異常血常規(guī)結(jié)果分析在瘧疾診斷中的價(jià)值

劉文雄，邱明好，毛遠(yuǎn)科，莫善穎，羅國蘭，賴軍華，蔣利君，

（1.柳州市工人醫(yī)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，廣西 柳州 545005；2.柳州市工人醫(yī)院 感染科，廣西 柳州 545005；3.賀州市人民醫(yī)院 口腔科，廣西 賀州 542899；4.柳州市工人醫(yī)院 重癥監(jiān)護(hù)科，廣西 柳州 545005；5.中國援建尼日爾綜合示范醫(yī)院 檢驗(yàn)科，尼日爾 尼亞美）

0 引言

瘧疾是一種由瘧原蟲引起的威脅生命的疾病，通過受感染的雌性按蚊叮咬傳播給人類。2019年，全球估計(jì)有2.29 億瘧疾病例，因瘧疾死亡人數(shù)估計(jì)為40.9萬。患病后可見患者出現(xiàn)嚴(yán)重程度不同的突發(fā)性寒戰(zhàn)、高熱和大量出汗，并伴有頭痛、全身酸痛、乏力等臨床癥狀，間日瘧和三日瘧患者患病早期臨床癥狀并不規(guī)則，但在發(fā)病數(shù)次后可逐漸變得規(guī)則。而如何有效提高瘧疾患者的疾病診斷準(zhǔn)確率，盡早對患者疾病類型確診并開展治療干預(yù)措施十分關(guān)鍵[1]。非洲撒哈拉沙漠以南地區(qū)是瘧疾的高發(fā)流行區(qū)域，由廣西壯族自治區(qū)對口進(jìn)行醫(yī)療援助的國家尼日爾正處于該區(qū)域，在對該國常見的、多發(fā)的傳染病瘧疾的診斷和防治工作中，作為一名檢驗(yàn)人員，也積累了一些經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

中國援建尼日爾綜合示范醫(yī)院2020年7月-12月就診病例300 例，其血常規(guī)結(jié)果均出現(xiàn)異常報(bào)警信息作為A 組，其中男73 例，女77 例，最大年齡為77歲，最小年齡為2歲，平均年齡（36.62±1.35）歲；另選取血常規(guī)結(jié)果未出現(xiàn)異常報(bào)警信息的150 例作為參照B 組，其中男69 例，女81 例，最大年齡為75歲，最小年齡為2歲，平均（36.69±1.25）歲；兩組觀察對象年齡等資料對比并無明顯差異（P ＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均確診；臨床資料完整；均經(jīng)由本院倫理委員會批準(zhǔn)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：排除其他嚴(yán)重感染疾病者；臨床資料不完整者。

1.2 材料

（1）廣東深圳生產(chǎn)的邁瑞Mindray BC-5300 血液分析儀，國械準(zhǔn)字J500124，儀器所需的溶血素、稀釋液以及清洗液均為配套試劑。

（2）南京江南永新光學(xué)有限公司生產(chǎn)BM2000 型光學(xué)顯微鏡，國械準(zhǔn)字J250624。

（3）吉姆薩細(xì)胞染色液 比利時(shí)Cypress Diagnostics 公司生產(chǎn)，2mL，國藥準(zhǔn)字H2018058 。

（4）乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝管。

1.3 方法

采集患者靜脈血2mL 于EDTA 抗凝管中，輕緩搖勻置室溫30分鐘后采用Mindray BC-5300 血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測，觀察檢測結(jié)果報(bào)告，選取白細(xì)胞散點(diǎn)圖有異常表達(dá)或結(jié)果有問號等異常報(bào)警信息的樣本，取抗凝血液作涂片，按國內(nèi)規(guī)范[2]操作，進(jìn)行吉姆薩染色后，用BM2000 型光學(xué)顯微鏡油鏡下觀察瘧原蟲。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用兩組間比較的χ2檢驗(yàn)，P ＜0.05 則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同方式下觀察瘧原蟲結(jié)果

對A、B 兩組患者血液涂片進(jìn)行光學(xué)顯微鏡下瘧原蟲觀察，顯微鏡下觀察到瘧原蟲，結(jié)果為陽性；未觀察到瘧原蟲結(jié)果為陰性，結(jié)果比較如表1。

表1 兩組患者血液涂片顯微鏡下觀察瘧原蟲結(jié)果[n(%)]

2.2 不同方式下觀察瘧原蟲陽性率

A 組顯微鏡下瘧原蟲的檢出陽性率為94.66%，B組顯微鏡下瘧原蟲檢出陽性率為3.33%，P ＜0.05，兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

