麻櫟木醋液對8種食用菌菌絲體生長的影響*

潘 琴，冮 潔，許英梅，袁 穎

（大連民族大學生命科學學院，遼寧 大連 116605）

木醋液也叫植物酸、生物質熱解液，是木材等生物質經干餾操作導出的蒸汽氣體混合物經冷凝后得到的一種棕褐色液體[1]。生物質經熱解制備得到的粗木醋液含有大量焦油及有害物質，需要精制后才可以被利用。木醋液的精制方法有很多，可根據不同的用途選擇不同的精制方法[2]。木醋液原料可以是不同的木材，也可以是稻殼、椰殼、秸稈等廢棄物。其成分復雜，主要成分是水，同時還含有有機酸類、醛類、酮類、醇類、酚類等多種有機化合物和少量無機物等[3-4]。

食用菌在我國已有數千年的食用歷史，通常被稱為“蕈”“菌”“蘑菇”等，因其味美香郁，具有豐富的營養價值而享有“山珍”“素中之葷”等美譽[5]。據統計，我國食用菌占據全世界食用菌資源的一半以上，約有960種，具有分布廣、產量高的特點[6]。貴州冬暖夏涼、光照適宜、雨熱同期、氣候舒適[7-10]，為多種食用菌的生長提供了便利條件。省政府高度重視本省食用菌產業的發展，并將其作為農業結構調整和產業扶貧的助攻產業之一[11]。

早期木醋液主要應用于生產乙酸、甲醇以及丙酮等工業產品。現主要作為土壤改良劑、植物生長調節劑、食品保鮮劑等，廣泛應用在農林生產、環境保護、食品加工、畜牧業生產和醫療衛生等領域[12-14]。為了拓展麻櫟木醋液的使用范圍，明確麻櫟木醋液對食用菌菌絲生長的影響，以香菇（Lentinus edodes）、滑菇（Pholiota nameko）、黑木耳（Auriculariaauricula）、羊肚菌（Morchella esculenta）、赤芝（Ganoderma lucidu）、平菇 （Pleurotus ostreatus）、金針菇 （Flammulina velutipes）和猴頭菇（Hericium erinaceus）共8種食用菌為材料，通過采用固體培養和液體培養的方式，在培養基中加入麻櫟木醋液，研究不同濃度麻櫟木醋液對8種食用菌菌絲生長的影響。力求找到促進食用菌菌絲生長的適宜麻櫟木醋液濃度，探討麻櫟木醋液作為食用菌培養料添加劑的可能性，為麻櫟木醋液在食用菌生產過程中的推廣應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

麻櫟木醋液，由安徽省滁州市昌春木炭廠提供。

香菇、滑菇、黑木耳、羊肚菌、赤芝、平菇、金針菇和猴頭菇菌種，均由遼寧省大連市大連民族大學生命科學學院提供。

1.2 儀器與設備

PL203電子精密天平，梅特勒-托利多儀器（上海） 有限公司；DNP-9082電熱恒溫培養箱，上海精宏實驗設備有限公司；HYG-3多功能智能組合搖床奧豪斯儀器（上海） 有限公司；ZHJHC2112B超凈工作臺上海智城分析儀器制造有限公司；MJ-78A高壓蒸汽滅菌鍋，施都凱儀器設備（上海） 有限公司；UV-2800/2802/2802S紫外分光光度計，龍尼柯（上海）儀器有限公司；H-2050R臺式高速冷凍離心機，長沙湘儀離心機儀器有限公司；DHG-9240電熱恒溫鼓風干燥箱，上海精宏實驗設備有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 固體平板培養

配制不同濃度（0、0.01%、0.03%、0.06%、0.09%、0.12%、0.15%）的麻櫟木醋液綜合PDA固體培養基，調pH至6.0～6.5，滅菌；無菌條件下倒平板，冷卻凝固，置于干燥處2 d～3 d，每個濃度各3個重復，不染菌即可用于接種；接入直徑為5 mm的菌絲塊，以不加麻櫟木醋液的平板作為對照，置于28℃恒溫培養箱進行培養；根據食用菌菌絲生長情況，從培養的第4天或第5天開始，測量菌落直徑，并記錄數據。

