高溫高濕聯合作用對銀參膠囊穩定性的影響*

劉玉明，蔣定文，李珂嫻，陳 偉，侯登勇

（中國人民解放軍海軍特色醫學中心，上海 200433）

近年來，隨著國家海軍戰略由近海防御向遠海護衛轉型，海軍軍事訓練頻度和作戰任務強度不斷增加，尤其在航海特殊作業環境中，自然環境、生物環境、化學環境等綜合影響，再加上飲食單調，菜蔬較少，廣大官兵免疫力明顯下降［1］，如何篩選出具有增強部隊官兵免疫力的藥物或保健品，已成為科研工作者的重要研究課題。本課題組研制的銀參膠囊以刺五加提取物、銀耳提取物、維生素C 等為主要成分，增強免疫力的作用較強，前期已對其遺傳毒性［2］、急性毒性和長期毒性［3］，以及其中試制備工藝［4］進行了研究。為了進一步保證該產品在特殊航海作業環境下的質量和臨床用藥安全，本研究中考察了高溫、高濕環境對其穩定性的影響，也為該制劑的合理制作、運輸、儲備和使用提供參考?，F報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器

PHS-3E 型pH 計（上海精密科學儀器有限公司）；RCZ-5A 型藥物溶出度儀（天津大學精密儀器廠）；LB-2D 型膠囊劑崩解儀（上海黃海藥檢儀器廠）；LD5-2A 型離心機（北京醫用離心機廠）；DHG-9140A 型烤箱（上?；厶﹥x器制造有限公司）；AL204 型電子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；ZDJ-3S 型卡氏微量水分測定儀（北京先驅威鋒科技有限公司）。

1.2 試藥

刺五加提取物（哈爾濱仁皇藥業股份有限公司，批號為20110509）；維生素C（山東魯維制藥有限公司，批號為201203601）；銀耳提取物（杭州眾芝康菇生物技術有限公司，批號為JC111105）；銀參膠囊樣品（上海麥迪普生物有限公司，批號分別為Y12061331，Y12061332，Y12061333）；人參皂苷Re 對照品（中國食品藥品檢定研究院，含量＞98%）；甲醇、正丁醇、乙醇、高氯酸、冰乙酸、香草醛均為分析純，水為純化水。

1.3 方法

取3 批市售包裝（內包為鋁塑泡罩，外包為藥品包裝用鋁塑薄膜袋封口）樣品，置溫度為（37±1）℃、相對濕度為（75±5）%的環境存儲90 d。分別于0，30，60，90 d時取樣，按相應質量標準進行如下檢驗［5］。

外觀性狀：取樣品20 粒，在自然光線明亮處，膠囊的外觀應整潔，不得有黏結、變形或破裂現象，且應無異臭；內容物應為黃棕色至黃褐色粉末，干燥，松緊適度，混合均勻，且氣微，味苦、澀。

功效成分含量：1）總皂苷［6］。樣品中總皂苷經提取、PT 大孔吸附樹脂柱預分離后，在酸性條件下，香草醛與人參皂苷生成有色化合物，以人參皂苷Re 為對照品，于560 nm 波長處進行比色測定，繪制標準曲線，再進行計算。2）粗多糖［7］。采用硫酸-苯酚法，在490 nm 波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、質量濃度為橫坐標進行線性回歸，測定總糖含量。3）維生素C［8］。采用滴定法，參照2015 年版《中國藥典（二部）》測定維生素C 含量。均重復測定3 次。

理化檢驗：水分測定按GB 5009.3—2010 標準，灰分測定按GB 5009.4 標準，崩解時限測定按2015 年版《中國藥典（一部）》標準，鉛測定按GB 5009.12—2003標準，砷測定按GB／T 5009.11—2003 標準，汞測定按GB／T 5009.17—2003 標準。

微生物學檢驗：菌落總數檢驗按GB／T 4789.2—2003標準，大腸菌群檢驗按GB ／ T 4789.3—2003 標準；霉菌和酵母菌檢驗按GB／T 4789.15—2003 標準，致病菌檢驗按GB／T 4789.4、GB／T 4789.5、GB／T 4789.10、GB／T 4789.11 標準。

1.4 統計學處理

采用SPSS 20.0 統計學軟件分析。計量資料以表示。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

3 批樣品各監測時點的外觀性狀均無變化，內容物為淡棕色粉末，具有本品特有的海洋星蟲氣味，膠囊性狀完整光潔、無破裂，肉眼均未見外來雜質。90 d 雙因素考察結果顯示，3 批樣品3 個功效成分的含量（均以每100 g樣品中的含量計）無明顯變化。詳見表1。3 批樣品在30，60，90 d 時的水分含量比0 d 時增加，但均在控制范圍內，符合質量標準；其他理化指標測定結果均無明顯變化。詳見表2。3 批樣品中均未檢出致病菌，各監測時點菌落總數、霉菌數、酵母菌數均小于10 cfu／g，每100 g 樣品含大腸菌群最大可能數均不超過30 個，且無明顯變化。

