不同病理分級(jí)膠質(zhì)瘤中人表皮生長因子受體-4的表達(dá)研究*

張新鵑，王海鳳，孫龍，姜旭光

（1.山東中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校 西醫(yī)教學(xué)部，山東 煙臺(tái) 264199；2.臨沂市中心醫(yī)院 神經(jīng)外科，山東 沂水 276400）

人表皮生長因子受體-4（HER4）為表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor,EGFR）家族的四成員之一。對于HER4 在某些惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用，國內(nèi)外研究很多；但HER4 在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中作用的研究卻比較少。筆者前期的研究已經(jīng)證實(shí)，HER4 在膠質(zhì)瘤中的陽性表達(dá)率明顯高于正常腦組織［1］。本實(shí)驗(yàn)主要采用免疫組織化學(xué)法和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法檢測HER4 在不同病理級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，探討膠質(zhì)瘤的惡性程度與HER4表達(dá)之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取臨沂市中心醫(yī)院收治、病理科存檔的膠質(zhì)瘤標(biāo)本88 例，所有患者均初發(fā)，均以手術(shù)治療為主，術(shù)后行放療或化療輔助治療。膠質(zhì)瘤標(biāo)本的核查、篩選均由本院病理科經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師進(jìn)行，并根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標(biāo)準(zhǔn)對腫瘤進(jìn)行病理分級(jí)，分為Ⅰ～Ⅳ級(jí)。其中Ⅰ級(jí)8 例，Ⅱ級(jí)25 例，Ⅲ級(jí)33 例，Ⅳ級(jí)22例。切除的標(biāo)本組織取一部分制成4 μm 厚切片，備免疫組織化學(xué)法檢測使用；另取一部分置于液氮-80℃保存，備實(shí)時(shí)熒光定量PCR 法檢測使用。

1.2 主要試劑與方法

1.2.1 免疫組織化學(xué)法 鼠抗人HER4 單克隆抗體HFR-1 購自美國Abcam 公司，免疫組化試劑盒購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。將石蠟切片常規(guī)進(jìn)行脫蠟水化，以蒸餾水漂洗5 min，切片置于0.01 mol/L 枸櫞酸緩沖液（pH 6.0）中進(jìn)行高溫抗原修復(fù)2 min 并自然冷卻25 min，冷水沖洗缸體可加快冷卻。取出切片，以蒸餾水沖洗2 次、每次3 min，之后用PBS 液反復(fù)沖洗，共3 次、每次3 分鐘?！?br>