托芬那酸通過(guò)下調(diào)LOXL2表達(dá)抑制人胃癌SGC-7901細(xì)胞侵襲①

程 琦 徐松濤 饒淑梅 馬永超

(漯河醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校，漯河 462002)

胃癌是威脅人類(lèi)生命健康的主要惡性腫瘤之一。全世界每年死于胃癌的患者約78.3萬(wàn)例，死亡率僅次于肺癌，位居惡性腫瘤譜第二位[1]。我國(guó)每年新增胃癌患者約67.9萬(wàn)例，死亡49.8萬(wàn)例，成為我國(guó)癌癥死亡的第二大原因[2]。90%以上癌癥患者的死亡是由腫瘤細(xì)胞侵襲和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移導(dǎo)致的[3]。因此侵襲和轉(zhuǎn)移是影響胃癌治療效果和生存預(yù)后的重要制約因素。托芬那酸(tolfenamic acid,TA)是一種廣泛應(yīng)用的非甾體抗炎藥，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱等作用[4]。近年來(lái)，TA對(duì)癌癥的化學(xué)預(yù)防作用已獲大量臨床和流行病學(xué)證據(jù)支持[5]。多項(xiàng)研究證實(shí)，TA可通過(guò)抑制轉(zhuǎn)錄因子特異性蛋白1 (specificity protein 1,SP1)表達(dá)發(fā)揮抗腫瘤作用，包括神經(jīng)母細(xì)胞瘤、結(jié)腸癌、卵巢癌、尤文肉瘤和胰腺癌等[6-10]。賴氨酰氧化酶樣蛋白2(lysyl oxidase-like 2,LOXL2)是受SP1調(diào)控的下游分子，在胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中發(fā)揮重要作用[11-13]。但目前關(guān)于TA對(duì)胃癌細(xì)胞遷移和侵襲的作用鮮有報(bào)道。本研究擬通過(guò)分子生物學(xué)方法觀察TA對(duì)人胃癌SGC-7901細(xì)胞遷移和侵襲的影響，并探究其可能的生物學(xué)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料 人胃癌SGC-7901細(xì)胞購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心；胎牛血清(FBS)和RPMI1640培養(yǎng)基購(gòu)自Hyclone公司；TA購(gòu)自Selleck公司；CCK-8試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物公司；結(jié)晶紫染色液、TRIzol試劑、RIPA裂解液和ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司；Matrigel基質(zhì)膠和Transwell小室購(gòu)自Corning公司；靶向LOXL2的shRNA干擾質(zhì)粒(pRS-LOXL2)和無(wú)義對(duì)照質(zhì)粒(pRS-scrambled)購(gòu)自美國(guó)Origene公司；脂質(zhì)體(Lipofectamine?2000)購(gòu)自Invitrogen公司；……