卵巢癌對(duì)化療藥物耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展

王永，楊軍文

（皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院婦產(chǎn)科，安徽 蕪湖241001）

卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，致死率一直位于女性所患疾病的前列。由于卵巢位于盆腔深部，早期癥狀輕微且缺乏特異性，不易被察覺，患者多是晚期才被確診，有的甚至已經(jīng)發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，給治療帶來了難度；卵巢癌對(duì)化療藥物不敏感，多與化療耐藥的產(chǎn)生有關(guān)。卵巢癌的治療，一經(jīng)確診，多行手術(shù)治療，術(shù)后再進(jìn)行數(shù)個(gè)療程的TP方案化療，盡管幾乎所有的卵巢癌患者在初次接受化療治療后效果顯著，癥狀可以得到有效的緩解，但在治療后期或多或少都會(huì)對(duì)化療藥物的敏感性有不同程度的降低，從而導(dǎo)致治療效果欠佳，甚至腫瘤復(fù)發(fā)，降低了患者的生存率［1］。因此，尋找卵巢癌產(chǎn)生化療耐藥的相關(guān)基因及調(diào)控因子，并對(duì)癥處理，對(duì)逆轉(zhuǎn)化療耐藥性增強(qiáng)治療效果具有很大的意義。本文就目前卵巢癌化療藥物耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 卵巢癌化療耐藥相關(guān)基因

1.1 基因NCALD的相關(guān)耐藥機(jī)制 基因NCALD是屬于螺旋-環(huán)-螺旋鈣結(jié)合蛋白亞家族［2］。有研究發(fā)現(xiàn)在已產(chǎn)生耐藥的卵巢癌細(xì)胞和組織中NCALD的表達(dá)明顯下調(diào)［3］，這表明NCALD的表達(dá)高低與卵巢癌的耐藥產(chǎn)生存在著某種重要的聯(lián)系。Ayers等［4］、Davidson［5］研究發(fā)現(xiàn)NCALD中含有19個(gè)卵巢癌耐藥中發(fā)揮作用的miRNA，因此NCALD的表達(dá)可以在相關(guān)miRNA對(duì)卵巢癌耐藥產(chǎn)生的中間環(huán)節(jié)中發(fā)揮潛在的作用。此外，NCALD也可與已知的15種卵巢癌耐藥產(chǎn)生相關(guān)的蛋白質(zhì)［6-10］有直接或間接相互作用，通過這種相互作用的介導(dǎo)產(chǎn)生了卵巢癌的化療耐藥。另一研究發(fā)現(xiàn)，NCALD可能是通過與CX3CL1［11-12］共同作用參與腫瘤化療耐藥的產(chǎn)生，兩者聯(lián)合作用可與腫瘤免疫微生物競(jìng)爭(zhēng)內(nèi)源性RNA（CERNA）產(chǎn)生相互作用。Dong等［6］研究證實(shí)了NCALD的抑制可能通過其與CX3CL1的相互作用導(dǎo)致卵巢癌對(duì)化療藥物耐藥性的產(chǎn)生。

1.2 基因AGGF1和MFAP4的相關(guān)耐藥機(jī)制 有研究指出，基因MFAP4與AGGF1的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)及凋亡存在顯著的關(guān)系［13-14］。Zhao等［15］研究發(fā)現(xiàn)AGGF和MFAP4在原發(fā)性鉑類化療藥物耐藥漿液性卵巢癌（SOC）的細(xì)胞及組織中表達(dá)水平顯著升高，AGGF1和MFAP4的高表達(dá)水平可預(yù)測(cè)SOC患者對(duì)鉑類藥物化療的反應(yīng)較差，與SOC患者較高鉑類藥物耐藥的產(chǎn)生概率顯著相關(guān)。其耐藥的機(jī)制可能為AGGF1和MFAP4與另外兩種蛋白FLII和GATA1連接成相互作用軸，這與腫瘤細(xì)胞的外基質(zhì)及彈性纖維形成有關(guān)，并促進(jìn)兩者的產(chǎn)生，進(jìn)而影響了腫瘤細(xì)胞的微環(huán)境［16］。導(dǎo)致微環(huán)境向著腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)有利的方向重塑，造成了腫瘤細(xì)胞及組織的發(fā)生發(fā)展和化療后腫瘤的復(fù)發(fā)，促使腫瘤化療耐藥性的產(chǎn)生。

