P16和Ki-67檢測及陰道鏡檢查對宮頸上皮內病變的診斷價值分析

王麗麗 徐曙光 章潔琳 林蘇瑜

宮頸上皮內病變是婦科常見疾病,根據2014 版WHO 分類,分為LSIL 和HSIL。其中LSIL 包括低度上皮內瘤變(CINⅠ)、輕度不典型增生和扁平濕疣等。HSIL 包括中度上皮內瘤變(CINⅡ)、高度上皮內瘤變(CINⅢ)及原位癌。宮頸上皮內病變是與宮頸癌緊密聯系的一組癌前病變的統稱［1］,其為宮頸癌防治的重要階段。目前宮頸上皮內病變的診斷和分級依然存在諸多主觀因素,進而影響臨床治療方案［2］。有研究表明,P16 基因又叫MTS 基因,是抗癌基因,其是細胞周期中的一種基本基因,直接參與細胞周期的調節,P16基因一旦失控,會導致細胞惡性增殖,導致惡性腫瘤發生［3］。Ki67 是一種與增殖相關的核蛋白,表達于細胞周期的G1、S、G2和M 期,是顯示腫瘤細胞增殖的重要標記之一［4］。P16 和Ki67 的陽性表達對診斷宮頸上皮內病變有指導意義。同時又有研究發現,陰道鏡檢查可以獲取患者活組織,從而較準確地診斷宮頸病變,同時還可以排除癌前病變［5］。本文通過分析P16 和Ki67 檢測及陰道鏡檢查對宮頸上皮內病變的診斷情況,旨在為臨床早期判斷和治療宮頸上皮內病變提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019 年1 月～2020 年1 月在江門市婦幼保健院250 例經組織活檢病理學診斷為慢性宮頸炎或宮頸上皮內病變的患者,患者年齡24～65 歲,平均年齡(43.4±7.6)歲；其中將60 例確診為慢性宮頸炎的患者作為對照組,將190 例確診為宮頸上皮內病變的患者作為觀察組。對照組患者年齡24～63 歲,平均年齡(42.6±7.2)歲。觀察組患者年齡26～65 歲,平均年齡(44.7±7.4)歲。兩組患者一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。組織病理學結果按參照2014 版WHO 診斷標準,均由病理科一位主治醫師及一位副主任醫師診斷。

1.2方法

1.2.1檢測儀器和試劑 即用型單克隆抗體P16、即用型單克隆抗體Ki67、SP 試劑盒及及二氨基聯苯胺(DAB)顯色劑均購自福建邁新公司。陰道鏡為飛利浦金科威SLC-3000 電子陰道鏡數字成像系統。

1.2.2P16 和Ki67 檢測 患者的活檢組織均由10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋,4 μm 厚連續切片,按照試劑盒說明書進行SP 法P16 和Ki-67 的免疫組化染色。P16 表達定位在細胞核和(或)細胞質。鱗狀上皮無表達時為(-),僅少數散在上皮細胞陽性時為局灶陽性(+),10%～90%的上皮細胞表達時為部分陽性(++),≥90%的上皮表達時為彌漫陽性(+++)。Ki67 表達定位在細胞核。陽性細胞僅位于基底層為(-),陽性細胞位于上皮內下1/3 層為(+),陽性細胞位于上皮內下2/3 層為(++),陽性細胞位于上皮內全層為(+++)。

1.2.3陰道鏡檢查 患者的陰道鏡檢查按照2011 版的國際子宮頸病理與陰道鏡聯盟協會術語評價宮頸情況。正常陰道鏡形態及慢性炎癥改變為(-),低級別病變形態為(+),高級別病變形態為(++),可疑癌(+++),其他征象(0)。所有結果均由宮頸專科二位副主任醫師診斷。

1.3觀察指標 比較兩組P16、Ki-67 的表達情況及陰道鏡檢查情況。

1.4統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件進行數據統計分析。計量資料以均數±標準差 ()表示,采用t 檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1兩組P16 的表達情況比較 對照組的P16 陽性率為6.67%(4/60),觀察組的P16 總陽性率為84.74%(161/190)；觀察組的P16 總陽性率明顯高于對照組,差異有統計學意義(P＜0.05)；觀察組LSIL 患者的P16陽性率78.79%(33/57)明顯低于HSIL 患者的96.24%(128/133),差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組P16 的表達情況比較(n)

2.2兩組Ki-67 的表達情況比較 對照組的Ki-67陽性率為15.00%(9/60),觀察組的Ki-67 總陽性率為92.11%(175/190)；觀察組的Ki-67 總陽性率明顯高于對照組,差異具有統計學意義(P＜0.05)；觀察組LSIL患者的Ki-67 陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組Ki-67 表達情況比較(n)

2.3兩組陰道鏡檢查情況比較 對照組的陰道鏡檢查陽性率為18.33%(11/60),觀察組的陰道鏡檢查總陽性率為92.11%(175/190)；觀察組的陰道鏡檢查總陽性率明顯高于對照組,差異有統計學意義(P＜0.05)。觀察組LSIL 患者陰道鏡檢查陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統計學意義(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組陰道鏡檢查情況比較(n)

3 討論

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤。據世界范圍統計,其發病率在女性惡性腫瘤中居第4 位,僅次于乳腺癌、結直腸癌和肺癌［6］。而宮頸上皮內病變是宮頸癌的癌前病變,所以明確診斷宮頸上皮內病變對患者至關重要。

P16 基因作為抗癌基因之一,其產物可以直接作用于細胞周期中抑制增殖。如果由于某些原因使P16 基因發生變化,會引起細胞分裂加速,導致惡性增殖［7］。在本次研究中,觀察組的P16 總陽性率84.74%明顯高于對照組的6.67%,差異有統計學意義(P＜0.05)；觀察組LSIL 患者的P16 陽性率78.79%明顯低于HSIL患者的96.24%,差異具有統計學意義(P＜0.05)。因此推測,宮頸上皮內病變與P16 有聯系,P16 的表達為宮頸上皮內病變的危險因素之一,并且可以隨著宮頸上皮內病變的程度加深而升高。Ki-67 為細胞增殖標記之一,表達在所有活動的細胞周期(G1、S、G2和有絲分裂期)中［8］。本次研究結果顯示,觀察組的Ki-67 總陽性率92.11%明顯高于對照組的15.00%,差異具有統計學意義(P＜0.05)；觀察組LSIL 患者的Ki-67 陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統計學意義(P＜0.05)。由此推測,Ki-67 的顯色程度隨著宮頸上皮內病變的級別提高而提高。

目前陰道鏡已成為宮頸癌防治不可或缺的重要組成部分。本次研究結果顯示,觀察組的陰道鏡檢查總陽性率92.11%明顯高于對照組的18.33%,差異有統計學意義(P＜0.05)。觀察組LSIL 患者陰道鏡檢查陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統計學意義(P＜0.05)。陰道鏡檢查結果的陽性率隨著宮頸上皮內病變的程度的增加而提高。

綜上所述,P16 和Ki-67 檢測有助于宮頸上皮內病變的判斷,同時在高級別上皮內病變中表現更加顯著。P16 和Ki67 聯合檢測可以作為診斷宮頸上皮內病變的有效指標,陰道鏡檢查對發現宮頸上皮內病變有十分重要的作用。