純合和復合雜合點突變型α地中海貧血的血液學特征分析

袁騰龍 王繼成 秦丹卿 梁杰 姚翠澤 杜麗 郭浩

(廣東省婦幼保健院 醫(yī)學遺傳中心，廣東 廣州 511440)

地中海貧血(簡稱地貧)是由于珠蛋白基因缺陷從而導致珠蛋白生成障礙的溶血性貧血。常見的地中海貧血分為α與β兩種，由于珠蛋白基因缺失或點突變，α地中海貧血又分為缺失型與點突變型。常見缺失型α地中海貧血的臨床表現(xiàn)已經(jīng)有相關文獻[1-3]進行了闡述，點突變型α地中海貧血發(fā)生率低，而單純的純合和復合雜合點突變型α地中海貧血的發(fā)生率更低。為了更好地掌握純合和復合雜合點突變型α地中海貧血的篩查指標特征，促進地中海貧血的臨床篩查與診斷，本研究對其血液學指標進行描述性分析，為臨床遺傳咨詢提供診斷學依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2016～2020年于廣東省婦幼保健院醫(yī)學遺傳中心進行地中海貧血基因診斷的患者，對明確診斷的純合和復合雜合點突變型α地中海貧血11例進行回顧性血液學指標分析。

1.2 方法

1.2.1 血細胞參數(shù)分析 抽取受檢者2ml靜脈血，使用Syssmex XN5000全自動血液分析儀測定血紅蛋白(hemoglobin，Hb)、平均紅細胞體積(mean corpuscular volume，MCV)、平均紅細胞血紅蛋白量(mean corpuscular hemoglobin，MCH)。

1.2.2 血紅蛋白分析 抽取受檢者2ml靜脈血，采用法國Sebia全自動毛細管電泳儀進行血紅蛋白分析血紅蛋白A(hemoglobin A，HbA)、血紅蛋白A2(hemoglobin A2，HbA2)、血紅蛋白F(hemoglobinF，HbF)、血紅蛋白H(hemoglobin H，HbH)等。

1.2.3 地中海貧血基因診斷 取患者2ml靜脈血，按照廈門至善外周血全基因組磁珠法試劑盒說明書操作提取外周血DNA。采用地中海貧血(α/β)基因檢測試劑盒(PCR-流式熒光雜交法)及LuminexMagPix多功能液相懸浮芯片系統(tǒng)對包括α-珠蛋白基因3種缺失(--SEA、-α3.7和-α4.2)、3種突變(WS122、QS125和CS142)，β-珠蛋白基因17種突變進行檢測。操作均按說明書進行。

2 結果

在11例純合和復合雜合點突變型α地中海貧血病例中共檢出純合點突變型α地中海貧血5例，其中αWSα/αWSα 3例、αQSα/αQSα 1例、αCSα/αCSα 1例，見表1；復合雜合點突變型α地中海貧血5例，其中αQSα/αWSα 2例、αCSα/αWSα 1例、αCSα/αQSα 2例，見表2；純合點突變型α地中海貧血同時合并β地中海貧血αWSα/αWSα&βIVS-II-654/βN1例，見表3。

表1 純合點突變型α地中海貧血血液學指標分析及基因診斷結果

表2 復合雜合點突變型α地中海貧血血液學指標分析及基因診斷結果

表3 純合點突變型α地中海貧血合并β地中海貧血血液學指標分析及基因診斷結果

3 討論

α地中海貧血是由于16號染色體α蛋白基因簇發(fā)生突變引起的貧血性疾病，其中點突變型α地中海貧血46種[4]。我國南方地區(qū)為α地中海貧血的高發(fā)區(qū)，其發(fā)病率達到12.03%[5]。非缺失型地中海貧血由于發(fā)生率較低，極易被臨床忽視從而導致非缺失型HbH病的漏診。我國常見的3種非缺失型地中海貧血均位于功能較強的α2基因上，其中αCSα地中海貧血最為常見，有文獻報道αCSα、αQSα地中海貧血的發(fā)生率僅占α地中海貧血的2.59%和1.05%[6]，而純合和復合雜合點突變型α地中海貧血則更為少見。

從血液學指標來看，αWSα純合型α地中海貧血并沒有明顯的貧血癥狀，而αCSα及αQSα純合型α地中海貧血血細胞分析均提示MCV及MCH水平降低，呈現(xiàn)小細胞低色素貧血，血紅蛋白水平為96～100g/L，均表現(xiàn)為輕度貧血，與文獻[7]報道相符。從血紅蛋白分析結果來看，本文發(fā)現(xiàn)的1例αQSα/αQSα地中海貧血患者，HbH達到26.9%，該結果與相關指南[8]不相符，在臨床工作中應考慮HbH病的可能。唐燕青等[9]指出某些純合點突變型地中海貧血產(chǎn)生的血紅蛋白可以形成不溶物直接損壞紅細胞從而表現(xiàn)為HbH病。αQSα純合型α地中海貧血患者MCV及MCH偏低，是由于此突變?yōu)棣?珠蛋白基因突變導致脯氨酸替代異亮氨酸，同時Hb QS可以干擾H螺旋段形成，并迅速降解從而導致α珠蛋白鏈含量下降。

雜合點突變型α地中海貧血血液學指標與純合點突變型α地中海貧血血液學指標相似，Hb CS帶出現(xiàn)在αCSα/αWSα及αCSα/αQSα基因型中，與王文杰等[10]的研究結果一致。在純合點突變型α地中海貧血合并β地中海貧血患者中，血液學指標MCV及MCH降低，呈現(xiàn)小細胞低色素貧血，血紅蛋白水平為106g/L，較αWSα純合型α地中海貧血降低，這可能與β珠蛋白基因發(fā)生突變導致β珠蛋白合成減少有關，從而使得臨床表型相對較重。

本研究表明，純合和復合雜合點突變型α地中海貧血在血液學參數(shù)及血紅蛋白電泳結果存在一定的相關性，同時也存在一定的差異。廣東人群地中海貧血基因攜帶率高，當MCV、MCH等血液學指標出現(xiàn)異常時應考慮地中海貧血的可能。在臨床工作中針對純合和復合雜合點突變型α地中海貧血的結果應該結合血液學參數(shù)及血紅蛋白電泳結果進行分析，避免HbH病的漏診，從而更好地對α地中海貧血患者進行遺傳咨詢。