1.3 基因SPARCL1的相關(guān)耐藥機(jī)制 有研究發(fā)現(xiàn)作為抑癌基因之一的SPARCL1，在肺腺癌［17］及骨肉瘤［18］等多種癌癥細(xì)胞及組織中的表達(dá)顯著下調(diào)，由此可以推測(cè)腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、演變及轉(zhuǎn)移可能與SPARCL1基因表達(dá)存在聯(lián)系。蔡香雪等［19］等研究發(fā)現(xiàn)SPARCL1基因在卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞中的表達(dá)顯著下調(diào)，通過誘導(dǎo)其表達(dá)水平的增高能夠抑制耐藥的卵巢癌細(xì)胞株增殖，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)了卵巢癌對(duì)鉑類藥物的耐藥性，提高對(duì)化療的敏感性。然而，通過干擾SPARCL1表達(dá)則得到完全相反的結(jié)果。該研究還發(fā)現(xiàn)，SPARCL1過表達(dá)后，可導(dǎo)致卵巢癌耐藥細(xì)胞中多條信號(hào)途徑發(fā)生了顯著變化，其中包括p53信號(hào)通路、細(xì)胞黏附分子等經(jīng)典的卵巢癌化療耐藥調(diào)控通路。因此，SPARCL1基因介導(dǎo)卵巢癌化療耐藥產(chǎn)生的機(jī)制可能為其在癌癥組織及細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，導(dǎo)致抑制癌癥細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖及轉(zhuǎn)移的能力降低，減少了對(duì)參與耐藥有關(guān)信號(hào)通路的調(diào)控，由此間接地影響了卵巢癌化療耐藥的產(chǎn)生。

2 卵巢癌化療耐藥相關(guān)調(diào)控因子

2.1 Nrf2和ATF2的相關(guān)耐藥機(jī)制 細(xì)胞質(zhì)中的Nrf2（核因子紅系2-相關(guān)因子2），是一種轉(zhuǎn)錄因子，是許多抗氧化和細(xì)胞保護(hù)基因的調(diào)節(jié)因子［20］。Wu等［21］發(fā)現(xiàn)在已產(chǎn)生順鉑耐藥的卵巢癌細(xì)胞及組織中Nrf2高表達(dá)，通過抑制Nrf2的轉(zhuǎn)位作用可以增加卵巢癌對(duì)順鉑的敏感性。Manandhar等［22］通過敲除Nrf2發(fā)現(xiàn)可以抑制ErbB2的表達(dá)，進(jìn)而使AKT磷酸化減少，蛋白p27增加，腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)受限、凋亡增加，使得卵巢癌細(xì)胞對(duì)多西他賽敏感性增加。有報(bào)道指出，順鉑進(jìn)入細(xì)胞后直接與線粒體結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞色素C釋放，線粒體腫脹并產(chǎn)生活性氧，誘導(dǎo)氧化應(yīng)激的發(fā)生，從而達(dá)到化療抑制腫瘤細(xì)胞發(fā)展的效果［23］。目前研究表明，Keap1（Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1）-Nrf2通路是重要的抗氧化通路之一，因此，Nrf2的表達(dá)增加可通過拮抗順鉑引起的氧化應(yīng)激反應(yīng)，使得腫瘤細(xì)胞穩(wěn)定，產(chǎn)生耐藥。近年來，活化轉(zhuǎn)錄因子2（ATF2）在卵巢癌耐藥的機(jī)制研究中也受到關(guān)注。Jiang等［24］研究發(fā)現(xiàn)，在耐藥的卵巢癌細(xì)胞株中c-jun mRNA與ATF2相互作用增加，耐藥細(xì)胞株中Bcl-xL［25］表達(dá)上升，從而引起了鉑類藥物的耐受，使miR-139-5p表達(dá)恢復(fù)或增加。miR-139-5p可與c-jun mRNA結(jié)合，影響了后者與ATF2相互作用，導(dǎo)致順鉑與線粒體結(jié)合，促使線粒體凋亡，逆轉(zhuǎn)了卵巢癌細(xì)胞對(duì)順鉑化療的耐藥性。此外，有研究顯示，ATF2表達(dá)高低與卵巢癌的惡性程度、轉(zhuǎn)移及生存率有關(guān)，降低其表達(dá)可有效地抑制腫瘤細(xì)胞及組織的增殖、恢復(fù)及轉(zhuǎn)移，增加對(duì)化療的敏感度。同時(shí)也是預(yù)后不良的標(biāo)志［26］。ATF2可維持組織再生能力及防止細(xì)胞死亡［27］，這將發(fā)生在順鉑治療后產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞及組織損傷至復(fù)發(fā)這一過程中，從而產(chǎn)生順鉑耐藥。Nrf2可以通過抗氧化反應(yīng)和激活pJNK／p38通路，ATF2參可與其中，兩者相互聯(lián)系間接地介導(dǎo)了化療耐藥的產(chǎn)生［28］。由此，可以認(rèn)為ATF2與Nrf2兩者產(chǎn)生的耐藥機(jī)制可以相互關(guān)聯(lián)。

