海南地區白木香南方根結線蟲防控藥劑篩選

孫衍湯，連春枝，王科明，凌家如

海南省林業科學研究院（海南省紅樹林研究院），海南?？?71100

南方根結線蟲（Meloidogyneincognita）是喜溫性植物根系定居性內寄生生物，是根結線蟲屬中4大優勢種群之一，其寄主范圍很廣，超過3000種，分屬114科，尤以茄科、葫蘆科、十字花科等植物受害嚴重[1]。

白木香（Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg）又稱土沉香、香樹、女兒香等，是瑞香科沉香屬常綠喬木，喜溫暖，耐干旱，對土壤要求不嚴，在酸性的砂質壤土、黃壤土和紅壤土均能生長，為中國生產中藥沉香的唯一植物來源，是國家二級重點保護野生植物[2-3]。近年來，隨著海南白木香種植面積不斷增大，種植后帶來的病蟲害問題越來越嚴重，影響和制約了白木香產業的健康發展，產量減少、質量降低較為突出，其中一個最主要的原因是南方根結線蟲的不斷累積、傳播、蔓延和危害[4]。該線蟲寄生在苗期發生非常普遍，如果不進行處理栽種后枯死率較高。目前對南方根結線蟲主要依靠藥劑防治，但防治南方根結線蟲的藥劑種類不多，大部分防效不高。因此，了解殺蟲劑對南方根結線蟲的防治效果并篩選出綜合防治效果較好的藥劑對白木香種植產業具有重要現實意義。

該研究使用7種藥劑，通過室內試驗初步篩選出毒殺效果較好的藥劑，再進行田間試驗，根據田間試驗結果統計綜合評價，篩選出防治效果較好的防控藥劑，為海南白木香根結線蟲的防治工作提供參考依據。

1 田間試驗地概況

試驗地位于樂東縣尖峰鎮苗圃園內，屬于熱帶海洋季風氣候地區，年平均氣溫23℃，年降雨量1200mm左右，試驗地地勢平坦，土壤質地為沙土，pH6.5，有機質含量1.61，南方根結線蟲病常年發生較重。試驗前后未施用其他農藥，肥水管理照常規進行。

2 材料和方法

2.1 供試藥劑

41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑；20%的噻唑膦水乳劑；1.8%的阿維菌素乳油；50%的辛硫磷乳油；48%的毒死蜱乳油；淡紫擬青霉粉劑，2億個孢子/g；厚孢輪枝菌微粒劑，25億個孢子/g。

2.2 室內毒力測定方法

（1）藥劑的配制

將1.8%的阿維菌素乳油按有效成分配制濃度分別為0.45mg/mL、0.23mg/mL、0.11mg/mL、0.056mg/mL和0.028mg/mL；41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑按有效成分配制濃度分別為0.42mg/mL、0.21mg/mL、0.11mg/mL、0.053mg/mL和0.026mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑和50%的辛硫磷乳油按有效成分配制濃度分別為10mg/mL、5mg/mL、2.50mg/mL、1.25mg/mL和0.63mg/mL。

（2）線蟲懸浮液的制備

從培養于大棚中的袋裝白木香幼苗根部分離南方根結線蟲卵粒，置于培養皿中的滅菌水中，于28℃孵化48h～72h，然后用貝曼漏斗法分離根結線蟲2齡幼蟲，24h后收集線蟲于培養皿中，加滅菌水配制成濃度為40頭/mL的線蟲懸浮液。

（3）室內藥劑毒力測定

往培養皿中分別加入線蟲懸浮液1mL，再分別加入對應的處理藥劑1mL；1.8%的阿維菌素乳油按有效成分配制濃度分別為0.45mg/mL、0.23mg/mL、0.11mg/mL、0.056mg/mL和0.028mg/mL；41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑按有效成分配制濃度分別為0.42mg/mL、0.21mg/mL、0.11mg/mL、0.053mg/mL和0.026mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑和50%的辛硫磷乳油按有效成分配制濃度分別為10mg/mL、5mg/mL、2.50mg/mL、1.25mg/mL和0.63mg/mL。毒力測定實驗于直徑為3.5cm的培養中進行，24h后，統計死亡蟲數。1個培養皿為1個處理，每個處理分別設4次重復。

