花臉香蘑研究進展*

盛春鴿，王延鋒，潘春磊，史 磊，王金賀，劉姿彤，張 鵬，于海洋，董雪梅

（黑龍江省農(nóng)業(yè)科學院牡丹江分院，黑龍江 牡丹江 157041）

花臉香蘑（Lepista sordida） 顏色靚麗、味道鮮美、營養(yǎng)豐富，深受廣大食用菌愛好者的青睞。國內(nèi)最早有關(guān)花臉香蘑的文字記載始于20世紀90年代初期有關(guān)花臉香蘑栽培的報道。從2000年至今，國內(nèi)以花臉香蘑為關(guān)鍵詞能檢索到的相關(guān)文獻有90余篇，研究的內(nèi)容集中在花臉香蘑的鑒定、栽培以及發(fā)酵液有效成分的提取及理化特性上的研究等方面。國外的相關(guān)文獻記載多以花臉香蘑活性成分的相關(guān)報道為主，鮮有栽培方面的文章。查閱總結(jié)了花臉香蘑中外文獻，對其進行綜述，以期為后續(xù)花臉香蘑的研究提供借鑒。

1 花臉香蘑分類學地位及其分布和生物學特征

花臉香蘑又名丁香蘑、花臉蘑、紫晶香蘑、紫花臉等，隸屬于真菌界（Fungi）擔子菌門（Basidiomycota） 傘菌綱（Agaricomycetes） 傘菌目（Agaricales） 口蘑科 （Tricholomataceae） 香蘑屬 （Lepista）[1]，廣泛分布于東北、西北、內(nèi)蒙古、華中等地區(qū)[2-3]，花臉香蘑菌蓋直徑4 cm～8 cm，幼時半球形，后平展，幼時中部下凹，濕潤時半透明或水浸狀。新鮮時紫羅蘭色，失水后顏色漸淡至黃褐色，邊緣內(nèi)卷，具不明顯的條紋，常呈波狀或瓣狀。菌肉淡紫羅蘭色，較薄[4]，水浸狀。菌褶直生，有時稍彎生或稍延生。中等密，淡紫色。菌柄長4.0 cm～6.5 cm，直徑0.3 cm～1.2 cm，紫羅蘭色，實心，基部多彎曲[5-6]。擔孢子 （7.0～9.5） μm× （4.0～5.5） μm，寬橢圓形至卵圓形，粗糙至具麻點，無色。初夏至夏季群生或近叢生于田野路邊、草地、草原、農(nóng)田附近、村莊路旁[5-6]。

2 花臉香蘑菌株鑒定方法

目前研究的花臉香蘑菌株大都是經(jīng)過野外采集后組織分離得到，花臉香蘑的鑒定主要依靠2種方法。

一種是傳統(tǒng)的分類學手段，即對子實體的宏觀形態(tài)如菌蓋大小、顏色，菌褶的顏色、著生方式，菌肉薄厚，菌柄形態(tài)；微觀特征如子實層內(nèi)的孢子、囊狀體等結(jié)構(gòu)特征進行觀察并鑒定[5-6]。

另外一種鑒定方法就是通過分子生物學手段，提取基因組DNA后進行相關(guān)的分子水平鑒定，其中最常用的一種方法是ITS序列鑒定。ITS（internal transcribed spacer）即內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)，是真菌核糖體RNA（rRNA） 基因非轉(zhuǎn)錄區(qū)的一部分。ITS鑒定是指對ITS序列進行測序，通過將測序得到的ITS序列與已知真菌ITS序列比較，從而獲得供試真菌分類信息的一種方法。由于ITS序列分析能實質(zhì)性地反映出屬間、種間以及菌株間的堿基對差異，具有屬、種水平上的特異性，加之其序列片段較?。?00 bp～700 bp）、易于分析，目前已被廣泛應(yīng)用于真菌屬內(nèi)不同種間或近似屬間的遺傳變異、親緣關(guān)系分析以及系統(tǒng)發(fā)育研究中[7-9]。