1.3.2 液體培養

1） 液體深層培養

配制綜合PDA液體培養基，滅菌。無菌條件下接種食用菌菌塊，搖床25℃培養3 d～5 d，至菌球生長均勻即可。

2） 液體培養

配制不同濃度的麻櫟木醋液綜合PDA液體培養基，調pH至6.0～6.5，滅菌；接種液體菌種，接種量為每瓶5 mL，每個濃度各3個重復，搖床25℃、120 r·min-1培養7d～10d；菌液過濾烘干后稱重，并記錄數據。

1.4 測定方法

測量固體平板中的菌落直徑[15]和液體培養中的菌絲干重[16]。固體培養時，根據食用菌菌絲生長情況，從培養的第4天或第5天開始，測量菌落直徑，計算菌絲生長速率和抑制率。菌絲生長速率（S，%） 的計算公式為：

式中：L為菌絲長度（cm）；R為接種菌塊半徑（cm）；D為菌絲培養天數（d）。

抑制率（Y，%）的計算公式為：

式中：Rck為對照組菌落直徑（cm）；Rc為處理組菌落直徑（cm）。

液體培養生長情況，培養7 d～10 d，菌液過濾烘干后稱重，計算生物量。生物量（Z，g·L-1）的計算公式為：

式中：M為食用菌菌絲體干重（g）；V為液體菌種體積 （L）。

2 結果與分析

2.1 固體培養時麻櫟木醋液對食用菌菌絲體生長的影響

2.1.1 麻櫟木醋液對香菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對香菇菌絲體生長的影響見表1。

表1 固體培養中麻櫟木醋液對香菇菌絲體生長的影響Tab.1 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Auricularia auricula in solid cultivation

由表1可知，不同濃度的麻櫟木醋液對香菇菌絲體的生長影響不同。濃度在0.03%～0.15%的麻櫟木醋液對香菇菌絲體的生長具有明顯的促進作用，其中，麻櫟木醋液添加濃度為0.06%時，香菇菌絲體生長速率最快，達到0.65 cm·d-1，高出對照組10.17%。

2.1.2 麻櫟木醋液對滑菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對滑菇菌絲體生長的影響見表2。

表2 固體培養中麻櫟木醋液對滑菇菌絲體生長的影響Tab.2 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Pholiota nameko in solid cultivation

由表2可知，適宜濃度的麻櫟木醋液對滑菇菌絲體的生長有一定的促進作用，而過高的濃度則會抑制其生長。培養至第9天時，麻櫟木醋液添加濃度為0.01%～0.12%時，滑菇菌絲生長速率相同，均為0.68 cm·d-1。第10天麻櫟木醋液添加濃度為0.03%時滑菇菌絲生長速率最快，達到0.72 cm·d-1，高出對照組7.46%，與對照組相比有顯著差異。

2.1.3 麻櫟木醋液對黑木耳菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對黑木耳菌絲體生長的影響見表3。

表3 固體培養中麻櫟木醋液對黑木耳菌絲體生長的影響Tab.3 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Auricularia auricula in solid cultivation

由表3可知，培養至第8天時各組的生長速率開始出現顯著差異，添加濃度為0.01%～0.15%的麻櫟木醋液，對黑木耳菌絲體的生長均有不同程度的促進作用，生長速率都高于對照組，且差異顯著，其中添加濃度為0.06%麻櫟木醋液的黑木耳菌種，其生長速率最快，達到0.50 cm·d-1，高出對照組4.17%。

2.1.4 麻櫟木醋液對羊肚菌菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對羊肚菌菌絲體生長的影響見表4。

表4 固體培養中麻櫟木醋液對羊肚菌菌絲體生長的影響Tab.4 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Morchella esculenta in solid cultivation

由表4可知，羊肚菌的最適麻櫟木醋液濃度為0.01%。8種食用菌中羊肚菌的生長速率最快，才培養至第3天，其菌絲體的直徑就達到了7 cm以上，基本覆蓋了培養皿的表面，斜面培養時可以產生大小不一的菌核，放置時間較長時菌絲顏色則變成淺黃色或棕色。羊肚菌的適宜麻櫟木醋液濃度為0.01%，此時的生長速率最高，達到2.50 cm·d-1，高出對照組2.88%。濃度越高，生長速率越慢。

