滋膵通脈飲對2型糖尿病大鼠糖脂代謝和胰島素抵抗的影響▲

吳剛強 毛 葉 溫小鳳 譚 軍 卜獻春

(湖南省中醫藥研究院附屬醫院內分泌老年病科，長沙市 410006,電子郵箱：wugq2011@126.com)

近年來，隨著人們生活水平的提高和飲食結構的改變，糖尿病的發病率呈現逐年上升的趨勢[1]。目前現代醫學對糖尿病的研究取得了較大進展，胰島素抵抗仍然被認為是2型糖尿病發病的中心環節。近年來，西醫的新藥物的不斷研發使得2型糖尿病的治療出現了新的轉機，但由于其副作用大、價格昂貴、容易引起低血糖反應、不易操作等特點，限制了其廣泛應用。最近研究表明[2]，中醫藥治療2型糖尿病取得了較好的成果，在增強療效、緩解癥狀、改善患者的生活質量、延長壽命、減少不良反應等方面顯示了較大的優勢。滋膵通脈飲為本院卜獻春主任醫師經驗方，前期臨床研究顯示[3]，該方治療糖尿病患者療效確切，不僅能降低血糖和超敏C反應蛋白水平，而且還能改善胰島素抵抗。本研究采用高脂飼料飲食加注射鏈脲佐菌素的方法建立2型糖尿病大鼠模型，探討滋膵通脈飲降低血脂血糖和改善胰島素抵抗的效果，為臨床研究提供依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 45只清潔級SD大鼠，體重200～220 g，由湖南中醫藥大學實驗動物中心提供，許可證號SCXK(湘)2016-0002～2019-0004，常規條件飼養，室溫20℃～27℃，濕度50%～60%。

1.2 動物造模 45只大鼠適應性喂養1周后按體重編號，采用隨機數字表法隨機抽取10只作為空白對照組，給予普通飼料喂養。剩余35只給予高脂飼料飲食(豬油10%、膽固醇2%、膽酸鹽0.5%、蔗糖20%、普通飼料67.5%)，連續喂養4周，建立胰島素抵抗模型。隨后給予大鼠隔夜禁食(不禁水)12 h以上，將鏈脲佐菌素(上海阿拉丁生化科技股份有限公司)溶入配好的0.1 mmol/L檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液(pH=4.3)中，將其以30 mg/kg注入大鼠腹腔內，單次注射，建立2型糖尿病大鼠模型，而空白對照組給予腹腔注射等量(0.1 mmol/L)檸檬酸-檸檬酸三鈉緩沖液。造模3 d后大鼠禁食(不禁水)8 h以上，檢測空腹血糖，若空腹血糖>11.1 mmol/L為模型制備成功[4]。造模過程中大鼠死亡4只，最終造模成功31只。造模成功后再繼續給予大鼠高脂飼養2周以強化胰島素抵抗模型[5]。

1.3 藥物 (1)滋膵通脈飲：由湖南省中醫藥研究院附屬醫院藥劑科生產，主要由黃芪、生地、麥冬、玄參、山茱萸、天花粉、地龍、生蒲黃、丹參、川芎、鬼箭羽、全蝎、水蛭、僵蠶、山楂等藥物組成。將上述藥物按照適當比例配置，加水提取2次。一煎加8倍量水提取1.5 h；二煎加6倍量水提取1 h；合并提取液，過濾，濃縮，微波真空干燥制成干浸膏，粉碎制粒，加適量糊精，制成顆粒劑，60℃以下干燥整粒成成品，4℃冰箱中保存備用。(2)羅格列酮片：生產企業為葛蘭素史克(天津)有限公司，國藥準字20H450072，規格4 mg/片。

1.4 動物分組和給藥 采用隨機數字表，從造模成功的大鼠中隨機抽取30只，并分為模型組、滋膵通脈飲組和羅格列酮組，每組10只。于實驗第7周開始灌胃給藥，滋膵通脈飲組灌服滋膵通脈飲，生藥量為17.6 g/kg；羅格列酮組灌服羅格列酮混懸液(灌胃前將其碾碎，用生理鹽水配置成羅格列酮混懸液)按0.42 mg/(kg·d)給藥；空白對照組和模型組均灌服同等體積的蒸餾水。各組均每天上午灌胃，1次/d，共用藥4周。以上計量均按60 kg成人體表面積換算，灌胃容量為10 mL/kg體重。

1.5 觀察指標 用藥4周后，大鼠尾靜脈采血1 mL，室溫血液自然凝固10～20 min后，離心20 min左右(2 000～3 000 r/min)，收集上清。檢測血清膽固醇、三酰甘油、LDL水平，以及空腹血糖、空腹胰島素，計算穩態模型胰島素抵抗(homeostasis model assessment for insulin resistance,HOMA-IR)指數[(空腹血糖×空腹胰島素)/22.5]。血清膽固醇、三酰甘油酶聯免疫分析檢測試劑盒均由Sigma公司生產(商品編號：M3128、T740-5g)，LDL酶聯免疫分析檢測試劑盒由Abcam公司生產(商品編號：Ab3107)，大鼠胰島素酶聯免疫分析試劑盒購自上海信帆生物科技有限公司(規格96T)，血糖儀購自三諾生物傳感股份有限公司。