2種方法中，通過ITS測序鑒定花臉香蘑的研究結(jié)果比較可靠.劉悅萍等[10]利用ITS序列鑒定了從北京市懷柔區(qū)原始次生林區(qū)分離到的野生香蘑，確定其分類學地位；劉紅霞等[11]對17種野生蕈菌進行ITS鑒定，并對其中8個菌株進行了馴化栽培，取得一定的成果；鄒莉[12]、賈定洪[13]、岳萬松[14]、王紅艷[15]等分別對野生花臉香蘑菌株進行ITS序列鑒定，取得可靠結(jié)果；張京良等[16]利用ITS序列分析對采集自青島嶗山的一株真菌LS7進行鑒定，證明此真菌為花臉香蘑；姜雪等[17]采用表型和分子結(jié)合的方法，準確的鑒定出了2株香蘑屬菌株。

3 花臉香蘑馴化栽培

現(xiàn)有資料顯示，有關(guān)花臉香蘑的馴化栽培多集中于發(fā)酵液條件優(yōu)化[18-19]、發(fā)酵物[20]、提取物[21]以及生長特性[22-23]方面的研究，關(guān)于花臉香蘑人工栽培方面的研究相對較少。

目前已知國內(nèi)有關(guān)花臉香蘑馴化方面的研究早于且多于國外。早在1994年，盧成英等[24-25]開展了對紫晶香蘑的栽培研究，指出菌絲生長的最適溫度為26.8℃，最適pH為6.5。肖玉珍等[26]在1995年對花臉香蘑進行人工馴化栽培，并對其栽培技術(shù)進行了報道，同時對其生理特性和生長條件進行了研究，結(jié)果表明花臉香蘑能很好的利用蔗糖、淀粉，其次是作物秸稈中的纖維素、半纖維素，不能利用木屑中的纖維素、半纖維素。田果廷等[27]研究表明，花臉香蘑的最佳栽培模式為熟料覆土袋栽法，最適培養(yǎng)料配方為干雞糞 40%、稻草（麥秸）56%、石膏1%、過磷酸鈣1%、石灰2%。李智佳等[28]報道了達州地區(qū)花臉香蘑的人工栽培技術(shù)及病蟲害防治等內(nèi)容。李碧瓊[29]等通過比較3株花臉香蘑的栽培試驗，發(fā)現(xiàn)生料床栽法產(chǎn)量最高，是最理想的栽培模式。這與田果廷的試驗結(jié)果不一致，但花臉香蘑的栽培方式和產(chǎn)量，會隨著地區(qū)、菌株的不同，氣候條件及試驗條件的不同而發(fā)生變化。謝福泉等[30]總結(jié)了花臉香蘑熟料袋栽技術(shù)要點；戴肖東等[31]總結(jié)了發(fā)酵料栽培花臉香蘑技術(shù)，并對其生物學特性進行摸索研究；郭勇[32]、黃水珍[33-34]、丁智權(quán)[35]、華秀紅[36]、周會明[37]、胡先運[38]等分別對花臉香蘑的栽培技術(shù)展開研究并成功培育出子實體；陸歡等[39]通過研究，總結(jié)出大棚陽畦花臉香蘑高效栽培技術(shù)。

國外有關(guān)花臉香蘑栽培方面的報道，目前只有泰國學者Thongbai等[40]，其研究表明，在固體培養(yǎng)基上，花臉香蘑菌絲體生長的最佳氮源是酵母麥芽提取物，最適溫度為25℃，pH6.3；采用高粱培養(yǎng)基作為二級菌種用于子實體生產(chǎn)；子實體出菇的最佳溫度為25℃，空氣濕度為95%～97%，主要采用稻草堆肥培養(yǎng)基，表面以沙土覆蓋出菇。

4 花臉香蘑中有效成分及生物活性的研究

花臉香蘑營養(yǎng)豐富，子實體中富含硒、鍺、鐵、鋅、鈣等微量元素[41]，且富含蛋白質(zhì)、氨基酸等營養(yǎng)物質(zhì)[42]，其發(fā)酵液具有一定的抗菌活性[43-44]。