2.3 田間試驗

2.3.1 試驗材料

（1）試驗作物：白木香

（2）防治對象：南方根結線蟲病

（3）供試藥劑見表1

表1 供試藥劑及施藥劑量Tab.1 The Test Insecticides and The Dosage of Application

2.3.2 試驗及調查方法

（1）施藥方法

量取各藥劑，用苗圃園內貯藏的地下水稀釋，稀釋倍數1000倍，水溫為22℃，天氣陰，氣溫23℃～27℃。施藥器械為10kg帶噴頭的不銹鋼鐵桶，均勻澆灌到白木香苗內。

（2）調查時間和次數

試驗共進行3次調查，施藥前進行線蟲基數調查，施藥后15d調查線蟲減退情況；定植后植株生長45d，挖取植株調查根結情況。

（3）小區面積與調查方法

小區面積：每小區面積20m2，每處理設4次重復。

土壤線蟲采樣方法：基數調查，在施藥前，通過土壤采樣確定侵染程度，每小區用取土器從白木香苗的根周圍（0cm～20cm）隨機采集5個點的土樣，采集后用貝曼漏斗法分離，測定2齡線蟲侵染期的數量。鑒別線蟲死活采用0.3%龍膽紫染色法。

病情調查方法：采用隨機取樣調查法，每小區取樣30株檢查根系蟲癭情況。病株分級標準：

0級：根系無蟲癭；

1級：根系有少量小蟲癭；

3級：2/3根系布滿小蟲癭；

5級：根系布滿小蟲癭并且次生蟲癭；

7級：根系形成須根團；

（4）藥效計算方法

根據線蟲數和病情指數按下列指數公式計算出防治效果：

式中：

CK0、PT0：施藥前空白對照區和藥劑處理區活線蟲數；CK1、PT1：施藥后空白對照區和藥劑處理區活線蟲數。

式中：CK1為空白對照區施藥后病情指數；PT1為藥劑處理區施藥后病情指數。

2.4 統計分析

通過SPSS 22.0軟件，求出每種藥劑的毒力回歸方程Y=a+bx、相關系數R2、95%置信限及致死中濃度LC50。用鄧肯新復極差法（DMRT）對試驗結果進行統計分析。

3 結果與分析

3.1 毒力測定結果

根據每種藥劑不同濃度測試皿內南方根結線蟲2齡線蟲的毒殺活性，結果見表2。由表2可知，1.8%的阿維菌素乳油對南方根結線蟲2齡幼蟲的毒殺活性最好，LC50為0.53mg/mL；其次是41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑，LC50為1.28mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑的LC50為18.56mg/mL，50%的辛硫磷乳油的LC50為41.51mg/mL。

表2 4種農藥制劑對白木香南方根結線蟲2齡幼蟲的毒殺活性（24h）Tab.2 The Toxicidal Activity of 4 Insecticides Control Efficacy of The Second Instar larvae of The Aquilaria Sinensis Meloidogyne Incognita（24h）

除上述4種藥劑外，余下3種藥劑測試時沒有顯示線性關系，由此，在固定濃度下，測試余下3種藥劑的致死率，結果如下：

40%的毒死蜱乳油在200μg a.i./mL下對南方根結線蟲2齡幼蟲的致死率為34.9%；厚孢輪枝菌微粒劑（2.5×106個孢子/mL）對南方根結線蟲2齡幼蟲的致死率為15.6%；淡紫擬青霉粉劑（2.0×106個孢子/mL）對南方根結線蟲2齡幼蟲的致死率為19.4%。其中后2種藥劑為微生物殺線蟲劑，在實驗室測試皿內毒殺活性沒有顯示出較好的致死率，可能是由于微生物藥劑的滯后性，而測試的時間是藥后24h，因此，出現上述結果。

3.2 田間試驗結果

根據皿內實驗結果，選擇毒殺活性較好的3種農藥，1.8%的阿維菌素乳油、41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑和20%的噻唑膦水乳劑為田間試驗藥劑。每種藥劑按照高中低3個濃度布置試驗，空白對照用清水替代。實驗結果見表3、表4。