2.1.5 麻櫟木醋液對赤芝菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對赤芝菌絲體生長的影響見表5。

表5 固體培養中麻櫟木醋液對赤芝菌絲體生長的影響Tab.5 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Ganoderma lucidum in solid cultivation

由表5可知，培養至第5天、第6天時，添加濃度為0.06%的麻櫟木醋液對赤芝菌絲體的生長促進作用最明顯，且生長速率最高，達到0.99 cm·d-1。從第7天開始往后，則變成添加濃度0.01%的麻櫟木醋液對赤芝菌絲體的生長促進作用明顯，在第7天生長速率最高，達到1.11 cm·d-1，高出對照組10.98%。

2.1.6 麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長的影響見表6。

表6 固體培養中麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長的影響Tab.6 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Pleurotus ostreatus in solid cultivation

由表6可知，添加濃度為0.06%麻櫟木醋液的平菇菌絲體，其生長速率遠高于對照組，在第6天達到最高，達到1.18 cm·d-1，高出對照組9.26%，與對照組相比差異顯著。培養至第7天時，只有濃度為0.06%的麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長具有促進作用，其他濃度則不同程度的抑制了平菇菌絲體的生長，最高抑制率達到5.29%。平菇菌絲體長勢濃密，顏色純白，菌落形態為中央隆起，大小均勻，呈圓形。

2.1.7 麻櫟木醋液對金針菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對金針菇菌絲體生長的影響見表7。

表7 固定培養中麻櫟木醋液對金針菇菌絲體生長的影響Tab.7 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Flammulina velutipes in solid cultivation

由表7可知，培養至第8天時，添加濃度為0.01%麻櫟木醋液的金針菇生長速率最高，達到0.91 cm·d-1，高出對照組16.67%，培養至第9天時，僅有濃度為0.01%和0.03%的麻櫟木醋液對金針菇的菌絲體具有促進作用，且生長速率相同，均為0.88 cm·d-1，培養至第10天時，添加濃度為0～0.15%的麻櫟木醋液對金針菇菌絲體的生長均有不同程度的抑制作用，最高抑制率達100%，最低為6.67%，金針菇菌絲體長勢較稀疏，菌落形態均為中央隆起，大小不均勻，呈不規則形狀。

2.1.8 麻櫟木醋液對猴頭菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對猴頭菇菌絲體生長的影響見表8。

表8 固定培養中麻櫟木醋液對猴頭菇菌絲體生長的影響Tab.8 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Flammulina velutipes in solid cultivation

由表8可知，猴頭菇的適宜麻櫟木醋液濃度為0.06%，此時的生長速率最高，達到0.47 cm·d-1，高出對照組9.30%。培養至第8天時，不同濃度的麻櫟木醋液均不同程度地促進了猴頭菇菌絲體的生長，隨著培養天數的增加，開始出現抑制情況，培養至第10天時，只有添加濃度為0.06%的麻櫟木醋液促進了猴頭菇菌絲體的生長，其他濃度均明顯的抑制了菌絲體的生長。

固體培養時，羊肚菌菌絲體生長速度最快，才培養至第3天，其菌絲體的生長就基本上覆蓋整個培養皿，且其菌絲狀態、顏色與其他7種食用菌不同，菌絲粗壯，呈乳黃色；其次是平菇菌絲體，菌落形態為中央隆起，呈規則狀；第三是金針菇菌絲體，其菌落形態也為中央隆起，但是不規則；第四是赤芝菌絲體，其長勢密集，顏色純白；第五是滑菇菌絲體，長勢較稀疏，不密集，顏色較淡；香菇菌絲體生長速度緩慢，長勢稀疏，顏色淡；黑木耳菌絲體生長速度也較慢，顏色也較淡；猴頭菇菌絲體生長速度最慢，菌絲發達，由一個挨著一個的管狀細胞組成，壁薄，有橫隔和分枝。

2.2 液體培養時麻櫟木醋液對食用菌菌絲體生長的影響

2.2.1 麻櫟木醋液對液體培養香菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對香菇菌絲體生長的影響見表9。

表9 液體培養中麻櫟木醋液對香菇菌絲體生長的影響Tab.9 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Lentinus edodes in liquid cultivation in solid cultivation

