賴氨酸和其他必需氨基酸對1～18日齡中速型黃羽肉雞生長性能、血清生化指標、器官指數和腸道組織形態的影響

施壽榮 劉勇強 張 珊 朱沛霽

(1.中國農業科學院家禽研究所，揚州 225125；2.江蘇立華牧業股份有限公司，常州 213100)

賴氨酸是家禽飼糧中的第二限制性氨基酸，被稱為“生長型氨基酸”，具有參與能量代謝、蛋白質合成及增強機體免疫等功能[1-3]。賴氨酸添加量對確定其他必需氨基酸的添加量極為重要，保持一定的必需氨基酸比例對家禽生長具有重要意義。國內外學者提出了理想氨基酸平衡模式[4]，賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸是家禽玉米-豆粕型飼糧的限制性氨基酸[5-7]，已有學者針對氨基酸比例進行研究。席鵬彬等[8]研究表明，飼糧賴氨酸∶蛋氨酸∶色氨酸為100∶40∶17時，快長型嶺南黃雞能獲得最佳生長性能。林廈菁等[9]綜合生長性能、血漿生化指標等認為適合快大型黃羽肉雞的飼糧賴氨酸∶蛋氨酸∶蘇氨酸∶色氨酸∶異亮氨酸為100∶(44～55)∶72∶23∶(54～72)。然而，關于黃羽肉雞營養需要量的研究不盡相同，加之我國黃羽肉雞品種繁多，市場覆蓋范圍逐步增大，完善我國黃羽肉雞飼養標準的營養需要量至關重要。因此，本試驗旨在研究賴氨酸和其他必需氨基酸對1～18日齡黃羽肉雞生長性能、血清生化指標、器官指數和腸道組織形態的影響，為黃羽肉雞的營養需要量以及實際生產提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與設計

選擇遺傳背景相同、同批次、同性別(雄性)、發育正常的1日齡健康中速型“優麻”黃羽肉雞(江蘇立華牧業股份有限公司)810羽，隨機分為9組，每組6個重復，每個重復15羽。試驗采用雙因素試驗設計，以我國《雞飼養標準》(NY/T 33—2004)中黃羽肉雞仔雞營養需要中的氨基酸添加推薦量為基礎，結合江蘇立華牧業股份有限公司中速雞的前期研究，確定了本試驗的中氨基酸水平，即賴氨酸水平為1.05%、蛋氨酸水平為0.78%、蘇氨酸水平為0.68%、色氨酸水平為0.19%；以中氨基酸水平為基礎，梯度設置依次為85%基礎、100%基礎、115%基礎，即設3個賴氨酸水平(0.89%、1.05%、1.20%)和3個其他必需氨基酸(蛋氨酸+蘇氨酸+色氨酸)水平(低水平：0.66%蛋氨酸+0.58%蘇氨酸+0.16%色氨酸；中水平：0.78%蛋氨酸+0.68%蘇氨酸+0.19%色氨酸；高水平：0.90%蛋氨酸+0.78%蘇氨酸+0.22%色氨酸)，試驗設計見表1。

表1 試驗設計

1.2 試驗飼糧

試驗飼糧參考我國《雞飼養標準》(NY/T 33—2004)配制，選用玉米、豆粕、玉米蛋白粉等配制而成，其組成及營養水平見表2。各組飼糧能量、鈣、磷等營養水平相同，通過添加氨基酸調整各組氨基酸水平。

表2 試驗飼糧組成及營養水平(風干基礎)

1.3 飼養管理

動物養殖試驗在中國農業科學院家禽研究所儀征試驗基地開展。試驗期18 d(即1～18日齡，為江蘇立華牧業股份有限公司確定的中速型黃羽肉雞的第1生長階段)。試驗采用網面平養，人工持續光照，育雛溫度前3 d為32～35 ℃，之后每天降低0.5～1.0 ℃，直至常溫。試驗期間試驗雞自由采食和飲水。按試驗基地的常規程序進行免疫和飼養管理。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能

在動物試驗期間觀察試驗肉雞的生長和健康狀況，并記錄死淘情況，在試驗開始時以重復為單位進行稱重并記錄，試驗結束前1天晚上進行斷料，第2天06：00以重復為單位稱重，記錄飼養期間耗料量和死淘狀況，計算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.2 血清生化指標

