g無水碳酸鈉，攪拌均勻，在1000～1100 ℃高溫下熔融15分鐘。冷卻，用水將熔塊浸出于盛有熱水的300 mL燒杯中，待全部溶解后冷卻至室溫，移入1000 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10 mL上述溶液于100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL中含二氧化硅0.02 mg)。

精密量取對照品溶液0.00 mL、4.00 mL、6.00 mL、8.00 mL、10.00 mL、12.00 mL、17.00 mL、20.00 mL，分別置100 mL容量瓶中，各加水至約40 mL，依次加入5 mL 1 mol/L鹽酸溶液、8 mL 95%乙醇溶液、6 mL 5%鉬酸銨溶液。放置30分鐘，加入20 mL 6 mol/L鹽酸溶液、5 mL 1%抗壞血酸溶液，用水稀釋至刻度，搖勻。放置1小時后，以水為空白。按照紫外—可見分光光度法(通則0401)[8]，在660 nm波長處測定吸光度。以吸光度為橫坐標，濃度為縱坐標，繪制標準曲線。

標準工作曲線的線性回歸系數r=0.9998，回歸方程為Y=6.721X-0.02471，表明SiO2濃度在0～4.2 μg/mL范圍內，呈良好的線性關系。結果見表1、圖1。

圖1 SiO2的標準工作曲線

表1 各SiO2標準溶液的濃度及吸光度數據

2.3 精密度試驗

按供試品溶液制備方法制得供試品溶液1份，連續測定吸光度6次，結果表明，儀器的測量精密度良好。結果見表2。

表2 SiO2含量的精密度試驗數據

2.4 穩定性試驗

按供試品溶液制備方法制得供試品溶液1份，分別于制得溶液的0小時、1小時、2小時、4小時、6小時、8小時后進行一次吸光度測定。結果表明，供試品溶液在480分鐘內穩定。結果見表3。

表3 SiO2含量的穩定性試驗數據

2.5 重現性試驗

按供試品溶液制備方法平行制備6份供試品溶液，分別測定其含量。結果表明，方法的重現性良好。結果見表4。

表4 SiO2含量的重復性試驗數據

2.6 加樣回收率試驗

供試品稱樣量減半，按二氧化硅對照品加入量與所取供試品中二氧化硅含量之比1.5∶1、1∶1、0.5∶1加入二氧化硅對照品后，按供試品溶液制備方法制得供試品溶液6份(各比例2份)，分別測定其含量。結果表明，方法的準確度良好。結果見表5。

表5 SiO2含量的加樣回收率試驗數據

3 三氧化二鐵含量測定的方法學考察

3.1 供試品溶液的制備及含量測定方法

取105℃干燥至恒重的本品細粉約0.5 g，精密稱定，置鉑金坩堝中，加3 g碳酸鉀—硼砂混合熔劑(1∶1)，攪拌均勻。蓋上坩堝蓋，從低溫開始升高溫度，再950～1000℃熔融10分鐘。取出，冷卻至室溫后，將坩堝和蓋一并放入已加熱至微沸的盛有100 mL 2 mol/L硝酸溶液的300 mL燒杯中，繼續保持微沸狀態，直至熔融物完全溶解，用水洗凈坩堝及蓋，然后將溶液冷卻至室溫，移入250 mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。

精密量取上述溶液5.00 mL，置100 mL容量瓶中，按照對照品溶液制備項下的方法，自“加水至約50 mL”起，依法在510 nm處測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中Fe2O3的含量(mg)。

注：wFe2O3:三氧化二鐵的質量分數(%)；mFe2O3:100 mL測定溶液中三氧化二鐵的含量，單位為毫克(mg)；50：全部試樣溶液與所分取試樣溶液的體積比；m試樣:試樣的重量，單位為克(g)。

3.2 線性關系試驗

取經950℃灼燒至恒重的三氧化二鐵對照品0.10 g，精密稱定，置于300 mL燒杯中，加30 mL 6 mol/L鹽酸溶液，低溫加熱至全部溶解，冷卻后移入1000 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得(每1 mL中含二氧化硅0.1 mg)。

精密量取對照品溶液0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL，分別置于100 mL容量瓶中，加水至約50 mL，加入5 mL 1%抗壞血酸溶液，放置5分鐘，再加入5 mL 0.2%鄰菲羅啉溶液、2 mL 10%乙酸銨溶液，在不低于20℃下放置30分鐘，加水稀釋至刻度，搖勻。以水為空白，按照紫外—可見分光光度法(通則0401)[5]，在510 nm波長處測定吸光度。以吸光度為橫坐標，濃度為縱坐標，繪制標準曲線。

標準工作曲線的線性回歸系數r=0.9996，回歸方程為Y=0.8679X-0.002406，表明三氧化二鐵濃度在0～0.5290 mg/mL范圍內，呈良好的線性關系。見表6、圖2。

表6 各Fe2O3標準溶液的濃度及吸光度數據

圖2 Fe2O3的標準工作曲線

3.3 精密度試驗

按供試品溶液制備方法制得供試品溶液1份，連續測定吸光度6次，結果表明，儀器的測量精密度良好。結果見表7。

表7 Fe2O3含量的精密度試驗數據

3.4 穩定性試驗

按供試品溶液制備方法制得供試品溶液1份，分別于制得溶液的0小時、1小時、2小時、4小時、6小時、8小時后進行一次吸光度測定，結果表明，供試品溶液在480分鐘內穩定。結果見表8。

表8 Fe2O3含量的穩定性試驗數據

3.5 重現性試驗

按供試品溶液制備方法平行制備6份供試品溶液，分別測定其含量，結果表明，方法重現性良好。結果見表9。

表9 Fe2O3含量的重復性試驗數據

3.6 加樣回收率試驗

供試品稱樣量減半，按三氧化二鐵對照品加入量與所取供試品中三氧化二鐵含量之比1.5∶1、1∶1、0.5∶1加入三氧化二鐵對照品后，依法制備供試品溶液6份(各比例2份)，分別測定其含量，計算加樣回收率。結果表明，方法的準確度良好。結果見表10。

表10 Fe2O3含量的加樣回收率試驗數據

依法對6批次白石脂藥材中二氧化硅和三氧化二鐵含量進行了測定，結果見表11。

表11 各批次樣品SiO2、Fe2O3含量的測定數據

4 結果與討論

本試驗通過系統的方法學研究，建立了原礦物藥白石脂中二氧化硅(SiO2)和三氧化二鐵(Fe2O3)含量測定的方法，為白石脂質量標準研究提供了重要的理論依據。所建立的紫外—可見分光光度法測得的含量數據表明，不同批次、不同產地原藥材的二氧化硅和三氧化二鐵含量具有較明顯的差異，可能與原礦物的形成過程和自然環境的差異有關。