血清褪黑素、細(xì)胞角蛋白-18裂解片段水平與急性腦梗死患者預(yù)后的關(guān)系*

鄭宗菊,鄢宗仁△,秦 楓

1.重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，重慶 401320;2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科,重慶 400010

急性腦梗死(ACI)是因腦組織血流灌注減少或中斷所導(dǎo)致的腦組織缺血、缺氧和壞死，具有發(fā)病率高、致殘率高、病死率高和預(yù)后差等特點(diǎn)[1-2]。當(dāng)前，隨著人口老齡化的進(jìn)展，ACI發(fā)病率也呈逐漸上升趨勢，嚴(yán)重威脅著人們的生命健康安全。褪黑素是一種由松果體分泌的神經(jīng)調(diào)節(jié)激素，具有抗氧化、清除自由基和抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的作用[3]。研究發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性腦出血死亡患者的血清褪黑素水平高于存活患者，血清褪黑素可作為自發(fā)性腦出血患者死亡的預(yù)測因子[4]。細(xì)胞角蛋白(CK)主要分布于上皮組織，在細(xì)胞凋亡過程中CK可在半胱天冬酶的裂解作用下生成細(xì)胞角蛋白-18裂解片段(CCCK-18)[5]。研究結(jié)果表明，血清CCCK-18水平與創(chuàng)傷性腦損傷患者預(yù)后不良有關(guān)，其水平變化可預(yù)測創(chuàng)傷性腦損傷患者的早期病死率[6]。目前，國內(nèi)關(guān)于血清褪黑素、CCCK-18與急性腦梗死關(guān)系的研究較少。因此，本研究旨在探討ACI患者血清褪黑素、CCCK-18水平，分析血清褪黑素、CCCK-18水平與ACI患者預(yù)后的關(guān)系。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1月至2019年10月在重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院行介入治療的ACI患者136例為ACI組，其中男89例，女47例；年齡35～78歲，平均(60.83±7.29)歲；體質(zhì)量指數(shù)(24.66±3.25)kg/m2；高血壓40例，糖尿病51例，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病28例，高血脂76例；飲酒史58例；吸煙史82例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患者均符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；(2)均經(jīng)頭顱MRI或CT影像學(xué)檢查確診；(3)均為首次發(fā)病；(4)發(fā)病至入院時間小于12 h；(5)所有患者及家屬均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)出血性腦梗死或腦出血患者；(2)合并惡性腫瘤者；(3)合并嚴(yán)重心、肝、腎功能障礙者；(4)合并血液系統(tǒng)疾病者；(5)臨床資料不完整者。對出院患者進(jìn)行為期3個月的隨訪，根據(jù)改良Rankin評分表(mRS)評估患者功能轉(zhuǎn)歸[8]，其中mRS≤2分為預(yù)后良好組(86例)，mRS>2分為預(yù)后不良組(50例)。同時，選取重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院體檢健康人群100例為對照組，其中男59例，女41例；年齡32～75歲，平均(58.96±6.71)歲；體質(zhì)量指數(shù)(24.02±2.89)kg/m2；高血壓34例，糖尿病31例，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病25例，高血脂63例；飲酒史52例；吸煙史60例。兩組患者的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究獲得重慶市巴南區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會討論通過。

1.2方法

1.2.1資料收集 收集患者的臨床資料，包括年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、高血壓、糖尿病、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、高血脂、飲酒史、吸煙史、發(fā)病至溶栓時間、美國國立衛(wèi)生院神經(jīng)功能缺損評分(NIHSS評分)等。

1.2.2血清褪黑素、CCCK-18檢測 所有研究對象均在入院時空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周靜脈血5 mL，離心10 min(3 000 r/min)，分離上層血清，置于-80 ℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測各組血清褪黑素、CCCK-18水平，褪黑素ELISA檢測試劑盒購自德國IBL公司，CCCK-18 ELISA檢測試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司，檢測過程嚴(yán)格按照試劑盒的說明操作進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1ACI組與對照組血清褪黑素、CCCK-18水平比較 ACI組血清褪黑素、CCCK-18水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 ACI組與對照組血清褪黑素、CCCK-18水平比較

2.2ACI患者不同預(yù)后臨床指標(biāo)比較 ACI預(yù)后不良組NIHSS評分、血清褪黑素和CCCK-18水平高于預(yù)后良好組，發(fā)病至溶栓時間長于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 ACI患者不同預(yù)后臨床指標(biāo)比較

2.3相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，ACI患者的血清褪黑素、CCCK-18與NIHSS評分呈正相關(guān)(r=0.458、0.513，P<0.05)。

2.4血清褪黑素、CCCK-18對ACI患者預(yù)后的預(yù)測價值 血清褪黑素預(yù)測ACI患者預(yù)后的AUC為0.873(95%CI：0.791～0.956，P<0.001)，靈敏度和特異度分別為82.1%和71.0%；血清CCCK-18的AUC為0.858(95%CI：0.771～0.945，P<0.001)，靈敏度和特異度分別為79.5%和77.4%；聯(lián)合檢測的AUC為0.945(95%CI：0.899～0.992，P<0.001)，靈敏度和特異度分別為87.2%和83.9%，見圖1。

圖1 血清褪黑素、CCCK-18預(yù)測ACI患者預(yù)后的ROC曲線

2.5影響ACI患者預(yù)后不良的影響因素分析 以患者3個月預(yù)后不良為因變量，以NIHSS 評分、發(fā)病至溶栓時間、血清褪黑素和CCCK-18為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，NIHSS評分、血清褪黑素、CCCK-18水平升高和發(fā)病至溶栓時間延長是影響ACI患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 影響ACI患者預(yù)后不良的影響因素分析