3 討論

穩定性是指藥物制劑保持的穩定程度。藥物制劑的穩定性受物理因素和化學因素影響，物理影響主要是藥品長期暴露在空氣中時可能會出現分層、破裂、融化或物理性質變化；化學影響主要表現在氧化、水解反應上。制劑發生物理或化學變化會導致藥品質量發生變化，產生有毒物質，降低藥劑療效等。甚至有的藥品因色澤及成分性質發生改變，可能會導致患者出現藥品不良反應或藥物排異現象［9］。

表1 3 批樣品功效成分含量測定結果（±s，n ＝3）Tab.1 Determination results of functional components in the three batches of samples（±s，n ＝3）

表1 3 批樣品功效成分含量測定結果（±s，n ＝3）Tab.1 Determination results of functional components in the three batches of samples（±s，n ＝3）

批號Y12061331 Y12061332 Y12061333時間（d）0 30 60 90 0 30 60 90 0 30 60 90粗多糖（g）8.21±0.02 8.23±0.05 8.61±0.07 8.24±0.04 8.46±0.15 8.32±0.21 8.33±0.09 8.14±0.22 8.13±0.26 8.04±0.14 8.43±0.13 8.03±0.13總皂苷（以人參皂苷Re 計，g）1.14±0.07 1.14±0.06 1.22±0.12 1.13±0.11 1.13±0.10 1.14±0.05 1.14±0.03 1.13±0.04 1.12±0.06 1.09±0.12 1.13±0.05 1.12±0.06維生素C（g）9.43±0.12 9.24±0.07 9.03±0.11 9.04±0.07 9.39±0.08 9.24±0.10 9.02±0.08 8.72±0.10 9.34±0.07 9.13±0.07 9.04±0.10 8.93±0.05

表2 3 批樣品理化指標變化比較（±s，n ＝3）Tab.2 Comparison of physical and chemical indexes of the three batches of samples（±s，n ＝3）

表2 3 批樣品理化指標變化比較（±s，n ＝3）Tab.2 Comparison of physical and chemical indexes of the three batches of samples（±s，n ＝3）

批號Y12061331 Y12061332 Y12061333時間（d）0 30 60 90 0 30 60 90 0 30 60 90水分（%）3.66±0.03 5.72±0.16 6.08±0.19 6.12±0.13 3.62±0.09 5.86±0.15 6.16±0.09 6.19±0.04 3.74±0.07 5.72±0.10 6.04±0.06 6.11±0.09灰分（%）4.41±0.03 4.18±0.06 4.22±0.05 4.25±0.08 4.24±0.02 4.26±0.06 4.32±0.07 4.26±0.05 4.22±0.09 4.28±0.08 4.36±0.03 4.26±0.06鉛（mg／kg）0.21±0.01 0.22±0.02 0.21±0.03 0.19±0.02 0.22±0.02 0.24±0.03 0.19±0.04 0.18±0.02 0.23±0.05 0.21±0.01 0.19±0.02 0.22±0.03砷（mg／kg）0.14±0.02 0.14±0.03 0.14±0.01 0.14±0.02 0.14±0.03 0.14±0.02 0.14±0.02 0.14±0.03 0.16±0.03 0.15±0.04 0.15±0.03 0.14±0.02汞（mg／kg）＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010＜0.010崩解時限（min）4.22±0.04 4.23±0.12 4.21±0.06 5.15±0.09 4.18±0.05 5.16±0.08 4.19±0.13 5.15±0.09 4.24±0.12 5.26±0.16 4.25±0.15 5.00±0.05

溫度對藥物穩定性的影響較大［10-11］，在一定范圍內，每上升10 ℃，藥物制劑反應速率可加快約3 倍。水分在藥物制劑反應期間起到了不可或缺的作用，而生產、儲存環境內水分均可引起藥物制劑反應。濕度也是影響藥物穩定性的主要因素，藥物在潮濕的條件下會加速降解，或因吸入大量水分變軟，慢慢導致藥物生長菌落，大量微生物侵蝕，從而影響藥物的穩定性［12-13］。口服固體制劑受濕度的影響更大。

藥物等制劑穩定性考察中，一般需測定溶出度和含量均勻度［14］，有對性狀、相關物質、溶出度實行穩定性觀察［15］，也有對處方工藝含量、溶出度和崩解時限的分析［16］、耐酸力的測定［17］及對含量的測定［18-19］。正確選擇穩定性研究指標，對于藥物等制劑研究有重要意義。因此，穩定性的研究應貫穿相應制劑研發、生產、存儲、流通全過程，以及患者使用整個制劑的生命周期。本研究中對銀參膠囊的外觀性狀、功效成分、理化指標、微生物指標均進行了研究，結果表明，該制劑性質穩定，可為銀參膠囊的保健食品批文申報提供科學依據。