混合型母源16號染色體單親二體與胎兒生長受限

王曄 紀媛君 周祎

(中山大學附屬第一醫(yī)院 產(chǎn)科，廣東 廣州 510080)

單親二體(uniparental disomy，UPD)是指個體的一對同源染色體上的部分片段或者整條均來源于雙親中的一方，而沒有另一方染色體的存在。三體細胞自救和單體細胞的自身復制(單體自救)都可以產(chǎn)生單親二體。UPD從形成機制來分主要分為單親同二體(isodisomy，iUPD)及單親異二體(heterodisomy，hUPD)及混合型3種。早期的研究表明UPD的發(fā)生率約為1/3500～1/5000[1]，最近Nakka團隊[2]對440多萬份樣本研究后發(fā)現(xiàn)，UPD在活產(chǎn)兒中的發(fā)生率可達1/2000。許多疑似遺傳原因的胎兒和新生兒患者，經(jīng)過常規(guī)臨床實踐的工作流程，如表型鑒別、影像學檢查和生化檢查，甚至病理活檢檢查，最終都不能得到明確的診斷。未確診的患者可能會錯過潛在的治療，以及無法評估后續(xù)妊娠的復發(fā)風險，這對家庭和我們的醫(yī)療系統(tǒng)都意味著巨大的負擔。隨著近年來染色體微陣列分析技術(chromosomal microarray analysis，CMA)在產(chǎn)前診斷領域的廣泛使用，其對于染色體微缺失、微重復，特別是單親二體等異常的檢測，已經(jīng)被證明是一種準確有效的診斷方法，也大大提高了UPD在產(chǎn)前胎兒中的檢出率[3, 4]，使我們對于UPD在胎兒期的臨床表現(xiàn)有了更多的認識。

目前明確涉及印記疾病的染色體有6、7、11、14、15、20號染色體[5]，此外，關于母源性UPD(16)的臨床效應也有部分文獻報道。在報道的為數(shù)不多的文獻中，母源性UPD(16)的臨床效應尚存爭議，其中少部分病例表型完全正常，多數(shù)病例會出現(xiàn)胎兒生長受限(fetal growth restriction，F(xiàn)GR)，少部分伴有其他系統(tǒng)結構畸形，但涉及的結構畸形不存在特異性[6-10]。因此母源性UPD(16)本身和FGR的關聯(lián)目前還無法得到明確的結論。我們國內(nèi)的研究人員也曾經(jīng)報道過幾個母源性UPD(16)的病例[11, 12]，認為它和FGR的發(fā)生存在關聯(lián)，但是他們并沒有對胎盤進行檢測來排除胎盤異常而引起FGR的可能性。

本研究中我們對2例早發(fā)型FGR的胎兒進行了遺傳學相關檢測。結果顯示，2例胎兒的染色體核型為正常，染色體微陣列分析結果提示存在16號染色體末端的純合區(qū)域(region of homozygosity，ROH)，長度分別為6.97Mb(位于16p13.3)和16.42Mb(位于16q22.3q24.3)。然后對父母進行分析后確定這2例胎兒為單親同二體和單親異二體的混合型母源UPD(16)。最后通過熒光原位雜交技術(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH)對其中1例胎兒胎盤3個部位取樣的胎盤絨毛細胞檢測，結果發(fā)現(xiàn)3處組織中95%以上的細胞為16號染色體三體，證實為限制性胎盤嵌合體。我們進一步探索母源性UPD(16)和FGR的關聯(lián)，推測母源性16號染色體單親二體和胎兒生長受限表型的直接關聯(lián)尚不明確。我們的研究為理解16號染色體單親二體對胎兒和胎盤的臨床效應提供了新數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象 2名孕婦均為2019年在中山大學附屬第一醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心就診的病人，懷孕期間一直在我中心規(guī)律產(chǎn)檢。2對夫妻均為中國漢族人，自述身體健康，個人無不良生活習慣，孕期前后未接觸明顯化工及其他有毒有害物質(zhì)。胎兒父母非近親結婚。本研究經(jīng)患者及其家屬同意，并獲得中山大學附屬第一醫(yī)院倫理委員會的批準。2例病例的詳細臨床情況描述如下。