試驗結束后于每個重復隨機選取2只雞進行采血，翅靜脈采血并置于促凝管中，靜置離心制備血清，于-20 ℃保存。用全自動生化分析儀(UniCel DxC 800 Synchron，Beckman Coulter，美國)測定血清總蛋白(TP)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)含量，試劑盒購于中山標佳生物科技有限公司。

1.4.3 器官指數

在試驗結束后每個重復隨機選取2只雞，稱重后屠宰，分離單側胸腺、肝臟、脾臟和法氏囊，并稱重，計算相關的器官指數：

胸腺指數(g/kg)=單側胸腺重量(g)×2/活體重(kg)；肝臟指數(g/kg)=肝臟重量(g)/活體重(kg)；脾臟指數(g/kg)=脾臟重量(g)/活體重(kg)；法氏囊指數(g/kg)=法氏囊重量(g)/活體重(kg)。

1.4.4 腸道組織形態

在試驗結束后每個重復隨機選取2只雞，屠宰后迅速剪取空腸前端1 cm左右，置于10%甲醛溶液中浸泡保存，固定24 h以上，留作腸道切片。然后進行洗滌、脫水、浸蠟、包埋、切片，并用蘇木精-伊紅染色，用熒光顯微鏡(DM4000B，Leica Microsystems，Wetzlar，德國)測量絨毛高度和隱窩深度，計算絨毛高度/隱窩深度(villous height/crypt depth，V/C)。

1.5 數據處理與統計分析

試驗數據采用SPSS 19.0軟件的一般線性模型(GLM)的單變量進行分析，若組間差異顯著，則采用Duncan氏法進行多重比較，P<0.05為差異顯著。試驗結果用平均值和均值標準誤(SEM)表示。

2 結 果

2.1 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞生長性能的影響

賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞生長性能的影響見表3。賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞生長性能無顯著影響(P>0.05)。賴氨酸顯著影響黃羽肉雞的ADG和F/G(P<0.05)，表現為1.05%、1.20%賴氨酸水平組ADG顯著高于0.89%賴氨酸水平組(P<0.05)，1.05%賴氨酸水平組F/G顯著低于0.89%、1.20%賴氨酸水平組(P<0.05)。其他必需氨基酸對黃羽肉雞ADG、ADFI和F/G均無顯著影響(P>0.05)。

表3 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞生長性能的影響

2.2 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞血清生化指標的影響

賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞血清生化指標的影響見表4。賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞血清TP含量有顯著影響(P<0.05)，對其他血清指標無顯著影響(P>0.05)。同時，賴氨酸對黃羽肉雞的血清TP和UA含量有顯著影響(P<0.05)，表現為1.05%賴氨酸水平組的血清TP和UA含量顯著低于0.89%、1.20%賴氨酸水平組(P<0.05)；賴氨酸對黃羽肉雞的血清CHO、TG和HDL含量無顯著影響(P>0.05)。其他必需氨基酸對黃羽肉雞的血清CHO、TG和HDL含量有顯著影響(P<0.05)，表現為低、中其他必需氨基酸水平組的血清CHO和HDL含量顯著高于高其他必需氨基酸水平組(P<0.05)，低、中其他必需氨基酸水平組的血清TG含量顯著低于高其他必需氨基酸水平組(P<0.05)。

表4 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞血清生化指標的影響

2.3 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞器官指數的影響

賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞器官指數的影響見表5。賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞的法氏囊指數有顯著影響(P<0.05)，表現為Ⅷ組的法氏囊指數顯著高于其他各組(P<0.05)；對胸腺指數、肝臟指數、脾臟指數無顯著影響(P>0.05)。賴氨酸對黃羽肉雞的胸腺指數、肝臟指數、脾臟指數和法氏囊指數均無顯著影響(P>0.05)。其他必需氨基酸對黃羽肉雞的胸腺指數有顯著影響(P<0.05)，表現為中其他必需氨基酸水平組的胸腺指數顯著高于低、高其他必需氨基酸水平組(P<0.05)。