3 討 論

ACI是神經(jīng)系統(tǒng)常見的急重癥之一，多發(fā)于中老年人，是由動脈粥樣硬化、栓子形成等原因?qū)е卵芮幌蹲冋踔炼氯绊懢植磕X供血并造成相應(yīng)腦組織壞死的一種綜合征，主要表現(xiàn)為頭暈、頭痛、半身不遂和語言障礙等。研究發(fā)現(xiàn)，大約70% 腦梗死患者會出現(xiàn)不同程度的生活能力缺陷，導(dǎo)致患者生活無法自理，給患者及家庭帶來了沉重負(fù)擔(dān)[9]。同時，有報道稱，ACI患者1年內(nèi)出現(xiàn)死亡和殘疾的概率高達(dá)45%，而老年患者的預(yù)后更差[10]。目前，隨著人們生活方式的轉(zhuǎn)變和生活節(jié)奏的加快，ACI發(fā)病率呈現(xiàn)年輕化的趨勢。因此，尋找早期評估ACI發(fā)生及預(yù)后狀況判斷的生物標(biāo)志物對提高ACI患者治療和改善預(yù)后具有重要意義。

褪黑素主要由松果體分泌，存在于多種細(xì)胞、組織和器官，如淋巴細(xì)胞、骨髓、胸腺、胃腸道等。褪黑素是一種有效的抗氧化劑，可作為自由基清除劑來調(diào)節(jié)多種分子途徑，包括在不同病理?xiàng)l件下的氧化應(yīng)激、炎癥、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞死亡[11]。褪黑素也可通過減少促炎細(xì)胞因子[如白細(xì)胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)]和增加抗炎細(xì)胞因子(如IL-10)來減少神經(jīng)炎性反應(yīng)。嚴(yán)彩霞等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在嚴(yán)重創(chuàng)傷性腦損傷患者的血清中，可出現(xiàn)內(nèi)源性褪黑素大量產(chǎn)生，其可通過穩(wěn)定內(nèi)皮的滲透性，來減少神經(jīng)元的死亡。MARSEGLIA等[13]報道稱，血清褪黑素與腦損傷的嚴(yán)重程度有關(guān)，其水平變化可作為損傷腦組織對氧化應(yīng)激或炎癥的反應(yīng)。LORENTE等[14]研究發(fā)現(xiàn)，血清褪黑素水平升高與腦梗死患者的預(yù)后不良有關(guān)，其是腦梗死患者短期預(yù)后不良的危險因素。CCCK-18是中間絲狀家族的一種蛋白質(zhì)，存在于大多數(shù)上皮細(xì)胞(如腸道、泌尿道或呼吸道等)和實(shí)質(zhì)細(xì)胞(如肝細(xì)胞等)中。血液循環(huán)中CCCK-18水平變化與腦細(xì)胞的凋亡、壞死和自噬有關(guān)。血清CCCK-18水平與損傷后局部腦實(shí)質(zhì)缺血性梗死的發(fā)生有關(guān)，是反映腦實(shí)質(zhì)細(xì)胞凋亡程度的重要標(biāo)志。研究證實(shí)，血清CCCK-18水平升高與單純硬膜外血腫并腦疝患者術(shù)后繼發(fā)大面積腦梗死密切相關(guān)[15]。

本研究結(jié)果顯示，ACI組患者血清褪黑素、CCCK-18水平高于對照組，ACI預(yù)后不良組血清褪黑素、CCCK-18水平高于預(yù)后良好組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，說明血清褪黑素、CCCK-18水平與急性腦梗死患者的預(yù)后狀況密切相關(guān)。MOLNAR等[16]報道稱，血清CCCK-18水平越高，腦梗死患者的死亡風(fēng)險越大，提示血清CCCK-18水平升高是預(yù)測腦梗死患者預(yù)后不良的重要指標(biāo)。Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，血清褪黑素、CCCK-18水平與NIHSS評分呈正相關(guān)(r=0.458、0.513，P<0.05)，提示血清褪黑素、CCCK-18水平越高，患者神經(jīng)功能缺損程度越重，說明血清褪黑素、CCCK-18在一定程度上可反映ACI患者病情嚴(yán)重程度，對ACI患者預(yù)后有一定的評估價值。ROC曲線結(jié)果顯示，血清褪黑素、CCCK-18聯(lián)合檢測預(yù)測ACI患者預(yù)后的靈敏度和特異度均高于單項(xiàng)檢測，說明聯(lián)合檢測對ACI患者預(yù)后的預(yù)測價值更高，更有助于指導(dǎo)臨床治療，改善患者預(yù)后。多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清褪黑素和CCCK-18水平升高是ACI患者預(yù)后不良的重要危險因素，提示血清褪黑素和CCCK-18水平變化可作為ACI患者預(yù)后狀況判斷的生物學(xué)指標(biāo)。

綜上所述，ACI患者血清褪黑素和CCCK-18水平明顯升高，其水平變化與ACI患者預(yù)后不良密切相關(guān)，聯(lián)合檢測血清褪黑素和CCCK-18對判斷ACI患者預(yù)后有較高預(yù)測價值。但是，本研究樣本數(shù)量不足，未來尚需大樣本、多中心數(shù)據(jù)加以研究證實(shí)。