1.1.1 病例1 孕婦29歲，丈夫31歲，孕1產(chǎn)0，月經(jīng)規(guī)律，周期30d，停經(jīng)8+6周時超聲檢測提示“宮內(nèi)妊娠8+周，胚胎存活”。停經(jīng)12+周時超聲檢測提示胎兒大小和孕周相符。停經(jīng)20+4周時超聲檢測提示“雙頂徑47mm，頭圍168mm，腹圍138mm，股骨長28mm，胎兒估重267g，胎兒大小相當于19+周”，臍動脈S/D4.11，腹圍、股骨長及胎兒體質(zhì)量估計均小于正常孕齡的第十位百分數(shù)。停經(jīng)22+3周時超聲檢測提示“雙頂徑54mm，頭圍188mm，腹圍152mm，股骨長33mm，胎兒估重355g，胎兒大小相當于21周”，臍動脈S/D 4.68，PI 1.29，MCA-PSV 36.6cm/s, PI 1.22；頭圍、股骨長、腹圍及胎兒體質(zhì)量估計均小于正常孕齡的第十位百分數(shù)，診斷為早發(fā)型FGR”。孕婦CMV、RV、TOX IgM均為陰性。Acl的IgA、IgG、IgM均為陰性，自身免疫相關抗體ANA、ds-DNA、SS-A、SS-B均為陰性。孕婦未合并糖尿病、高血壓等疾病，未行無創(chuàng)產(chǎn)前檢測(non-invasive prenatal testing，NIPT)。停經(jīng)23+3周時因早發(fā)型FGR行產(chǎn)前診斷羊水細胞學檢查，G顯帶核型分析顯示核型為46,XN。進一步用CMA技術對羊水細胞進行遺傳學分析。結果顯示16號染色體短臂末端存在染色體純合區(qū)域．具體位置是16p13.3區(qū)段，長度約為6.97Mb(見圖1A)。抽取父母外周血進行家系分析后確認胎兒16號染色體為混合型母源性單親二體，給該夫妻進行了詳盡的遺傳咨詢后，夫妻要求終止妊娠。孕婦于27+4周行利凡諾引產(chǎn)，經(jīng)孕婦知情同意引產(chǎn)時取胎盤3處樣本行FISH檢測16號染色體數(shù)目情況，引產(chǎn)兒未發(fā)現(xiàn)明顯的結構畸形。大體病理提示胎盤大小12cm×10cm×1.5cm，鏡下病理提示胎盤見灶性鈣化，胎膜未見明顯炎癥細胞浸潤。

1.1.2 病例2 孕婦33歲，丈夫31歲，孕1產(chǎn)0，月經(jīng)規(guī)律，周期28d，停經(jīng)8+4周時超聲檢測提示“宮內(nèi)妊娠8+周，胚胎存活”。停經(jīng)13+2周時超聲檢測提示胎兒宮內(nèi)妊娠12+1周。早孕期血清學篩查結果提示唐氏綜合征高風險，風險率為1∶32；18號染色體三體高風險，風險率為1∶6。NIPT提示非整倍體均未低風險。孕16+2周時超聲檢測提示“雙頂徑28mm，頭圍109mm，腹圍77mm，股骨長16mm，胎兒估重98g，胎兒大小相當于14+4周”，臍動脈舒張末期血流信號消失，雙頂徑、頭圍、腹圍、股骨長及胎兒體質(zhì)量估計均小于正常孕齡的第十位百分數(shù)，診斷為“早發(fā)型FGR”。孕婦未合并糖尿病、高血壓等疾病，未行感染、免疫相關檢查。孕17+3周時因“早發(fā)型FGR、唐篩高風險”行產(chǎn)前診斷羊水細胞學檢查，G顯帶核型分析顯示核型為46,XN。進一步用CMA技術對羊水細胞進行遺傳學分析．結果顯示16號染色體長臂末端存在染色體純合區(qū)域．具體位置是16q22.3q24.3區(qū)段，長度約為16.42Mb(圖1B)。抽取父母外周血進行家系分析后確認胎兒16號染色體為混合型母源性UPD，給該對夫妻進行了詳盡的遺傳咨詢后，夫妻選擇終止妊娠。孕婦于20+5周行利凡諾引產(chǎn)，拒絕對胎盤做進一步遺傳學分析，引產(chǎn)兒未發(fā)現(xiàn)明顯的結構畸形。大體病理提示胎盤大小11.5cm×8cm×2.5cm，鏡下病理提示胎盤內(nèi)未見明顯鈣化，胎膜內(nèi)見較多中性粒細胞浸潤，其余未見異常。

