脫落細胞學檢查聯合熒光原位雜交技術及血清膀胱腫瘤抗原水平檢測對腎盂癌的診斷價值

李亞潔，李坤朋

(南陽市第二人民醫院 檢驗科，河南 南陽 473000)

目前，臨床研究尚未對腎盂癌發病機制作全面闡述，但普遍認為與長期吸煙、服用鎮痛藥等因素相關，且腫瘤細胞浸潤范圍、分化程度不同，預后效果差異較大[1-3]。及早確診采取針對性治療方案，對延長患者生存期，降低病死率有積極意義。脫落細胞學檢查(exfoliative cytology，EC)、熒光原位雜交技術(fluorescence in situ hybridization，FISH)、膀胱腫瘤抗原(bladder tumor antigen，BTA)為臨床常用輔助診斷方法。本研究選取2015年1月至2019年10月南陽市第二人民醫院收治的150例疑似腎盂癌患者作為研究對象，探討EC、FISH、血清BTA水平聯合檢測的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2015年1月至2019年10月南陽市第二人民醫院收治的150例疑似腎盂癌的患者作為研究對象，均存在腰部疼痛、血尿等臨床癥狀，非妊娠期或哺乳期女性，無其他原發性惡性腫瘤，本研究經南陽市第二人民醫院醫學倫理委員會審核批準通過。男86例，女64例；年齡47～72歲，平均(53.68±3.16)歲；體質量指數17～25 kg·m-2，平均(22.39±1.08)kg·m-2。

1.2 方法行EC、FISH、血清BTA水平檢測。

1.2.1EC 取50 mL清潔中段晨尿，置于無菌瓶，1 h內送檢，將尿液標本離心沉淀，后制作為細胞涂片，使用蘇木精伊紅染色，光鏡下對細胞進行檢查。陽性判定標準：參照巴氏細胞分級法，Ⅲ～Ⅴ級為陽性。

1.2.2FISH 取50 mL清潔中段晨尿，置于無菌瓶，1 h內送檢，離心。37 ℃下使用氯化鈉溶液行尿液標本低滲處理，使用5 mL混合液(甲醇加入冰乙酸)，混勻離心，取上清液，pH值7.0 SSC溶液漂洗，體積分數為70%的乙醇玻片脫水，玻片雜交區域加入CSP3/CSP7、GLPp16/CSP17探針混合物，封邊，雜交處理(42 ℃，16 h)，移除蓋玻片，依次置于質量分數為10%NP-40/0.4×SSC溶液、質量分數為30% NP-40/0.4×SSC溶液，振蕩(3 s)漂洗。干燥后雜交區域加入15 μg DAPI復染劑，蓋上蓋玻片，避光保存20 min。陽性判定標準：熒光信號計數≥2個點位異常。

1.2.3血清BTA水平檢測 取5 mL空腹靜脈血，離心，分離血清。采用雙抗體夾心法和通蔚試劑(上海)有限公司生產的試劑盒檢測血清BTA值。陽性判定標準：出現抗原體復合物。

1.3 聯合檢測陽性判定標準EC、FISH、血清BTA水平檢測單獨診斷任一為陽性即為陽性。

1.4 觀察指標(1)以病理結果作為“金標準”，統計EC、FISH、血清BTA水平檢測單獨與聯合診斷腎盂癌的診斷結果。(2)統計EC、FISH、血清BTA水平檢測單獨與聯合診斷腎盂癌的靈敏度、特異度、準確度、漏診率、誤診率、陽性預測值、陰性預測值。

1.5 統計學方法采用SPSS 22.0統計軟件處理數據，計數資料以率(%)表示，行χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 診斷結果本組150例疑似腎盂癌患者，病理結果證實腎盂癌122例，腎結核16例，泌尿系感染12例。采用EC診斷出陽性50例，陰性100例；采用FISH診斷出陽性54例，陰性96例；采用血清BTA水平檢測診斷出陽性85例，陰性65例；三者聯合診斷出陽性124例，陰性26例。見表1。

表1 不同檢測方法診斷結果(n)

2.2 診斷效能EC、FISH、血清BTA水平聯合檢測診斷特異度、誤診率、陽性預測值與三者單獨診斷比較，差異無統計學意義(P>0.05)；EC、FISH、血清BTA水平聯合檢測診斷靈敏度、準確度、陰性預測值高于三者單獨診斷，漏診率低于三者單獨診斷，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 單獨檢測與聯合檢測診斷效能比較(%)

3 討論

腎盂癌為上尿路上皮細胞癌，因無典型臨床癥狀，臨床易漏診導致延誤治療[4-6]。腎盂癌患者因腫瘤細胞浸潤生長特性，腎組織與腎實質之間界限具有一定模糊性，影像學診斷臨床應用局限[7-8]。積極探討一種最佳診斷方法，提高診斷準確度，降低漏診率，對改善患者預后有積極意義。

EC為臨床常用的無創式檢測診斷方法，特異度較高，具有一定診斷效果，但腎盂癌患者在疾病早期階段，浸潤組織淺，在識別尿液標本陽性脫落細胞中敏感性低，且尋找尿液標本中脫落細胞對臨床檢測人員綜合素質、專業能力要求較高，加之EC檢測周期相對較長，導致其臨床應用具有一定局限性。FISH為新型檢測方法，在細胞、分子遺傳學基礎上形成，染色體數目能為臨床診斷提供信息支持，且能結合結構異常情況評估檢查結果，探針可顯示3、7、17號染色體，為FISH篩查腎盂癌提供理論基礎，但合并尿路細菌增生的疑似腎盂癌患者，局部組織存在自發熒光，干擾腫瘤特異性熒光信號，影響診斷準確度。BTA為蛋白水解酶，主要來自于腎盂癌腫瘤細胞增殖過程中，正常人群中BTA呈低表達、不表達狀態，血清BTA水平檢測能結合血清BTA水平診斷腎盂癌，但合并泌尿系感染、結石等疑似腎盂癌患者易出現假陽性結果，導致誤診。本研究結果顯示，EC、FISH、血清BTA水平聯合檢測診斷腎盂癌靈敏度92.62%，高于三者單獨診斷36.07%、37.70%、61.48%，與王元元等[9]研究結果一致。同時，本研究中EC、FISH、血清BTA水平聯合檢測診斷腎盂癌準確度86.67%、陰性預測值65.38%，高于EC單獨診斷44.00%(66/150)、22.00%(22/100)，FISH單獨診斷44.00%(66/150)、20.83%(20/96)，血清BTA水平檢測單獨診斷62.00%(93/150)、27.69%(18/65)，漏診率7.38%低于三者單獨診斷63.93%、62.30%、38.52%。上述結果進一步證實三者聯合可優勢互補，提高診斷準確度、陰性預測值，降低漏診率，保障患者可及時得到有效治療，延長生存期。

綜上，EC、FISH、血清BTA水平聯合檢測診斷腎盂癌，可提高診斷靈敏度、準確度，降低漏診率，可為臨床診療提供更多信息支持，有助于腎盂癌患者早期得到及時有效治療，降低病死率，改善預后。