由表9可知，液體培養時，香菇的適宜麻櫟木醋液濃度為0.01%，在此濃度下生物量最高，達到2.09 g·L-1，高出對照組6.09%。此時培養基菌液澄清，呈淡黃色，瓶內側附著少量白色菌絲，菌球大小均勻，數量最多。

2.2.2 麻櫟木醋液對滑菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對滑菇菌絲體生長的影響見表10。

表10 液體培養中麻櫟木醋液對滑菇菌絲體生長的影響Tab.10 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Pholiota nameko in liquid cultivation

由表10可知，滑菇的適宜麻櫟木醋液濃度為0.06%，生物量達到5.46 g·L-1，高出對照組26.68%，與對照組相比有顯著差異。滑菇菌種的菌球整體偏小，大小較均勻，隨著麻櫟木醋液濃度的增加，生物量依次減小。

2.2.3 麻櫟木醋液對黑木耳菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對黑木耳菌絲體生長的影響見表11。

表11 液體培養中麻櫟木醋液對黑木耳菌絲體生長的影響Tab.11 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Auricularia auricula in solid cultivation

如表11所示，不同濃度的麻櫟木醋液對黑木耳菌種均起到了不同程度的抑制作用，對照組的生物量最高，達3.52 g·L-1，隨著不同濃度木醋液的增加，生物量出現不同程度的減少。

2.2.4 麻櫟木醋液對羊肚菌菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對羊肚菌菌絲體生長的影響見表12。

表12 液體培養中麻櫟木醋液對羊肚菌菌絲體生長的影響Tab.12 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Morchella esculenta in solid cultivation

由表12可知，羊肚菌的適宜麻櫟木醋液濃度為0.06%，生物量達到0.15 g·L-1，高出對照組87.50%，與對照組相比差異顯著，羊肚菌的生物量整體最低，但是較對照組增加量卻最高。羊肚菌的生長狀態和其他食用菌間差異明顯，培養基菌液渾濁，呈黃綠色，最后菌落形態是菌絲狀，而其他食用菌則是菌球狀。

2.2.5 麻櫟木醋液對赤芝菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對赤芝菌絲體生長的影響見表13。

表13 液體培養中麻櫟木醋液對赤芝菌絲體生長的影響Tab.13 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Ganoderma lucidum in solid cultivation

由表13可知，赤芝菌絲體的生物量普遍較高，最高達9.99 g·L-1，高出對照組11.50%，與對照組有顯著差異。培養基菌液澄清，呈乳白色，菌球含水量較多，整體偏粘稠狀，瓶內側附著一圈白色菌絲。

2.2.6 麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長的影響見表14。

表14 液體培養中麻櫟木醋液對平菇菌絲體生長的影響Tab.14 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Pleurotus ostreatus in solid cultivation

由表14可知，平菇的適宜麻櫟木醋液濃度為0.06%，此時生物量最高，達到7.86 g·L-1，高出對照組34.82%，與對照組相比差異顯著。低濃度麻櫟木醋液對平菇菌絲體的生長具有促進作用，而濃度越高，促進效果越弱，有些高濃度處理組甚至低于對照組。

2.2.7 麻櫟木醋液對金針菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對金針菇菌絲體生長的影響見表15。

表15 液體培養中麻櫟木醋液對金針菇菌絲體生長的影響Tab.15 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Flammulina velutipes in solid cultivation

由表15可知，金針菇菌絲體的生物量高達10.91 g·L-1，高出對照組5.41%，與對照組相比差異顯著，隨著濃度的增加，生物量依次減小，最小達9.76 g·L-1。培養基菌液渾濁，粘稠，呈米白色，菌球大小、形狀各異，瓶內側附著一圈白色菌絲。

2.2.8 麻櫟木醋液對猴頭菇菌絲體生長的影響

麻櫟木醋液對猴頭菇菌絲體生長的影響見表16。

表16 液體培養中麻櫟木醋液對猴頭菇菌絲體生長的影響Tab.16 The effect of Quercus acutissima wood vinegar on mycelium growth of Hericium erinaceus in solid cultivation