1.2 標本采集 經(jīng)過知情同意，母親在超聲引導下進行羊膜腔穿刺抽取羊水，抽取孕婦羊水20ml，其中10ml接種羊水培養(yǎng)基培養(yǎng)后，按本科室常規(guī)制成G顯帶染色體玻片標本；10ml用于提取基因組DNA進行染色體微陣列分析。抽取孕婦和丈夫外周血3ml用于提取基因組DNA進行染色體微陣列分析，對16號染色體純合區(qū)域行家系分析。采用QIAGEN 的QIAamp DNA Mini kit提取DNA試劑盒提取外周血和羊水的DNA。操作過程按照試劑盒說明書進行。提取的DNA于-20℃保存待檢。

1.3 方法

1.3.1 染色體核型分析 無菌環(huán)境下將羊水離心棄上清，保留管中約0.5ml羊水細胞層，滴管打均勻后分別接種至2個50ml培養(yǎng)瓶底部，再沿著培養(yǎng)瓶邊緣注入3.5～4.5ml的2種不同的羊水培養(yǎng)液，37℃ 5% CO2恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。6～7d后更換培養(yǎng)液，并在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，在瓶底出現(xiàn)若干形態(tài)較好的梭形克隆，傳代后繼續(xù)培養(yǎng)并持續(xù)觀察，在合適時終止培養(yǎng)。加入50μg/ml秋水仙素，繼續(xù)培養(yǎng)2.5h，將培養(yǎng)的細胞懸液2000 r/min(r=12cm)室溫離心，分離的細胞加入0.075mol/L KCl低滲固定，胰蛋白酶消化及Giemsa 染色，染色體片經(jīng)G顯帶，進行細胞遺傳學分析，每個樣本計數(shù)20個分裂相，至少分析5個分裂相。按細胞遺傳學命名國際體制(International system for cytogenetics nomenclature 2016，ISCN 2016)進行染色體核型分析和命名。

1.3.2 染色體微陣列分析技術 應用Qiagen Blood DNA mini kit提取外周血基因組DNA， 選用CytoScanTM HD (Affymetrix，USA)芯片，包含約270萬個標志物，同時涵蓋SNP標志物約75 萬個及非多態(tài)性標志物約195萬個，按Affymetrix 提供的操作手冊， 進行限制性酶消化、連接、PCR擴增反應、PCR產(chǎn)物檢測、PCR產(chǎn)物純化、純化產(chǎn)物定量、片段化、片段化產(chǎn)物標記、雜交、洗滌、染色和掃描， 然后用Chromosome Analysis Suite (ChAS) 軟件行全基因組拷貝數(shù)分析。選擇大于100 kb 且大于50個以上連續(xù)可信探針的拷貝數(shù)變異(copy number variation，CNV)區(qū)域，依據(jù)美國醫(yī)學遺傳學和基因組學會(American College of Medical Genetics and Genomics，ACMG)指南對數(shù)據(jù)的臨床意義解讀分為5類：致病性、可能致病性、臨床意義不明、可能良性以及良性變異；對于SNP探針提示的ROH區(qū)域，選擇大于10Mb的片段或者大于5Mb位于染色體末端的片段。常用參考的患者數(shù)據(jù)庫包括但不限于ClinVar、DECIPHER、OMIM、GeneReview、UCSC、基因變異的數(shù)據(jù)庫(Database of Genomic Variants，DGV)，并通過PubMed等文獻搜索對檢出的CNV進行分析。對于檢測到的ROH，使用UPDtool來進行胎兒該區(qū)域的親緣鑒定和UPD來源區(qū)分[13]。

1.3.3 熒光原位雜交 引產(chǎn)胎兒的胎盤去除蛻膜后用生理鹽水清洗干凈，在胎兒面胎盤絨毛取三個部位進行熒光原位雜交分析。將制備完成的細胞片于60 ℃烤20～30min，2 ×SSC 中浸泡5min，然后向雜交區(qū)域加入10μl配好的探針，加蓋玻片(20mm×20mm)，封片膠封固。于雜交儀上進行變性和雜交。雜交完成后去除封片膠并移去蓋玻片，于73℃預熱的0.3%NP40/1×SSC 溶液中孵育2min，室溫0.1%NP40 /2 ×SSC 中處理2 min，使用75%、85%、95%乙醇各依次處理1min后室溫晾干，加10μL 4’,6-二脒基-2-苯基吲哚復染液，室溫10min 后鏡下觀察分析結果。用OLYMPUS BX51熒光顯微鏡下進行觀察，用CytoVision軟件分析影像，計數(shù)分析至少200個細胞。