由表3可知，根據土壤中統計的南方根結線蟲數目可以計算施藥后蟲口減退率及其防效。藥后15d，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑的效果整體較好，其次是20%的噻唑膦水乳劑，1.8%的阿維菌素乳油的防效稍差。有效成分用量為312.75mL/hm2時，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑對線蟲的蟲口減退率為83.58%，防效為84.85%，防治效果最好；有效成分用量為135mL/hm2時，藥后15d，1.8%的阿維菌素乳油的蟲口減退率為63.15%，防效為65.99%，效果較差。有效成分用量為3000mL/hm2時，20%的噻唑膦水乳劑的防效與41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑最低濃度的防效相當。

表3 3種藥劑防治白木香南方根部線蟲田間試驗結果（15d）Tab.3 The Field Control Efficacy of 3 Insecticides to Meloidogyne Incognita of Aquilaria Sinensis（15d）

根結防效：藥后45d，拔出幼苗統計根結發病情況，結果見表4。有效成分用量為312.75mL/hm2時，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑對線蟲根結的平均病情指數為7.26，防效為85.41%，防治效果最好；有效成分用量為135mL/hm2時，1.8%的阿維菌素乳油對線蟲根結的平均病情指數為17.02，防效僅為65.79%，效果較差。有效成分用量為3000mL/hm2時，20%的噻唑膦水乳劑對線蟲根結的防效與41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑最低濃度的防效相當，分別為78.71%和78.47%。整體防效表現為41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑的效果較好，其次是20%的噻唑膦水乳劑，1.8%的阿維菌素乳油的防效稍差。

表4 3種藥劑防治白木香根部南方根結線蟲田間試驗結果（45d）Tab.4 The Field Control Efficacy of 3 Insecticides to Meloidogyne Incognita of Aquilaria Sinensis（45d）

4 結論與討論

4.1 結論

該研究結果表明，室內毒力試驗1.8%的阿維菌素乳油對南方根結線蟲2齡幼蟲的毒殺活性最好，LC50為0.53mg/mL；其次是41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑，LC50為1.28mg/mL；20%的噻唑膦水乳劑的LC50為18.56mg/mL，50%的 辛 硫 磷 乳 油 的LC50為41.51mg/mL；40%毒死蜱乳油、厚孢輪枝菌微粒劑（2.5×106個孢子/mL）和淡紫擬青霉粉劑（2.0×106個孢子/mL）這3種藥劑測試時沒有顯示線性關系。

田間藥效試驗41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑的效果整體較好，其次是20%的噻唑膦水乳劑，1.8%的阿維菌素乳油的防效稍差。有效成分用量為312.75mL/hm2時，41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑對線蟲的蟲口減退率為83.58%，防效為84.85%，防治效果最好；有效成分用量為135mL/hm2時，藥后15d 1.8%的阿維菌素乳油的蟲口減退率為63.15%，防效為65.99%，效果較差。有效成分用量為3000mL/hm2時，20%的噻唑膦水乳劑的防效與41.7%的氟吡菌酰胺懸浮劑最低濃度的防效相當。

4.2 討論

根據試驗結果統計發現41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑整體效果最好，20%的噻唑膦水劑其次，1.8%的阿維菌素乳油效果一般，田間試驗結果與室內篩選結果不一致，可能原因是室內主要以培養皿的生測為主，乳油的吸收和滲透效果較好，對線蟲有較好的毒殺作用，而在田間，受到土壤因素的影響，乳油被吸附等原因，導致阿維菌素效果難以發揮，因而結果不一致。淡紫擬青霉粉劑藥劑測試時沒有顯示線性關系，這與許天委等研究的結果不一致[5]，這可能是由于施藥后受土壤和環境對生物農藥的影響，從而導致藥效發揮不好。

從價格因素考慮，41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑的價格比較貴，20%的噻唑膦水劑的價格相對便宜，因而僅僅單一防治線蟲，建議選擇20%的噻唑膦水劑進行灌根防治；由于41.7%的氟吡菌酰胺懸乳劑對白粉病也有良好的防治，一旦白粉病和線蟲同時發生，可以使用該藥兼顧兩種病害。

盡管阿維菌素乳油的效果稍差，但是由于沒有使用阿維菌素顆粒劑等其他劑型進行防治，因而暫時不能說阿維菌素的效果欠佳。