花臉香蘑藥理活性研究在國外開展的比較早和比較深入，德國學者Mazur等[45]從花臉香蘑菌株發(fā)酵液中分離出2種二萜類化合物，并進行了結(jié)構(gòu)鑒定及生物活性研究，結(jié)果表明化合物lepistal具有一定的抗細菌和抗真菌的作用。韓國學者Kang等[46]以花臉香蘑的培養(yǎng)物為基礎(chǔ)，分離出3種倍半萜類化合物Lepistatins A、Lepistatins B、Lepistatins C，均具有一定的抗炎抗菌作用。張正曦等[47]從花臉香蘑子實體乙醇提取物中分離得到10個甾醇類化合物，所有化合物均是首次從該菌中分離得到。Ito等[48]從花臉香蘑發(fā)酵液中提取出4種化合物，其中的3種化合物對剪股穎（一種禾本科的草）的根系生長具有抑制作用。Miao等[49]在花臉香蘑子實體內(nèi)純化出4種多糖 （LSPa1、LSPb1、LSPb2和 LSPc1），其中LSPc1能明顯抑制人喉癌細胞Hep-2的生長；同時進一步研究得知癌細胞凋亡的分子機制，此多糖通過調(diào)控線粒體途徑來誘導(dǎo)人喉癌細胞hep-2的凋亡[50]。Luo等[51]在花臉香蘑子實體中提取出一種多糖，對巨噬細胞的激活起著至關(guān)重要的作用。2018年Luo等[52]報道了從花臉香蘑中分離得到了一種多糖，通過阻斷STAT1介導(dǎo)的JAK-PKC-δ信號通路，有效的抑制了HepG2肝癌細胞中吲哚胺2，3-雙加氧酶的合成。Zhong等[53]從花臉香蘑的深層發(fā)酵液中提取出一種細胞內(nèi)多糖（clsp），并研究了其在體外和體內(nèi)抗氧化活性。在體外抗氧化試驗中，此多糖對超氧陰離子、羥基自由基和2，2-二苯基-1-吡啶酰肼（DPPH）自由基有明顯的清除作用。在d-半乳糖致衰老小鼠模型中，采用不同劑量的clsp進行體內(nèi)抗氧化試驗。結(jié)果表明，clsp能明顯抑制小鼠腦和血清中丙二醛（MDA）的生成，提高超氧化物歧化酶（SOD） 和谷胱甘肽過氧化物酶（gsh-px） 的活性。李響等[54]從花臉香蘑中分離獲得1-羥基-6-甲基-9，10-蒽醌活性化合物，該化合物對人肺癌A549、人骨肉瘤MG63、人結(jié)腸癌Sw480和人肝癌HepG2細胞具有中等細胞毒活性。劉艷如等[55]研究表明，花臉香蘑發(fā)酵液的乙酸乙酯萃取物對水稻細條病病原菌有顯著的抑制活性。

5 展望

經(jīng)過國內(nèi)外學者多年的研究，人們對花臉香蘑有一定的了解，但仍然存在很多方面的問題。在菌種改良方面，有關(guān)花臉香蘑的研究仍然比較淺顯，對新品種選育方面的研究依舊不夠很完善，其菌種資源有限，品種改良能力和更新?lián)Q代的水平也需要進一步提高。在栽培技術(shù)方面，缺乏一套成熟的、大面積生產(chǎn)的花臉香蘑栽培模式和管控措施，致使花臉香蘑并不能大規(guī)模的栽培和推廣。在病害研究方面，對花臉香蘑的病蟲害及解決方法方面的研究不夠充分，基本是在生產(chǎn)當中一邊栽培一邊摸索的狀態(tài)，缺乏一套現(xiàn)有的針對特定病蟲害行之有效的防控體系。在有效成分及藥理活性研究方面，在對花臉香蘑發(fā)酵液的有效成分提取的相關(guān)研究中，所純化出來的有效成分的種類多以多糖和萜類為主，尚未見其它種類成分的報道，且對于有效成分作用機制的相關(guān)研究并不深入，其藥理活性研究仍不夠全面和系統(tǒng)，對相關(guān)活性成分的代謝途徑及作用機制的研究仍不明確。上述問題都有待于進一步的研究。