2 結果

2.1 羊水細胞的染色體核型和染色體微陣列分析結果 2例胎兒的染色體核型結果均為46,XN。2例胎兒的染色體微陣列分析結果未發(fā)現(xiàn)具有明確臨床致病意義的非整倍體和拷貝數(shù)目變異，但是SNP探針信號提示胎兒1的16號染色體短臂末端(16p13.3，chr16:89560_7064036)有1個6.97Mb的染色體ROH區(qū)域(圖1A)；胎兒2的16號染色體長臂末端(16q22.3q24.3, chr16: 73738443_90163275)有1個16.42 Mb的染色體ROH區(qū)域(圖1B)。

圖1 2例胎兒羊水細胞的染色體微陣列分析提示16號染色體末端存在純合區(qū)域

ROH的形成一般是由于血緣一致性或者UPD的原因，由于該ROH區(qū)域位于16號染色體末端且片段長度較大，結合胎兒早發(fā)型宮內(nèi)生長受限的表型，高度懷疑胎兒16號染色體為單親二體，因此進一步抽取胎兒父母的外周血進行染色體微陣列分析。使用UPDtool軟件對父母和胎兒的染色體微陣列中的SNP信號進行家系分析，結果顯示胎兒1的16號染色體是母源性單親二體，并且為母源性單親同二體(isodisomy，iUPD)和母源性單親異二體(heterodisomy，hUPD)的混合(見圖2A)，母源性iUPD位于16p13.3短臂末端區(qū)域，長度為6.97Mb；母源性hUPD位于16p13.3q24.3區(qū)域，長度為83.2Mb；胎兒2的16號染色體也為母源性FracHom：藍色線，數(shù)值代表在1K的窗口分辨率下純合基因型的比例；FracME：紅色線，數(shù)值代表在1K的窗口分辨率下發(fā)生孟德爾錯誤的概率；FracIdentFather：綠色線，數(shù)值代表在1K的窗口分辨率下等位基因的基因型和父親相同的比例；FracIdentMother：黑色線，數(shù)值代表在1K的窗口分辨率下等位基因的基因型和母親相同的比例(有關本圖的更詳細說明，請參閱本文的全文)單親二體，并且為母源性單親同二體(iUPD)和母源性hUPD的混合(圖2B)，母源性iUPD位于16q22.3q24.3長臂末端區(qū)域，長度為16.42Mb；母源性hUPD位于16p13.3q22.3區(qū)域，長度為73.75Mb。

圖2 UPDtool軟件提示胎兒1和2中16號染色體為混合型母源性UPD(16)

2.2 胎盤的熒光原位雜交結果 對胎兒1的胎盤A、B、C 3個不同部位取材進行熒光原位雜交分析，使用的為16號染色體著絲粒探針(CEP16)，探針熒光顏色為紅色，在A處取材計數(shù)的200個胎盤絨毛細胞中，顯示3個紅色信號的細胞占比約為95%，并且在B、C處取材進行的熒光原位雜交分析中，3個紅色信號的細胞占比均大于95%(圖3)。我們從胎盤A、B、C 3個部位的結果推測，胎盤絨毛細胞中16號染色體三體細胞應該占據(jù)很高的比例，這也提示該例胎兒存在限制性胎盤嵌合體(confined placental mosaicism，CPM)的現(xiàn)象。

圖3 胎兒1胎盤絨毛細胞的熒光原位雜交結果提示為16-三體

3 討論

FGR是導致圍產(chǎn)兒患病和死亡的重要原因，還可能帶來遠期的不良結局。國際上對于FGR的定義至今尚無統(tǒng)一的“金標準”，2019年中華醫(yī)學會婦產(chǎn)科學會共識[14]對于FGR的定義為，受病理因素(母體、胎兒、胎盤疾病)影響，胎兒生長未達到其應有的遺傳潛能，多表現(xiàn)為胎兒超聲估測體重或腹圍低于相應胎齡第10 百分位。目前美國、英國、加拿大等國家的臨床指南均以超聲檢查作為診斷FGR的金標準[15]，診斷早發(fā)型FGR(孕周<32周)有3個充分條件：①腹圍<第3百分位數(shù)；②估測胎兒體重<第3百分位數(shù)；③臍動脈舒張末期血流消失；滿足3個充分條件之一或滿足腹圍或估測胎兒體重<第l0百分位數(shù)，且同時滿足臍動脈或子宮動脈搏動指數(shù)>第95百分位數(shù)即可診斷早發(fā)型FGR[16]。早發(fā)型FGR從理論上說更有可能是由于胎兒或胎盤本身的遺傳學改變所引起。