表5 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞器官指數的影響

2.4 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞空腸組織形態的影響

賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞空腸組織形態的影響見表6。賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞空腸隱窩深度有顯著影響(P<0.05)，對空腸絨毛高度和V/C無顯著影響(P>0.05)。賴氨酸對黃羽肉雞空腸絨毛高度有顯著影響(P<0.05)，表現為0.89%賴氨酸水平組的空腸絨毛高度顯著高于1.05%賴氨酸水平組(P<0.05)，與1.20%賴氨酸水平組差異不顯著(P>0.05)。其他必需氨基酸對黃羽肉雞的空腸隱窩深度和V/C有顯著影響(P<0.05)，表現為低其他必需氨基酸水平組的空腸隱窩深度顯著低于中、高其他必需氨基酸水平組(P<0.05)，而V/C顯著高于中、高其他必需氨基酸水平組(P<0.05)。

表6 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞空腸組織形態的影響

3 討 論

3.1 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞生長性能的影響

賴氨酸是家禽體內用于正常生長和發育不可或缺的營養元素，不但參與機體內蛋白質的合成，而且對機體的能量代謝也有著重要的影響，在實際生產中適宜的賴氨酸添加量對提高肉雞生長速度及飼料轉化率等有重要意義[10-11]。賴氨酸添加量對確定其他必需氨基酸的添加量極為重要，當飼糧中的賴氨酸水平降低時，其他氨基酸的吸收利用也會受到很大的影響。蛋氨酸作為家禽玉米-豆粕型飼糧的第一限制性氨基酸，在飼糧中的添加量是影響動物體增重、F/G、屠宰性能的主要因素[12-15]。蘇氨酸亦是肉雞的必需氨基酸之一，對肉雞的生長性能、飼料轉化率等具有重要影響[16]。國內外亦有研究表明飼糧中色氨酸缺乏會抑制肉雞的體增重和采食量，同時會顯著降低飼料轉化率，通過補充合成色氨酸可顯著改善肉雞的生長性能[17-18]。本研究結果表明，賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞生長性能無顯著影響，但賴氨酸顯著影響黃羽肉雞的ADG和F/G，當賴氨酸水平為1.05%時，黃羽肉雞獲得最大ADG和最低F/G，在本試驗條件下其他必需氨基酸對黃羽肉雞生長性能影響不大，可能是因為試驗雞品種及營養需求特征不同，加之當地飼養環境也存在差異。

Knowles等[19]研究4～15日齡的肉仔雞獲得最大體增重、ADFI以及最佳飼料轉化率的賴氨酸需要量分別為1.01%、0.91%和1.07%，這與本研究得到的賴氨酸需要量接近。Bernal等[20]研究10～21日齡的肉仔雞獲得最大體增重的賴氨酸需要量為1.22%，高于本試驗研究所得到的結果，這可能是因為不同品種雞的生理特點以及營養需要特點不同。國內關于不同種類黃羽肉雞賴氨酸營養需要量的試驗研究比較缺少，陳繼蘭等[21]研究1～3周齡石岐黃肉雞獲得最大生長性能的賴氨酸需要量為1.03%，與本試驗的賴氨酸需要量接近。陳盼盼等[22]研究表明，飼糧中賴氨酸水平從0.60%升至1.40%時，1～21日齡肉雞ADG與ADFI呈先增加后降低的趨勢，F/G呈先降低后增加的趨勢；而當飼糧賴氨酸水平為1.00%時，F/G顯著低于其他各組。本試驗研究與陳盼盼等[22]的研究結果相似，隨著飼糧中的賴氨酸水平的提高，黃羽肉雞ADG升高，但1.05%和1.20%賴氨酸水平組的ADG無顯著差異，F/G則先降低后升高，表明肉雞的生長性能并沒有總隨著賴氨酸水平的升高而升高。當飼糧中賴氨酸水平過量時可能會與其他種類的氨基酸發生拮抗作用，從而抑制肉雞蛋白質的合成，阻礙生長。

3.2 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞血清生化指標的影響

血清TP含量可以反映出機體的營養以及代謝狀況，當機體營養欠缺時，或者血液中的水分增多等都能夠引起TP含量降低，機體營養不良也可以造成血清TP含量下降[23]。Grisoni等[24]研究表明，血清TP含量是能夠有效反映家禽體內蛋白質代謝狀況的指標，血清TP含量越高，表明家禽體內的蛋白質代謝越旺盛，營養狀況表現良好。孫豐[25]研究報道，飼糧中添加高精氨酸和高賴氨酸的1～21日齡和22～42日齡2個階段肉雞血清TP含量均顯著高于基礎飼糧組。Debnath等[26]研究發現，飼糧中添加蘇氨酸可使血清TP含量增加。本試驗結果表明，賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對血清TP含量影響顯著，適宜的飼糧氨基酸水平能夠提高血清TP的含量，從而加強了肉雞合成蛋白質的能力，與前人報道研究一致。

