咳寧糖漿的薄層色譜鑒別研究

曹鈴鈴

（江蘇省南通市通州區中醫院藥劑科，江蘇 南通 226300）

咳寧糖漿是由重樓、大青葉、枳殼、黃芪等11味中藥組成的復方制劑，具有清熱益氣、宣肺化痰的功效，主治風熱犯肺癥，多用于治療急慢性支氣管炎和支氣管哮喘，尤其適用于反復發作、遷延不愈的頑固性咳嗽，臨床療效確切。重樓、枳殼、黃芪三味藥材是咳寧糖漿組方中的君藥，其成分含量與藥材質量對制劑的療效有著直接影響。為控制咳寧糖漿產品質量，筆者參考《中國藥典》（2010版）關于三味藥材或飲片的薄層色譜鑒別方法[1]，以及含有這三味藥材的中成藥制劑對藥材的鑒別方法，建立簡單易行、專屬性強的薄層色譜法對三味藥材進行定性鑒別。經反復試驗，增加了重樓、枳殼、黃芪的薄層色譜鑒別，并對其陰性對照進行了薄層色譜鑒別的研究，效果滿意，現報道如下。

1 儀器與試藥

儀器：瑞士GAMAG薄層色譜數碼成像系統，型號：TLC Visualizer；賽多利斯 BS110S電子天平，精度0.0000g；上海KZW-G型恒溫不銹鋼水浴鍋；昆山舒美KQ-250B型超聲波清洗機，超聲頻率20～40 KHz。

試藥：咳寧糖漿（批號：140825、140902、140903）及陰性對照，均由通州區中醫院提供；重樓對照藥材（121157-200402），購自于中國食品藥品檢定研究院；枳殼對照藥材（120981-200403），購自于中國食品藥品檢定研究院；黃芪甲苷（110781-200613），購自于中國食品藥品檢定研究院。

試劑：硅膠G薄層板，產自青島海洋化工廠；乙腈為色譜純試劑；其他試劑均為分析純。

2 方 法

2.1 重樓的薄層色譜鑒別

取咳寧糖漿20 ml，加入30 ml水飽和正丁醇液（混合比1:1）振搖提取，重復操作2次，將2次振搖提取的正丁醇溶液合并，加入氨試液20 ml洗滌，重復操作2次后，棄去氨試液，蒸干正丁醇液，取殘渣以1 ml甲醇溶解，作為供試品溶液。另取重樓對照藥材1 g，加水50 ml煎煮30 min，濾過取液，濃縮至20 ml，加30 ml水飽和的正丁醇溶液，同法制成對照藥材溶液。

取一張硅膠G薄層板，上面分別點上供試品溶液、對照藥材溶液各5 μ1，操作參照《中國藥典》（2010版附錄Ⅵ B）[2]，展開劑為三氯甲烷-甲醇-水下層液，成分比15:5:1。樣本常規展開、取出、晾干后，表面噴10%硫酸乙醇溶液，在烘箱105℃加熱至斑點清晰顯色，分別在日光下和紫外光燈下進行檢視，紫外線波長365 nm。供試品色譜中與對照藥材色譜相應的位置上，是相同顏色的斑點或熒光斑點。

2.2 枳殼的薄層色譜鑒別

取咳寧糖漿用乙酸乙酯振搖提取，除此之外，供試品溶液與對照藥材溶液的制作方法同重樓一致。同法依照《中國藥典》，分別在硅膠G薄層板上滴加枳殼供試品溶液5 μl、對照藥材溶液10 μl，成分比100:17:13。展開約5 cm后，取出晾干，再次使用展開劑甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水上層液展開，展開劑成分比20:10:1:1。再次取出后晾干，表面噴三氯化鋁試液，熱風吹干后，365 nm波長紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，呈相同顏色的熒光斑點。

2.3 黃芪的薄層色譜鑒別

取本品20 ml，用水飽和正丁醇振搖提取二次，每次30 ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌二次，每次40 ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干黃芪取用量、振搖提取方法、洗滌與蒸干方法等同重樓，殘渣加水5 ml溶解后，通過D101型大孔吸附樹脂柱，樹脂柱參數：直徑1.5 cm，高1.2 dm。依次使用水50 ml洗脫、稀乙醇50 ml、70%乙醇50 ml洗脫樣本，收集洗脫液，蒸干后殘渣加甲醇1 ml溶解，制成供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加入甲醇制成比例為1 ml:1 mg的對照品溶液。同法硅膠G玻板上滴加兩種溶液各5 μ1，以三氯甲烷-甲醇-水下層液為展開劑，成分比13:7:2，放置溫度10℃。展開后取出晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱顯色后日光和紫外線下檢視，具體同重樓測定操作一致，其供試品色譜斑點的位置與顏色顯示情況也同重樓。

2.4 觀察指標

獲取薄層鑒別色譜圖，觀察不同批次樣本重樓、枳殼、黃芪三味藥材與對照藥材的斑點情況，驗證專屬性。

3 結 果

咳寧糖漿組方中重樓的薄層色譜鑒別色譜圖見圖1，發現不同批次的樣本均檢出與重樓對照藥材相對應的斑點，而缺重樓的陰性對照在相同位置未檢出斑點，說明陰性對照無干擾，方法的專屬性較好。枳殼的薄層色譜鑒別圖見圖2，發現不同批次的樣品均檢出對照品斑點，且與枳殼對照藥材相應的位置有相同的熒光斑點，缺枳殼的陰性對照無干擾，說明方法的專屬性較好。此外，黃芪的薄層色譜鑒別圖上也可見不同批次的咳寧糖漿均檢出與黃芪甲苷對照品相對應的斑點，陰性無干擾，說明該薄層鑒別方法的專屬性比較好。

圖1 重樓薄層色譜鑒別圖

圖2 枳殼薄層色譜鑒別圖

4 討 論

薄層色譜法利用不同成分對吸附劑吸附能力的差異進行成分分離，根據比移值與對照物按同法所得色譜圖比移值進行對比，來鑒別藥品、檢查雜志或測定含量[3]。此法具有操作簡單、分離能力強、展開時間短、顯色方便、斑點集中、色譜直觀性強的技術特點和優勢[4]，可以快速分離和定性分析少量物質，靈敏度高，在藥品純度檢測與質量控制方面發揮著重要作用[5]。本研究采用此法對我院自制咳寧糖漿中的三味君藥進行定性鑒別，結果示專屬性強，重現性好，且無陰性干擾，提示用該制劑質量控制有效可行，對我院自制制劑質量標準提高起到積極地推動作用，有利于確保臨床用藥安全與有效，值得推廣使用。