由表16可知，猴頭菇菌絲體的生物量普遍較低，最高達3.60 g·L-1，高出對照組4.96%。添加麻櫟木醋液濃度為0～0.06%時，培養基菌液呈橙黃色，之后隨著濃度的增加，培養基顏色變淡，呈淡黃色，瓶內側附著少量白色菌絲，菌球大小各異。

液體培養時，羊肚菌的菌絲體生物量最少，但相較對照增加量最多，且生長狀態和培養基菌液顏色與其他食用菌不同，呈絲狀，黃綠色。滑菇、黑木耳、平菇和猴頭菇菌種的生長狀態呈球狀，表面光滑，大小各異，培養基菌液澄清，瓶內側附著白色菌絲。香菇菌種培養的菌球表面不光滑，有細長根狀延伸。赤芝菌種的培養基菌液澄清，呈乳白色，偏粘稠狀，菌球含水量較多，但清晰可見。金針菇菌種的培養基菌液渾濁，呈米白色，粘稠，菌球緊密連在一起，其生物量最高，但增加量卻很低。

3 討論與結論

倪淑君等[17]研究木醋液在平菇和香菇生產上的應用，發現高濃度木醋液抑制菌絲生長，添加適宜濃度的木醋液促進菌絲生長，以添加干料的0.025%～0.050%為宜，添加量超過0.100%會抑制平菇和香菇菌絲生長。試驗結果顯示，固體培養時促進香菇和平菇菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度為0.06%；液體培養時促進平菇菌絲生長的最適濃度為0.06%，而促進香菇菌絲生長的最適濃度為0.01%，與倪淑君等人的研究結果接近。張婷等[18]通過不同的培養方式研究山杏殼木醋液對滑菇、靈芝和香菇3種食用菌菌絲生長的影響，結果發現山杏殼木醋液對3種食用菌菌絲生長的影響不同。固體培養時，促進滑子菇菌絲生長的最適山杏殼木醋液濃度為0.025%；促進靈芝菌絲生長的最適山杏殼木醋液濃度為0.1%；而香菇菌絲生長受山杏殼木醋液的抑制；液體培養時，山杏殼木醋液對3種食用菌菌絲生長均表現為抑制。本研究中發現，固體培養時促進滑菇菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度為0.03%，促進赤芝菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度為0.01%；液體培養時，促進滑菇和赤芝菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度為0.06%，與張婷等[18]的研究結果不同，推測可能與食用菌菌種不同、木醋液種類不同等因素有關，原因有待進一步探討。

范冬茹等[19]研究木醋液對羊肚菌液體培養菌絲生長的影響，發現當木醋液濃度為0.05%～0.20%時，對羊肚菌菌絲生長具有促進作用，其中當濃度達到0.20%時，菌絲萌發快，生長狀態最好，生物量最高。試驗結果顯示，固體培養時促進羊肚菌菌絲生長的最適濃度為0.01%；而液體培養時促進羊肚菌菌絲生長的最適濃度為0.06%，與范冬茹等的研究結果相差較大。王穩等[20]通過液體培養的方式研究木醋液對金針菇菌絲體生長的影響，發現低濃度木醋液對金針菇生長有促進作用，其最適作用濃度為0.01%～0.10%。本研究中顯示，液體培養時促進金針菇菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度為0.01%，與王穩等的研究結果相似。黑木耳固體培養時促進菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度為0.06，液體培養時，與對照組相比，添加0.01%、0.03%、0.06%、0.09%、0.12%、0.15%的麻櫟木醋液對黑木耳菌絲生長均表現為抑制，這與馬珂[21]等在固體培養基中促進黑木耳菌絲生長的最佳樺樹木醋液濃度為0.30%結果不同，推測麻櫟木醋液對食用菌菌絲生長的影響可能與食用菌品種，培養條件以及生長狀態有關，其機理尚需更進一步的研究。固體培養和液體培養時，促進猴頭菇菌絲生長的最適麻櫟木醋液濃度均為0.06%。

綜上所述，麻櫟木醋液對8種食用菌菌絲生長的影響各不相同，高濃度麻櫟木醋液具有抑制食用菌生長的作用，而低濃度條件下則具有促進生長的作用。這可能與食用菌品種、培養方式等相關，這將為木醋液在食用菌栽培中的應用提供依據。