柳州地區(qū)2 863例成年女性抗核抗體譜的分析研究*

楊金玲，黃 誠，陸碧玉，黃李霜，黃麗華，陳大宇

柳州市婦幼保健院醫(yī)學(xué)遺傳科/柳州市出生缺陷預(yù)防與控制重點實驗室，廣西柳州 545001

抗核抗體譜(ANAs)包括最常見的自身免疫性抗體，ANAs中的抗體與細胞核中的大分子物質(zhì)，如核糖體、DNA、RNA、組蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物結(jié)合，對機體造成損傷。有研究認為，ANAs中的各種自身抗體可與核成分結(jié)合，從而影響受精卵細胞的分裂，導(dǎo)致妊娠失敗；多種妊娠不良事件，如反復(fù)自然流產(chǎn)、不孕、胚胎植入失敗與ANAs密切相關(guān)[1-3]。ANAs是診斷和評價自身免疫性疾病預(yù)后的重要指標，而自身免疫性疾病常見于女性，因此，對成年女性進行ANAs檢測具有重要意義。本文通過流式熒光免疫法檢測柳州地區(qū)成年女性ANAs，并進行結(jié)果分析，以期為臨床診斷治療提供依據(jù)[4]。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2017年8月至2020年2月在柳州市婦幼保健院就診的2 863例成年女性的血清。按年齡分為3個組：19～30歲組、>30～40歲組和>40歲組。按疾病類型分為9個組：可疑自身免疫性疾病組、易栓癥組、其他不良妊娠疾病組、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)組、不孕癥組、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組、其他婦科疾病組、孕期其他疾病組、其他類型流產(chǎn)組。

1.2儀器與試劑 流式熒光免疫法采用宙斯公司AtheNA Multi-Lyte抗核抗體檢測試劑盒，檢測儀器為美國Luminex公司生產(chǎn)的Luminex200TM流式點陣儀。

1.3方法 受檢者空腹采血后分離血清，進行流式熒光免疫法檢測。ANAs包括的項目有：抗SSA、SSB、Sm、RNP、Scl 70、Jo-1、Cent B、Histone、dsDNA共9種不同抗原IgG類抗體及其他抗核抗體[5]。

1.4檢測步驟 標本處理后進入Luminex200TM流式點陣儀檢測和數(shù)據(jù)處理。正常值為0～<100 U/mL，≥100～<120 U/mL為灰區(qū)，≥120 U/mL為異常。臨床上ANAs項目檢測值達到灰區(qū)值時，就需要密切觀察隨訪，因此，以≥100 U/mL為篩查陽性切值[4]。

1.5統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS24.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析，計數(shù)資料用頻數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不同年齡組間ANAs陽性率分析 柳州地區(qū)成年女性ANAs陽性率為15.75%，隨著年齡增長，ANAs陽性率呈逐漸升高趨勢，ANAs陽性率在24歲與46～47歲女性中出現(xiàn)升高趨勢，見圖1。3個年齡組ANAs陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.723，P=0.423)，見表1。

注:虛線表示群體平均篩查陽性率，實線表示各年齡篩查陽性率；短橫線表示各年齡篩查陽性率趨勢線。

表1 不同年齡組間ANAs陽性率比較

2.2各種抗核抗體陽性率及異常率分析 各種抗核抗體的陽性率有差異，其中抗SSA、RNP和dsDNA抗體陽性率分別為3.18%、3.07%和3.63%；其他ANAs抗體陽性率均<3.00%，抗Sm抗體陽性率最低，為0.07%。抗SSA、SSB、RNP抗體異常率均>80.00%，抗Scl-70、Cent B抗體異常率均>70.00%，其余ANAs抗體異常率<70.00%，其中抗Sm抗體異常率最低，為0.00%。見表2。

表2 各種抗核抗體陽性率及異常率

2.3ANAs在疾病中的陽性分布 可疑自身免疫性疾病組的ANAs陽性率最高，為24.23%，與其他組陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其他類型流產(chǎn)組ANAs陽性率(7.80%)最低，與可疑自身免疫性疾病、易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組的陽性率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組各組間的ANAs陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；其他婦科疾病、孕期其他疾病和其他類型流產(chǎn)組各組間ANAs陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。其他婦科疾病組與可疑自身免疫性疾病、易栓癥、其他不良妊娠疾病組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。孕期其他疾病組與可疑自身免疫性疾病、易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥組比較，ANAs陽性率比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 ANAs在疾病中的陽性分布