瘧疾是一種急性發(fā)熱疾病，無免疫力的個(gè)體通常會在受到感染的蚊蟲叮咬10-15 天后顯現(xiàn)癥狀。其中地域因素以及個(gè)人因素是導(dǎo)致患者發(fā)病的主要誘發(fā)因素，一般工作或生活在瘧疾流行地區(qū)的人員更容易患病，而該地區(qū)的患病率也較高，例如在撒哈拉沙漠以南的國家及東南亞等地區(qū)，此外，免疫力低下的幼兒、嬰兒以及老年等人群瘧疾的患病率也相對較高，這可能與該地區(qū)的教育水平、貧困以及衛(wèi)生保健設(shè)施不完善有關(guān)，此外，未正確服用預(yù)防藥物，未采取防蚊蟲叮咬等措施也可能增加瘧疾的感染率。最初癥狀如發(fā)熱、頭痛和寒戰(zhàn)，可能較輕，難以發(fā)現(xiàn)是瘧疾。如果不在24 小時(shí)內(nèi)予以治療，惡性瘧疾可能發(fā)展成嚴(yán)重疾病，往往會致命。患有嚴(yán)重瘧疾的兒童常常出現(xiàn)以下一種或多種病癥：如嚴(yán)重貧血，與代謝性酸中毒相關(guān)的呼吸窘迫，或腦型瘧。成人也頻頻出現(xiàn)多臟器病癥。在瘧疾流行地區(qū)，人們可能產(chǎn)生一定程度的免疫力，導(dǎo)致出現(xiàn)無癥狀感染[1]。瘧疾感染主要分為間日瘧、卵形瘧、三日瘧以及惡性瘧，間日瘧是常見瘧疾，潛伏期一般在13-15 天，瘧疾兩次發(fā)作時(shí)間可間隔在48 小時(shí)左右，因此稱為間日瘧，是最主要的瘧疾流行類型，患病后可見患者出現(xiàn)寒戰(zhàn)、高熱以及大量出汗等癥狀，在對患者治療后的3-6月可能出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)。卵形瘧潛伏期以及間歇期均與間日瘧相同，但該疾病癥狀并不嚴(yán)重，患病率相對少見，且疾病治療后可能出現(xiàn)復(fù)發(fā)，因此需注意區(qū)別間日瘧。三日瘧潛伏期在24-30 天左右，間歇期可達(dá)到3 天，該類疾病較為少見，可出現(xiàn)貧血等多種臨床癥狀，但相對較輕，治療后并不會出現(xiàn)復(fù)發(fā)。惡性瘧可危及到患者的生命安全，潛伏期在7-12 天左右，間歇期為36-48 小時(shí)，臨床癥狀較重，病情均較為兇險(xiǎn)，可在短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)大量血紅蛋白尿從而損傷腎部，引起腎功能急性衰竭，但在患者疾病治療后并不會出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)。

BC-5300型血液細(xì)胞分析儀采用半導(dǎo)體激光系統(tǒng)，通過多角度的激光散射，可以提供細(xì)胞大小、細(xì)胞核和細(xì)胞顆粒的大小及復(fù)雜信息，并且結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)，準(zhǔn)確區(qū)分各類白細(xì)胞，同時(shí)篩選出各類異常細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)更精確的五分類結(jié)果。

在BC-5300 血液細(xì)胞分析儀的結(jié)果報(bào)告中，使白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常的原因大致有“Cellule immature”(未成熟細(xì)胞），“Décalage gauche”(核左移）“Décalage droite”(核右移），“Monocytone”(單核細(xì)胞增多），“Neutrophilie”(中性粒細(xì)胞增多)，“Lym anormal/atypique”(異常淋巴細(xì)胞)等。瘧色素是一種雙折光晶體，使檢測內(nèi)容物的側(cè)向散射光強(qiáng)度和角度發(fā)生改變，在BC5300 血液細(xì)胞分析儀的DIFF 通道中，可溶解紅細(xì)胞和血小板，并對嗜酸性粒細(xì)胞進(jìn)行特異性染色，通過激光散射和流式細(xì)胞檢測，可將血細(xì)胞進(jìn)行分群[4-5]。當(dāng)細(xì)胞亞群之間邊界不清，邊界顆粒達(dá)到一定數(shù)量觸發(fā)規(guī)則發(fā)現(xiàn)白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常，儀器因此未能做白細(xì)胞正確分類而出現(xiàn)報(bào)警信息[6-7]。

B 組150 份血液常規(guī)結(jié)果的報(bào)告單都沒有出現(xiàn)白細(xì)胞散點(diǎn)圖異常及相關(guān)的報(bào)警信息，經(jīng)過血液涂片、染色、顯微鏡下仍然找到5 例瘧原蟲感染，陽性率為3.33%。這有可能是由于患者處于感染瘧疾的早期，瘧原蟲感染紅細(xì)胞密度低，或者樣本采集時(shí)間不當(dāng)所致[8-9]。因此，完全依靠血液細(xì)胞分析儀的散點(diǎn)圖和報(bào)警信息來判斷患者是否感染瘧原蟲會存在漏診現(xiàn)象[10-11]。

目前最經(jīng)濟(jì)、有效且易于操作的瘧疾實(shí)驗(yàn)室診斷方法仍是血涂片染色鏡檢法，被認(rèn)為是金標(biāo)準(zhǔn)[12-13]。雖然血細(xì)胞分析儀并非篩檢瘧原蟲感染的專用儀器，也不能僅僅根據(jù)儀器測定數(shù)據(jù)和散點(diǎn)圖形來確認(rèn)瘧原蟲感染[14]，但是通過對BC-5300 血液細(xì)胞分析儀血常規(guī)結(jié)果的散點(diǎn)圖與報(bào)警信息的分析，可以對相應(yīng)的樣本進(jìn)行涂片、染色、鏡檢，能夠快速給臨床醫(yī)生提供診斷瘧疾作出參考意見。

實(shí)現(xiàn)瘧疾消除的關(guān)鍵是及時(shí)發(fā)現(xiàn)每個(gè)傳染源，并采取有效措施阻斷其可能造成的傳播[15]。在瘧疾高流行的尼日爾共和國，在相對落后的醫(yī)療條件下，對BC5300 血細(xì)胞分析儀的異常結(jié)果進(jìn)行分析聯(lián)合血涂片染色鏡檢對瘧疾進(jìn)行快速、及時(shí)地篩查與診斷具有一定的價(jià)值，在援外醫(yī)療的具體工作中值得推廣。