1.6 統計學分析 采用SPSS 16.0軟件進行統計分析。計量資料以(x±s)表示，組間比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD-t法或Dunnett法。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 4組大鼠空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR指數比較 與空白對照組比較，其他各組空腹血糖、空腹胰島素水平和HOMA-IR指數均升高(均P<0.05)；與模型組比較，滋膵通脈飲組和羅格列酮組空腹血糖、空腹胰島素水平和HOMA-IR指數降低(均P<0.05)；而滋膵通脈飲組和羅格列酮組之間以上指標差異無統計學意義(均P>0.05)。見表1。

表1 4組大鼠空腹血糖、空腹胰島素、HOMA-IR指數比較(x±s)

2.2 4組大鼠血脂水平比較 與空白對照組比較，其他各組膽固醇、三酰甘油和LDL水平升高(均P<0.05)；滋膵通脈飲組膽固醇、三酰甘油和LDL水平均低于模型組(均P<0.05)，而羅格列酮組和模型組以上指標差異無統計學意義(均P>0.05)；滋膵通脈飲組三酰甘油水平低于羅格列酮組(P<0.05)。見表2。

表2 4組大鼠血脂水平比較(x±s，mmol/L)

3 討 論

糖尿病是一種以慢性高血糖為特點的代謝紊亂。近年來，胰島素抵抗是2型糖尿病及多種代謝性疾病發生和發展的中心環節。而胰島素在體內對血糖起著負向調節作用，在正常情況下其隨著血糖的波動而有一定的起伏。胰島素增敏劑羅格列酮是治療糖尿病的一種藥物，它通過增加胰島素的敏感性而降低血糖，對于胰島素抵抗的2型糖尿病患者有一定療效。本研究結果顯示，羅格列酮組大鼠空腹血糖、空腹胰島素水平和HOMA-IR指數均低于模型組(均P<0.05)，說明其對血糖和胰島素的調節均有一定的作用。但該藥副作用大，易導致水鈉潴留、骨折、增加體重、加重心衰，限制了其臨床的廣泛應用。最近研究表明，中醫藥治療2型糖尿病療效確切，不僅能降低血糖、改善胰島素抵抗，而且還能減少炎癥反應，調節血脂代謝紊亂，且副作用少，療效確切[6-8]。

滋膵通脈飲方系《醫學衷中參西錄》“滋膵飲”加活血通絡藥物組成。方中生地、麥冬、玄參、山茱萸、天花粉可以滋養五臟之陰，生津潤燥，現代藥理研究顯示，山茱萸的有效成分山茱萸總萜能調節糖尿病小鼠體內糖脂代謝過程，對糖尿病有治療作用[9]。玄參的有效成分玄參多糖對糖尿病大鼠有明顯的降低血糖作用[10]。方中丹參、川芎、生蒲黃、地龍、水蛭、鬼箭羽均可活血化瘀，其中鬼箭羽具有降糖、降脂、保護心腦血管作用[11]；丹參提取物丹參多酚酸鹽能降低糖尿病患者血糖，發揮血管保護作用，改善血管內皮功能[12]。黃芪可以益氣升陽，助主藥活血通絡；佐以僵蠶、全蝎息風通絡，山楂消食活血，同時防止滋陰活血藥物礙胃。研究顯示，山楂的有效成分山楂葉總黃酮有明顯降低糖尿病大鼠血脂血糖的作用，而且還能改善糖尿病大鼠的抗氧化能力[13]。全方具有益氣養陰、活血通絡之效。前期臨床研究表明，滋膵通脈飲不僅有明顯的降糖、降脂作用，而且治療糖尿病性冠心病療效顯著，能降低患者血液黏稠度、改善胰島素抵抗和臨床癥狀[14-15]。本研究結果顯示，滋膵通脈飲組的空腹血糖、空腹胰島素和HOMA-IR指數均低于模型組(P<0.05)，但與羅格列酮組比較差異無統計學意義(P>0.05)，提示中藥滋膵通脈飲能降低血糖、改善胰島素抵抗，且療效與羅格列酮相當。此外，滋膵通脈飲組膽固醇、三酰甘油和LDL水平均低于模型組(均P<0.05)，且三酰甘油水平均低于羅格列酮組(P<0.05)，這與上述研究結果[14-15]相似，表明滋膵通脈飲還能降低糖尿病大鼠血脂水平，調節血脂代謝紊亂，且其療效明顯優于羅格列酮。

綜上所述，滋膵通脈飲不僅能降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、改善胰島素抵抗，還能調節血脂紊亂，至于其改善胰島素抵抗的具體機理還需要進一步探討。