續(xù)表3 ANAs在疾病中的陽性分布

3 討 論

研究表明，與健康女性相比，患有自身免疫性疾病的女性生殖能力下降，新生兒的出生率下降12%～16%[6]。導(dǎo)致不孕癥和不良妊娠結(jié)局常見的原因是自身免疫抗體異常。自身免疫性疾病與不孕、反復(fù)流產(chǎn)和體外受精失敗密切相關(guān)。本研究對成年女性ANAs結(jié)果進行分析，為臨床診斷治療提供依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示，ANAs的陽性率隨年齡增加而逐漸升高，在>40歲組最高，但各年齡組ANAs陽性率差異不明顯，與LI等[7]研究結(jié)果相同。有研究者認為，ANAs陽性率與年齡有關(guān)[8]，但這與本研究結(jié)果不一致。本研究結(jié)果顯示，柳州地區(qū)成年女性ANAs陽性率為15.75%，這與之前報道的中國人(5.92%)[9]、日本人(9.50%)[10]和印度人(2.30%)[11]的ANAs陽性率差異較大，這些差異可能與研究的人群及檢測方式等相關(guān)。本研究結(jié)果提示，各年齡階段的成年女性均應(yīng)行ANAs檢測，其有助于早期診斷并判斷疾病的嚴重程度，早期積極采取治療措施，對降低并發(fā)癥及改善預(yù)后、提高患者生存質(zhì)量具有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，成年女性各種抗核抗體陽性率及異常率均不相同，抗SSA、RNP、dsDNA抗體檢出率均>3.00%，異常率均>50.00%；大部分ANAs異常率均達到50.00%以上；可疑自身免疫性疾病組的ANAs陽性率最高，為24.23%。臨床醫(yī)生根據(jù)抗核抗體陽性的類型，結(jié)合其他診斷指標和臨床癥狀綜合判斷，可有針對性地進行治療。對于達到灰區(qū)值但無典型臨床癥狀的病例，要進行定期復(fù)查，并隨訪觀察。不同自身免疫性疾病中抗核抗體陽性率情況不同，即不同的抗核抗體陽性可能提示不同的自身免疫性疾病。如系統(tǒng)性紅斑狼中抗Sm、dsDNA抗體陽性率均較高；抗SSA、SSB抗體陽性多見于干燥綜合征；抗RNP抗體陽性多提示混合型結(jié)締組織疾病；抗Scl-70抗體陽性提示硬皮病的可能等。ANAs檢測是目前臨床常用的自身免疫性疾病輔助診斷指標，不同種類自身免疫性疾病可形成特征性的ANAs[12-13]。ANAs檢測應(yīng)用于成年女性人群是非常必要的，因為抗核抗體陽性對自身免疫性疾病具有重要的預(yù)警作用，各種抗核抗體陽性率及異常率對自身免疫性疾病的早期診斷、控制、預(yù)后有重要意義。

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)指孕婦兩次或多次的自發(fā)性流產(chǎn)，約3%的孕婦在妊娠前28周可能發(fā)生復(fù)發(fā)性流產(chǎn)[14]。ANAs導(dǎo)致妊娠失敗的機制仍不清楚，但有研究表明一些流產(chǎn)中涉及患者的免疫機制[15-16]。在本研究中，不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性ANAs陽性率為14.71%。我國有研究報道，自身免疫型復(fù)發(fā)性流產(chǎn)女性ANAs的陽性率為8%～50%，對照組則為5%[17]，與本文結(jié)果相近。 近年來，越來越多的研究開始關(guān)注抗核抗體對不良妊娠結(jié)局的影響。在TICCONI等[2]的研究中，反復(fù)自然流產(chǎn)女性ANAs陽性率達50%；KIKUCHI等[18]報道的反復(fù)自然流產(chǎn)女性ANAs陽性率為28.7%。本研究提示易栓癥、其他不良妊娠疾病、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)/習(xí)慣性流產(chǎn)、不孕癥、月經(jīng)失調(diào)/痛經(jīng)組ANAs陽性率較高，均高于其他婦科疾病、孕期其他疾病、其他類型流產(chǎn)組的ANAs陽性率，可見血清ANAs檢測可評估免疫因素女性生殖方面的影響。目前有研究結(jié)果表明，免疫性不孕、卵巢早衰和移植失敗可能與ANAs陽性有關(guān)，但很少有研究報告體外受精-胚胎移植群體的ANAs陽性率[19-20]。TANIGUCHI等[21]研究表明，在進行體外受精-胚胎移植出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局的人群中，血清ANAs陽性率為25.1%；體外受精-胚胎移植人群中，血清ANAs陽性組臨床妊娠率低于ANAs陰性組，早期流產(chǎn)率高于ANAs陰性組，可見ANAs陽性可能是體外受精-胚胎移植的負性因素。李穎等[22]研究指出，因不明原因不孕、子宮內(nèi)膜異位癥、多次人工授精失敗、排卵期障礙等原因而進行外受精-胚胎移植的人群中，ANAs陽性率較對照組高，提示有可能是因為免疫因素導(dǎo)致其不孕。本研究結(jié)果顯示，其他婦科疾病及孕期其他疾病組中，ANAs陽性率也大于5.00%，說明ANAs檢測對于女性生殖生育評估預(yù)測具有重要意義，對這一部分成年女性人群進行ANAs篩查也非常必要，可早診斷和早治療自身免疫性疾病，在一定程度上亦可防治自身免疫性疾病。

綜上所述，ANAs檢測可為成年女性自身免疫性疾病的早期診斷和治療及自身抗體譜檢驗信息咨詢提供可靠的參考依據(jù)，對自身免疫性疾病的早期診斷、控制、預(yù)后有重要意義；同時血清ANAs檢測可評估免疫因素在女性生殖方面的影響，根據(jù)不同的抗核抗體類型進行針對性治療，以期提高臨床妊娠率，降低流產(chǎn)率，進而改善妊娠結(jié)局。