2.2 Krüppel樣因子（KLFs）的相關(guān)耐藥機(jī)制 Krüppel樣因子（Krüppel-like factors，KLFs）是一組轉(zhuǎn)錄因子，包含可以與DNA結(jié)合的含有鋅指蛋白結(jié)構(gòu)。已有的研究證實(shí)，其可以在多種腫瘤細(xì)胞及組織［29］中通過調(diào)控相關(guān)基因的表達(dá)，與腫瘤細(xì)胞的增殖凋亡及發(fā)生演變相關(guān)聯(lián)，KLFs的表達(dá)一定程度上可以反映腫瘤患者的預(yù)后［30-32］。Zhao等［33］研究發(fā)現(xiàn)在SOC組織中KLFs的表達(dá)明顯降低，其表達(dá)與SOC的轉(zhuǎn)移及分化程度存在密切關(guān)系。Wang等［34］發(fā)現(xiàn)KLF4可以通過抑制卵巢上皮與間充質(zhì)細(xì)胞間的轉(zhuǎn)化，達(dá)到抑制腫瘤的作用。其機(jī)制為KLF4可以通過阻滯卵巢癌細(xì)胞分裂增生的G1期來發(fā)揮其抑制作用。另外，KLF6在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤［35］等多種癌癥細(xì)胞及組織中表達(dá)失調(diào)。Zhang等［36］研究發(fā)現(xiàn)MiR-630通過靶向KLF6可以增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞的侵襲和增殖。由此可見Chen等［37］發(fā)現(xiàn)KLF6在卵巢癌中相對(duì)高表達(dá)可以導(dǎo)致OS和PFS較差。Akella等［38］研究發(fā)現(xiàn)，KLF8可以參與腫瘤的異質(zhì)性的產(chǎn)生，這與化療耐藥的產(chǎn)生存在一定關(guān)聯(lián)。

2.3 抗凋亡因子的相關(guān)耐藥機(jī)制 X連鎖凋亡抑制因子（XIAP）為IAP蛋白家族的一員，是一類可以通過抑制促凋亡信號(hào)拮抗細(xì)胞凋亡的因子［39］。抗癌藥物的作用機(jī)制主要是細(xì)胞毒作用，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，而腫瘤細(xì)胞中往往會(huì)高水平表達(dá)抗凋亡蛋白，逃避細(xì)胞毒作用，以達(dá)到化療耐藥的效果。Li等［40］通過利用siRNA干擾技術(shù)與化療藥物作用于移植瘤裸鼠，沉默XIAP的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)裸鼠對(duì)化療藥物的敏感性得到顯著提升。此外，還有其他可以調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的因子，如BCL-2蛋白家族。Cardenas等［41］研究發(fā)現(xiàn)，在耐藥的卵巢癌干細(xì)胞株中，BCL-2蛋白家族高水平表達(dá)。髓樣細(xì)胞白血病序列1（MCL1），是另一種常見的細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子，屬于BCL-2蛋白家族，已證實(shí)其在癌細(xì)胞及組織［42］中高水平表達(dá)，與腫瘤治療后的復(fù)發(fā)呈明顯正相關(guān)。Wu等［43］研究發(fā)現(xiàn)，在化療耐藥的婦科腫瘤細(xì)胞及組織中MCL1表達(dá)上調(diào)，其可通過抑制線粒體的凋亡信號(hào)，致使化療耐藥的產(chǎn)生。因此，抗凋亡因子促進(jìn)化療耐藥的產(chǎn)生是通過拮抗化療藥物的細(xì)胞毒作用，使得癌癥細(xì)胞凋亡減少，進(jìn)而增強(qiáng)了癌癥細(xì)胞的增殖、分化及侵襲能力，導(dǎo)致化療耐藥的產(chǎn)生。

3 結(jié)語(yǔ)及展望

在卵巢癌的治療中，化療藥物的使用延長(zhǎng)了患者的生存年限。但化療耐藥的出現(xiàn)卻嚴(yán)重制約了化療的效果，甚至導(dǎo)致治療的失敗，使得癌癥復(fù)發(fā)。因此，探究化療耐藥的機(jī)制，對(duì)于提高卵巢惡性腫瘤治療的療效意義重大。然而，化療耐藥的產(chǎn)生并非是受某種單一因素影響，而是多種因素共同介導(dǎo)，彼此間又存在相互作用，形成錯(cuò)綜復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，通過激活或抑制相應(yīng)的生物靶點(diǎn)、增加或減少相應(yīng)調(diào)節(jié)因子的表達(dá)，實(shí)現(xiàn)卵巢癌化療增敏，達(dá)到預(yù)期的治療效果。因此，研究化療耐藥產(chǎn)生的機(jī)制及各機(jī)制間形成的相互作用網(wǎng)絡(luò)，找到適宜的靶點(diǎn)及調(diào)節(jié)因子對(duì)于治療顯得尤為重要，也將成為治療卵巢惡性腫瘤化療耐藥研究的新方向。