生產(chǎn)工藝對補腎活血膏組方成份影響的研究

董曉蕊

摘要：目的：以補骨脂素、異補骨脂素為指標(biāo)成分，分別從煎煮時間、煎煮次數(shù)對補腎活血膏中主要成分含量的影響進行考察，為后期補腎活血膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定奠定基礎(chǔ)。方法：以高效液相色譜法測定補骨脂素、異補骨脂素含量。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-水（55：45）為流動相;檢測波長為246nm;流速為1ml/min;柱溫30℃;進樣量為10μl。結(jié)果：通過對比各實驗項下出膏率、相對密度及補骨脂素和異補骨脂素含量測定結(jié)果，初步確定補腎活血膏提取工藝為浸泡12小時，煎煮3次，第一次1h，第二次45min，第三次45min。

關(guān)鍵詞：補腎活血膏;提取工藝;補骨脂

補腎活血膏方是青海省中醫(yī)院肺病科專科用藥，用于慢性阻塞性肺疾病（COPD）穩(wěn)定期的治療，在臨床已有多年使用歷史。補腎活血膏由炙補骨脂、黨參、黃芪、骨碎補等27味中藥組成，具有扶正固本，祛痰逐瘀，活血通脈的作用，在減輕慢性阻塞性肺疾病的臨床癥狀，遏制病情的發(fā)展，提高患者的生存質(zhì)量方面發(fā)揮著積極的作用。

1含量測定

1.1儀器與試藥

XS105DU電子天平（上海梅特勒有限公司）;BSA224S-CW電子天平（賽多利斯有限公司）;Waters2695高效液相色譜儀;Milli-Q Advantage A10超純水儀（默克密理博）。

補腎活血膏（批號0826-1、0826-2、0826-3）;補骨脂素對照品（批號21010802：，含量以99.99%計）;異補骨脂素對照品（批號19101704：，含量以99.31%計）;對照品均購自成都格利普生物科技有限公司。試劑均為色譜純，水為超純水。

1.2色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水（55：45）為流動相;檢測波長為246nm;[1]流速為1ml/min;柱溫30℃;進樣量為10μl。

1.3對照品溶液的制備

補骨脂素對照品（批號21010802：，含量以99.99%計）5.52mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻;異補骨脂素對照品（批號19101704：，含量以99.31%計）5.36mg，置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻;分別精密量取補骨脂素對照品母液、異補骨脂素對照品母液各1ml，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得。

1.4供試品溶液的制備

精密量取補腎活血膏方濃縮液50ml，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流2小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2炙補骨脂陰性補腎活血膏的制備

由于補腎活血膏方中阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉均在收膏時加入，黃酒用于膠類的烊化，均不在本次實驗的考察范圍內(nèi)，因此在制備供試品補腎活血膏（陰性對照）時將上述細(xì)料藥剔除。

2.1制備方法 ?精密稱取除炙補骨脂、阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉外其它處方中藥飲片1份，加水浸泡12小時，煎煮60min，提取液趁熱濾過，濾液濃縮至600ml。

3單因素考察

3.1浸泡時間

3.1.1浸泡方法 ?由于補腎活血膏方中阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉均在收膏時加入，黃酒用于膠類的烊化，均不在本次實驗的考察范圍內(nèi)，因此在制備供試品補腎活血膏時將上述細(xì)料藥剔除。

精密稱取除阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉外其它處方中藥飲片3份，加入8倍量的水，分別浸泡6小時、12小時、15小時，過濾，計算飲片吸水率，結(jié)果見表1。

3.1.2結(jié)論  表1實驗數(shù)據(jù)顯示，浸泡時間越長，飲片吸水率越大，但浸泡12小時與浸泡15小時時，吸水率變化不大，綜合考慮，選擇浸泡時間為12小時。

3.2煎煮次數(shù)

3.2.1煎煮方法 ?由于補腎活血膏方中阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉均在收膏時加入，黃酒用于膠類的烊化，均不在本次實驗的考察范圍內(nèi)，因此在制備供試品補腎活血膏時將上述細(xì)料藥剔除。

精密稱取除阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉外其它處方中藥飲片4份，加水浸泡12小時，再加入5 倍量的水，分別提取1、2、3、4次，每次1小時，提取液液趁熱濾過，濾液濃縮至600ml。

3.2.2出膏率

精密稱取上述補腎活血膏濃縮液各30ml，置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，105℃干燥3h至恒重，置干燥器中冷卻30min，精密稱定重量，計算出膏率，結(jié)果見表2。

3.2.3相對密度

照《中國藥典》2020版四部通則0601相對密度測定法中的比重瓶法進行測定，結(jié)果見表2。

3.2.4含量測定

照“1含量測定”下方法進行含量測定，結(jié)果見表3。

3.2.5結(jié)論 ?綜合上述實驗結(jié)果，煎煮2次時，出膏率和相對密度均變化較明顯，煎煮3、4次時，出膏率與相對密度變化不大。進行含量測定時，煎煮3次時補骨脂素和異補骨脂素含量明顯增加，煎煮4次時，含量基本無變化。綜合考慮，選擇煎煮次數(shù)為3次。

3.3煎煮時間

3.3.1煎煮方法 ?由于補腎活血膏方中阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車

精密稱取除阿膠、鹿角膠、龜板膠、紫河車粉外其它處方中藥飲片4份，加水浸泡12小時，再加入5倍量的水，分別提取60min、120min、150min、200min，提取液趁熱濾過，濾液濃縮至600ml。

3.3.2出膏率

精密稱取上述補腎活血膏濃縮液各30ml，置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，105℃干燥3h至恒重，置干燥器中冷卻30min，精密稱定重量，計算出膏率，結(jié)果見表4。

3.3.3相對密度

照《中國藥典》2020版四部通則0601相對密度測定法中的比重瓶法進行測定，結(jié)果見表4。

3.3.4含量測定

照“1含量測定”下方法進行含量測定，結(jié)果見表5。

3.3.5結(jié)論 ?綜合上述實驗結(jié)果，煎煮時間大于120分鐘時，出膏率與相對密度明顯增加，之后基本不變，但在含量測定時，煎煮150分鐘時補骨脂素和異補骨脂素含量最高，煎煮200分鐘時變化不明顯。因此，選擇煎煮時間為150min。

4 綜合上述實驗結(jié)果，結(jié)合實際制劑生產(chǎn)經(jīng)驗，對補腎活血膏的生產(chǎn)工藝進行優(yōu)化，選擇加水量為5倍，浸泡12h，煎煮3次，第一次1h，第二次45min，第三次45min。

參考文獻：

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2020年版（一部）[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020：195

[2]呂天璞、張水定.從脾肺腎論治慢性阻塞性肺病緩解期[J].中國保健營養(yǎng)，2016，05：42