UA是核酸中嘌呤代謝的終極產物，它是用來衡量機體內蛋白質營養狀況和分解代謝水平的一個非常重要的指標，當蛋白質合成增加時，血清UA含量將降低。王紀亭等[27]研究表明，適宜的飼糧氨基酸比例可以顯著降低血清UA含量。本試驗結果表明，不同的賴氨酸水平組的血清UA含量差異顯著，但其他必需氨基酸以及賴氨酸和其他必需氨基酸的交互作用對血清UA含量無顯著影響，從結果看以飼糧中賴氨酸水平為1.05%、蛋氨酸水平為0.78%、蘇氨酸水平為0.68%、色氨酸水平為0.19%時，1～18日齡中速型黃羽肉雞血清UA含量最低，且增加了血清TP含量，從而加強了肉雞合成蛋白質的能力。

CHO不但是構成動物機體的重要組織成分，而且也是血液中的脂類轉移系統的必需因子。動物血清中CHO含量的高低能夠體現出動物機體內脂肪的沉積狀況。血清TG含量在一定意義上能夠表明肉仔雞脂肪合成的強度，當機體某種氨基酸過量或者少量時，其他氨基酸的吸收利用將會受到影響，不能用于合成蛋白質的氨基酸可能用于合成TG[28]。當機體脂肪沉積增加時，血清CHO和TG含量降低。田大龍等[29]研究表明，飼糧賴氨酸水平對22～42日齡愛拔益加肉雞的血清CHO、TG含量等指標無顯著影響。本試驗結果與其類似，賴氨酸對黃羽肉雞血清CHO、TG含量無顯著影響，這可能是由于本試驗設計的賴氨酸水平不足以對肉雞體內的脂類代謝產生影響。而其他必需氨基酸對黃羽肉雞的血清CHO、TG含量有顯著影響，且血清CHO和HDL含量隨著其他必需氨基酸水平的提高呈現降低趨勢。根據血清生化指標確定1～18日齡中速型黃羽肉雞飼糧適宜氨基酸組和為：賴氨酸水平1.05%、蛋氨酸水平0.78%、蘇氨酸水平0.68%、色氨酸水平0.19%。

3.3 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞器官指數的影響

動物機體的免疫狀況能夠通過對其主要的免疫器官重量以及免疫器官指數來評價，比如胸腺指數、脾臟指數、法氏囊指數等可以在一定程度上反映動物機體的免疫功能[30]，免疫器官的生長和發育對機體的免疫力強度有著直接的影響作用，免疫器官指數的提高則代表機體免疫系統發育的速度較快，表明機體的免疫力比較強。陳盼盼等[22]研究發現，飼糧賴氨酸水平為1.00%時，肉雞胸腺、肝臟等器官重量最大。田大龍等[29]研究表明，飼糧賴氨酸水平對22～42日齡愛拔益加肉雞的胸腺指數、肝臟指數和脾臟指數有顯著影響。而李燕蒙等[31]研究表明，飼糧賴氨酸缺乏會顯著抑制胸腺的發育，而對脾臟和法氏囊指數沒有顯著影響。本試驗結果表明，賴氨酸對黃羽肉雞的胸腺指數、肝臟指數、脾臟指數以及法氏囊指數無顯著影響。而賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞法氏囊指數具有顯著影響，飼糧中賴氨酸水平為1.20%、蛋氨酸水平為0.78%、蘇氨酸水平為0.68%、色氨酸水平為0.19%時，肉雞的法氏囊指數最高，說明合理的氨基酸配比在一定程度上可以促進黃羽肉雞的免疫器官發育，從而增強機體免疫力。