FGR的病因是多方面的，包括母體原因、胎兒原因和子宮胎盤血管功能不全原因三方面，病因之間的重疊并不少見。母體因素包括妊娠合并癥及并發(fā)癥(如妊娠期高血壓、胰島素依賴型糖尿病、嚴重腎臟疾病引起的血管病變)、先天性或獲得性易栓癥、營養(yǎng)不良、吸煙等。25%～30%的FGR病例與母體血管疾病相關的子宮胎盤灌注減少有關，它是非異常胎兒最常見的病因。胎盤植入和附著的結構異常和改變也可能涉及到FGR的病因?qū)W，包括雙葉胎盤、絨毛膜血管瘤、臍帶絨毛插入和單臍動脈等。胎兒原因中包括非遺傳因素(主要是宮內(nèi)感染)和遺傳因素，遺傳因素中包括：①染色體異常，特別是13、18和21染色體三體中的染色體異常，這些占FGR病例的5%～20%，尤其是早期FGR病例；②染色體拷貝數(shù)目變異，如22q11.2缺失綜合征、Silver-Russell綜合征、貓眼綜合征等綜合征；③單基因遺傳病，如IGF1基因突變引起的發(fā)育遲緩伴耳聾和智力低下，NIPBL基因突變引起的Cornelia de Lange綜合征1型，RNU4ATAC基因突變引起的Roifman綜合征等。

本研究發(fā)現(xiàn)的2例混合型單親二體病例，分別在16p13.3和16q22.3q24.3區(qū)域有單親同二體區(qū)域存在，這可能會引起染色體隱性遺傳致病基因的暴露，如果這兩個區(qū)域中有影響胎兒生長發(fā)育的基因存在，那么單親二體導致FGR的作用機制也可能與這個基因的顯性化有關。在第一例胎兒中，單親同二體存在位于染色體短臂末端16p13.3，長度是6.97 Mb，我們在該區(qū)域發(fā)現(xiàn)2個和胎兒生長受限相關的基因：NDUFB10和ALG1，分別可引起常染色隱性遺傳的線粒體復合體I缺陷35型(OMIM#619003)和先天性糖基化障礙1K型(OMIM#608540)在這個區(qū)域，但這些綜合征往往伴有胎兒非免疫水腫、心肌病、肝脾腫大、小頭畸形和肺發(fā)育不全等其他系統(tǒng)的異常。在第二例胎兒中，單親同二體存在位于染色體長臂末端16q22.3q24.3，長度是16.42 Mb，我們在該區(qū)域發(fā)現(xiàn)4個和FGR相關的隱性基因，其中CDK10可引起Al Kaissi綜合征(OMIM#617694)，主要表現(xiàn)為宮內(nèi)發(fā)育遲緩、嚴重肌張力減退和面部畸形；CDT1可引起Meier-Gorlin綜合征4型(OMIM#613804)，主要表現(xiàn)為FGR和小頭畸形；CTU2可引起小頭畸形-面部畸形-腎臟發(fā)育不良-生殖器性別不清綜合征(OMIM#618142)，主要表現(xiàn)為FGR、嚴重小頭畸形伴胼胝體發(fā)育不全、小頜畸形、腎臟發(fā)育不良、先天性心臟病和生殖器異常；RFWD3可引起范可尼貧血(OMIM#617784)，主要表現(xiàn)為FGR、十二指腸閉鎖、拇指缺失、腎發(fā)育不良和多脾。目前，母源性UDP(16) 影響胎兒生長的作用機制仍不清楚，推測可能與印記基因的作用或常染色體隱性遺傳致病基因的暴露有關，上述FGR相關的隱性基因疾病大多伴有其他系統(tǒng)的畸形，而本研究的2例病例均只表現(xiàn)為早發(fā)型FGR，故我們從表型上推測可能未出現(xiàn)隱性致病基因的暴露，但由于我們未行區(qū)域內(nèi)基因測序故無法完全排除此種情況的存在。

