托吡司特原料中的溶劑殘留測定

李 翔

藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全去除的有機溶劑。很多有機溶劑對人體都有一定的危害，因此，為保障人體用藥安全，需要對殘留溶劑進行研究和控制。托吡司特是一種非嘌呤類的黃嘌呤氧化酶抑制劑，可用于治療抗高尿血酸癥和痛風[1-2]。托吡司特的合成過程中使用的有機溶劑有甲醇、乙醇、異丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和N，N-二甲基甲酰胺（N，N-dimethylformamide，DMF）。因此本文參照ICH指導原則[3]和《中國藥典》2015版四部附錄0861殘留溶劑測定法[4]及相關文獻[5-6]，建立了氣相色譜法，可以簡便快速檢測托吡司特中上述8種殘留溶劑的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津GC-2010氣相色譜儀；AOC-Ⅱ自動進樣器。

1.2 試藥 甲醇、乙醇、異丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和N，N-二甲基甲酰胺均為色譜純。托吡司特樣品，批號20190406、批號20190411、批號20190416，均為某公司產品。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 采用安捷倫DB-624毛細管色譜柱（30 m×0.32 mm×l.8 μm）；程序升溫：初始溫度40 ℃維持6 min，以20 ℃/min的速率升溫至220 ℃并維持5 min；載氣為氮氣；FID檢測器，溫度：260 ℃；進樣口溫度：240 ℃；分流進樣方式；分流比為10:1；柱流速：2.0 mL/min；頂空平衡溫度：90 ℃，平衡時間：30 min；進樣量：1 μL。

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品溶液的配制 取甲醇、乙醇、異丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和N,N-二甲基甲酰胺（DMF）適量，精密稱定，分別加二甲亞砜溶解并稀釋制成每1 mL含甲醇120 μg、乙醇200 μg、異丙醇200 μg、二氯甲烷24 μg、2-丁醇200 μg、三乙胺12.8 μg、甲苯35.6 μg、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）35.2 μg的混合溶液，作為對照品儲備液。選取上述對照品儲備液加二甲亞砜稀釋制成每1 mL含甲醇60 μg、乙醇100 μg、異丙醇100 μg、二氯甲烷12 μg、2-丁醇100 μg、三乙胺6.4 μg、甲苯17.8 μg、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）17.6 μg的混合溶液，作為對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的配制 取托吡司特約0.2 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，用二甲亞砜溶解并定容至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

3 結 果

3.1 專屬性試驗 取上述8種溶劑適量，分別置10 mL容量瓶中，加入二甲亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為8種溶劑的定位溶液。將上述定位溶液、空白溶劑二甲亞砜和對照品溶液分別注入氣相色譜儀，按上述色譜條件進樣測定，記錄色譜圖（圖1），結果出峰順序依次為甲醇、乙醇、異丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和DMF，對照品溶液中各組分間分離度良好，空白溶劑二甲亞砜對被檢測溶劑出峰無干擾。

3.2 線性和范圍 分別量取2.2.1項下對照品儲備液適量置10 mL量瓶中，加二甲亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻，配制成系列濃度對照品溶液。注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以濃度x（μg/mL）為橫坐標，峰面積y為縱坐標，進行線性回歸，回歸方程見表1。結果顯示8種溶劑在各自濃度的線性范圍內，濃度與峰面積線性關系良好。

圖1 8種殘留溶劑的色譜圖

表1 8種殘留溶劑的標準曲線方程、線性范圍、相關系數、檢出限和定量限

3.3 檢出限和定量限 取對照品溶液稀釋進樣，以信噪比S/N≈3:1計算各溶劑的檢測限，以信噪比S/N≈10:1計算定量限，結果見表1。

3.4 進樣精密度 取2.2項下對照品溶液連續進樣6次，測定各溶劑峰面積，計算其RSD。甲醇、乙醇、異丙醇、二氯甲烷、2-丁醇、三乙胺、甲苯和DMF峰面積的RSD值分別為0.8%、0.8%、1.0%、4.3%、1.1%、3.5%、0.6%和3.4%，結果顯示進樣精密度良好。

3.5 回收率 取托吡司特約0.2 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，精密加入三個不同的濃度（相當于限度的80%、100%、120%）混合對照品溶液，溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液，測定并計算各溶劑的回收率，測定結果見表2，數據顯示各溶劑的平均回收率及RSD值均符合相關規定。

表2 8種殘留溶劑的回收率

3.6 樣品測定 取托吡司特（批號20190406、批號20190411、批號20190416）約0.2 g，精密稱定，置10 mL量瓶中，加二甲亞砜振搖使溶解，搖勻，作為供試品溶液，記錄色譜圖見圖2，按外標法以峰面積計算，結果見表3。由測定結果可知，本品三批樣品中只檢出來2-丁醇（限度值為0.5%），結果顯示，3批原料中8種溶劑殘留量均符合《中國藥典》2015年版的相關規定。

表3 樣品中殘留溶劑的測定結果

圖2 樣品的氣相色譜圖

4 討 論

考慮到測定的8種溶劑中DMF沸點較高，不適宜采用頂空進樣法測定[7-8]，且直接進樣法方法比較簡單，僅需要使用自動進樣器，不需要其他裝置，本文選擇采用直接進樣法測定溶劑殘留。

本方法測定的溶劑有8種，極性差異大，沸點差異大，以程序升溫氣相色譜法測定，各溶劑間分離良好；高沸點溶劑二甲亞砜出峰時間比各殘留溶劑的出峰時間要長，不會干擾各殘留溶劑的測定。盡管在中國藥典附錄0861中未收載，托吡司特合成過程中使用到三乙胺，仍然對其進行了研究。本方法各殘留溶劑線性關系良好，精密度良好，回收率符合要求，快速準確，能夠滿足托吡司特原料中溶劑殘留測定要求。