鄭輝等[32]研究表明，飼糧中不同的蛋氨酸水平對肉雞的胸腺指數有顯著影響。Azzam等[33]研究表明，飼糧中蘇氨酸水平的提高對肉雞的胸腺指數、法氏囊指數沒有顯著影響。Taghinejad-Roudbaneh等[16]研究8種不同水平的蘇氨酸飼糧對21～42日齡肉雞免疫器官指數的影響，發現蘇氨酸對肉雞脾臟指數沒有顯著影響。王紅梅等[34]研究發現，飼糧蘇氨酸水平對肉雞法氏囊指數沒有顯著影響，但對脾臟指數有顯著影響，且蘇氨酸水平為0.67%時肉雞脾臟指數最高。本試驗研究結果與之接近，本試驗結果表明，隨著氨基酸水平的提高，肉雞胸腺指數有先增高后降低的趨勢，飼糧中蛋氨酸水平為0.78%、蘇氨酸水平為0.68%、色氨酸水平為0.19%時，肉雞胸腺指數最高，表明試驗肉雞的免疫器官指數并沒有總隨著氨基酸水平的升高而升高，飼糧氨基酸水平過低或過高均會影響機體免疫系統的發育及功能的發揮。

3.4 賴氨酸和其他必需氨基酸對黃羽肉雞空腸組織形態的影響

良好的小腸結構和小腸功能是動物體消化并吸收營養物質和健康生長的生理學基礎[35]。消化系統的消化吸收強度會隨著腸絨毛高度的增加而增強，從而促進動物的生長發育[36]。蔣桂韜等[37]研究發現，飼糧賴氨酸水平為0.75%時，臨武鴨的腸絨毛高度顯著增加，表明適宜的賴氨酸水平可以提高腸道絨毛高度。而楊麒[38]研究表明，提高飼糧中賴氨酸水平能夠顯著降低肉雞腸道絨毛高度，賴氨酸水平為1.15%時，各個腸段的隱窩深度最淺。本研究結果表明，隨著飼糧賴氨酸水平增加，空腸絨毛高度呈先降低而后升高的趨勢，飼糧賴氨酸水平為0.89%時，空腸絨毛高度最大，而各組的空腸隱窩深度無顯著差異。這可能是高水平的賴氨酸會增加空腸的消化吸收負擔，從而引起空腸絨毛的發育速度降低。

陳娜娜等[39]研究表明，蛋氨酸鋅可以顯著降低空腸黏膜的隱窩深度。對于蛋氨酸、蘇氨酸以及色氨酸對腸道黏膜影響的研究鮮見。本研究結果表明，賴氨酸和其他必需氨基酸交互作用對黃羽肉雞空腸隱窩深度有顯著影響，當賴氨酸水平為1.05%時，低、高其他必需氨基酸水平組空腸黏膜隱窩深度相對較低。V/C能夠綜合反映小腸的功能狀態，若V/C降低，則代表黏膜不完整，機體消化吸收功能會降低，常易發生腹瀉，從而阻礙動物生長；若V/C升高，表明腸內膜面積比較大，腸黏膜的結構得到益化，單位面積內的腸絨毛細胞數量提高，消化吸收功能得增強，腹瀉率降低[40-41]。Selle等[42]研究報道，飼糧賴氨酸水平為1.15%時，肉雞的回腸消化率得到顯著改善。本試驗結果表明，賴氨酸對肉雞空腸黏膜V/C沒有顯著影響，而其他必需氨基酸對空腸黏膜V/C有顯著影響，低其他必需氨基酸水平即蛋氨酸水平為0.66%、蘇氨酸水平為0.58%、色氨酸水平為0.16%時，回腸黏膜V/C最高，從而增加空腸腸段的消化率。

4 結 論

① 飼糧賴氨酸水平為1.05%時，1～18日齡中速型黃羽肉雞獲得最大ADG和最低F/G，而其他必需氨基酸對黃羽肉雞生長性能影響不大。

② 飼糧賴氨酸水平為1.05%、蛋氨酸水平為0.78%、蘇氨酸水平為0.68%、色氨酸水平為0.19%時，1～18日齡中速型黃羽肉雞血清UA含量最低，且血清TP含量較高。

③ 飼糧賴氨酸水平為1.20%、蛋氨酸水平為0.78%、蘇氨酸水平為0.68%、色氨酸水平為0.19%時，1～18日齡中速型黃羽肉雞的法氏囊指數最高。