隨著診斷技術水平的提高，越來越多的UPD病例被報道。早期的研究表明UPD 的發(fā)生率約為1/3500～1/5000[1]。而實際上UPD的發(fā)生率可能更高，因為可能某些類型的UPD嚴重影響胚胎的生長發(fā)育而導致早期流產(chǎn)，但很少有研究者對流產(chǎn)物進行UPD篩查，此外有些類型的UPD患者可無任何異常臨床表型，如UPD2。最近Nakka等[2]對440多萬份樣本研究后發(fā)現(xiàn)，UPD在活產(chǎn)兒中的發(fā)生率可達1/2000。其中母源性UPD(maternal uniparental disomy, mUPD)的發(fā)生率約是父源性UPD(paternal uniparental disomy, pUPD)的3倍，其遺傳方式并不遵循傳統(tǒng)的孟德爾遺傳[19]。幾乎所有的染色體都有UPD的報道，但18號染色體UPD(18)和UPD(19)發(fā)生率很低，推測可能是由于具有較強的胚胎致死性，而報道最多的是UPD(15)。

目前明確涉及印記疾病的染色體有6、7、11、14、15、20號染色體[5]，此外關于母源性16號染色體單親二體的臨床效應也有部分文獻報道。在報道的位數(shù)不多的文獻中，母源性UPD(16)的臨床效應尚存爭議，其中少部分病例表型完全正常，多數(shù)病例會出現(xiàn)宮內(nèi)生長受限，少部分伴有其他系統(tǒng)結構畸形(如心臟結構畸形、神經(jīng)系統(tǒng)異常、肛門閉鎖等)，但是報道的結構畸形又缺乏特異性。而且，若胎兒為UPD(16)，通常提示可能還存在胎兒16三體低比例嵌合體或限制性胎盤16三體嵌合體，這些嵌合體可能增加妊高癥、子癇前期、早產(chǎn)、低出生體重兒及新生兒ICU入住率增加等圍產(chǎn)期并發(fā)癥風險[6-8]。本研究發(fā)現(xiàn)的2例混合型母源單親二體病例，分別在孕19+周和16+周時開始出現(xiàn)FGR，第二個病例出現(xiàn)表型的時間很早，結合第二個病例16+周時臍動脈舒張末期血流信號消失，推測可能由于胎盤功能減低加重了第二個病例FGR的嚴重程度。

目前對于mUPD (16)本身是否是導致FGR的原因還存在很大的爭議，主要難點在UPD(16)本身常伴有胎兒自身16號染色體三體低比例嵌合或16號染色體三體限制性胎盤嵌合體，在分析UPD自身的效應時很難排除以上這些因素的干擾。在UPD(16)形成的三體補救過程中[20]，會有相當數(shù)量的二體和(或)三體嵌合體存在。我們?nèi)∽蕴ケP的3處絨毛細胞FISH結果顯示16號染色體三體占絕大部分比例，也證實了上面這些推測。CPM主要是指染色體嵌合體僅存在于胚外組織胎盤絨毛組織，而未存在于胎兒組織細胞中，故對胎兒細胞的直接檢測，包括G顯帶染色體核型分析和微陣列分析中染色體數(shù)目顯示為正常。母源性UPD(16)常和CPM同時存在，CPM引起的胎盤結構異常，會影響胎兒的血液供應，從而導致營養(yǎng)不足和FGR[21]。但一般認為，CPM不會引起胎兒結構的畸形，且發(fā)生嚴重FGR的病例中往往有CPM和UPD的共存．從而推斷UPD對胎兒生長發(fā)育可能有相當程度的影響[22]，本研究中的2個病例結果也支持這一觀點，我們推測FGR可能并不是母源性UPD(16)本身直接引起的，而是由于胎盤的異常嵌合體所造成。

本研究中我們對2例早發(fā)型FGR的胎兒進行了遺傳學相關檢測，首先通過染色體核型分析和CMA檢測孕婦羊水細胞，結果發(fā)現(xiàn)2例胎兒羊水細胞的染色體核型均正常，CMA結果提示存在16號染色體末端的ROH區(qū)域，長度分別為6.97Mb(位于16p13.3)和16.42Mb(位于16q22.3q24.3)。經(jīng)過父母和胎兒的SNP位點進行比對，確定這2例胎兒為iUPD和hUPD的混合型母源UPD(16)。最后對其中1例胎兒胎盤3個部位取材樣本的FISH結果顯示，胎盤絨毛細胞中16號染色體三體比例占95%以上，證實為CPM。我們的結果提示母源性16號染色體單親二體和FGR表型的直接關聯(lián)尚不明確，表型可能是由于胎盤限制性嵌合三體所引起，mUPD (16)的表型效應仍需要更多的證據(jù)來進行研究，我們的結果對胎兒父母未來的生育指導和產(chǎn)前診斷具有重要意義，為理解16號染色體單親二體對胎兒和胎盤的臨床效應提供了新數(shù)據(jù)。