Bartha株疫苗在豬偽狂犬病陽性場的應(yīng)用

張 軍，許光勇

（北京養(yǎng)豬育種中心，北京 100194；北京中育種豬有限責(zé)任公司，北京 100194）

豬偽狂犬病是一種由偽狂犬 病 病 毒（pseudorabies virus，PRV）感染豬群，臨床可見母豬流產(chǎn)，生長豬發(fā)熱、腹瀉、伴有神經(jīng)癥狀和呼吸道癥狀等特征的傳染性疾病。一旦豬群感染偽狂犬病病毒，可能導(dǎo)致其終身帶毒，嚴(yán)重影響?zhàn)B殖場的生產(chǎn)性能，造成直接或間接的經(jīng)濟(jì)損失。gB抗體是PRV野毒和疫苗毒株均能產(chǎn)生的，鑒于當(dāng)前市場上大部分PRV疫苗都是gE基因缺失，因此有無gE抗體可用于鑒別野毒和疫苗毒感染。此次試驗(yàn)首先根據(jù)仔豬的PRV gE和gB母源抗體消長來優(yōu)化免疫方式，然后比較不同免疫方式的Bartha株疫苗對(duì)豬群的保護(hù)效果，以便為養(yǎng)殖場制定科學(xué)免疫程序提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

兩批未接種豬偽狂犬病疫苗的斷奶仔豬共計(jì)100頭，用于追蹤仔豬母源抗體。

兩批未接種豬偽狂犬病疫苗的斷奶仔豬共計(jì)300頭，用于比較不同免疫方式的免疫效果。

1.2 方法

選擇兩批共100頭斷奶仔豬，不免疫豬偽狂犬病疫苗的仔豬分別于 6、8、10、11、12、13、14 周齡采集血液。

選擇兩批共300頭斷奶仔豬，隨機(jī)分為3組，其中A組不免疫豬偽狂犬病疫苗；B組6周齡首次免疫豬偽狂犬病Bartha K61株疫苗1頭份，10周齡加免（原有的免疫方式）；C組9周齡首次免疫豬偽狂犬病疫苗Bartha K61株1頭份，13周齡加免（優(yōu)化后免疫方式）；各組分別于 6、10、13、16、19、22周齡采集血液。

采用ELISA法檢測(cè)血清PRV gE和gB抗體。

1.3 結(jié)果判定

PRV gE抗體檢測(cè)試劑盒，美國IDEXX公司；若S/N值大于0.70，gE抗體判定為陰性。

PRV gB抗體檢測(cè)試劑盒，荷蘭Biochek公司；若抗體滴度大于1 071，gB抗體判定為陽性。

2 結(jié)果與分析

2.1 母源抗體變化

100頭用于追蹤母源抗體變化的試驗(yàn)豬來自于兩批斷奶仔豬，分別于 6、8、10、11、12、13、14 周齡收集血液，最后篩選出60頭試驗(yàn)豬的合格血清420份，其PRV gE和gB抗體結(jié)果見圖1和2。

由圖1和圖2結(jié)果可知，生長豬PRV母源抗體在11周齡出現(xiàn)拐點(diǎn)，說明豬群在11周齡前后出現(xiàn)了PRV野毒感染。因此，最佳的首免日齡確定為9周齡。

2.2 Bartha株疫苗應(yīng)用效果

300頭用于評(píng)估免疫效果的試驗(yàn)豬來自于兩批斷奶仔豬，每批分為A、B和C組，每組中60頭分別于 6、10、13、16、19、22周齡收集血液，最后篩選出180頭試驗(yàn)豬的合格血清1 080份，其PRV gE和gB抗體結(jié)果見圖3和圖4。

由圖3和圖4結(jié)果可知，中大豬后期豬偽狂犬病gE抗體陽性率C組B組>A組，gB抗體陽性率處于98%以上水平，表明疫苗免疫能夠迅速使豬群產(chǎn)生高水平的gB抗體。

3 討論

2010—2011年國內(nèi)部分豬場偽狂犬病開始轉(zhuǎn)陽，母豬流產(chǎn)、死木弱數(shù)量增加、生長豬死淘率升高，短期內(nèi)導(dǎo)致了一定的經(jīng)濟(jì)損失。相關(guān)研究報(bào)道也顯示，PRV毒株確實(shí)發(fā)生了多個(gè)點(diǎn)位的突變，豬場間出現(xiàn)多個(gè)變異的新毒株[1-3]。為驗(yàn)證Bartha K61株疫苗對(duì)當(dāng)前豬場流行的PRV新毒株是否具有保護(hù)作用，筆者對(duì)PR免疫方式進(jìn)行了優(yōu)化，結(jié)果表明，該試驗(yàn)豬場PRV感染時(shí)間點(diǎn)在11周齡前后，正是保育下床轉(zhuǎn)至育成區(qū)這個(gè)階段，由此說明該場感染點(diǎn)處于育成段。吳文福等研究表明，Bartha株疫苗免疫后4~5 d即可產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)力[4]，參考仔豬PRV gE和gB母源抗體消長規(guī)律，重新優(yōu)化了PR的免疫方式，將首免日齡調(diào)整為9周齡，4周后加免。比較了優(yōu)化后的免疫方式（C組）與原先的免疫方式（B組）的效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)16周齡開始，gE抗體陽性率C組均低于B組，22周齡時(shí)相差6.66%，gE抗體S/N均值差異顯著（P<0.05），由此可見優(yōu)化后的免疫方式對(duì)控制PRV野毒感染轉(zhuǎn)陽率更加有效。與對(duì)照組（A組）相比，C與B組gE抗體陽性率都較低，22周齡時(shí)gE抗體陽性率A組達(dá)93.33%，而C與B組僅為71.67%與78.33%；gB抗體滴度和陽性率C與B組都要高于A組，16周齡C與B組陽性率都達(dá)到100%，而A組僅為81.67%，由此可見，Bartha株疫苗對(duì)控制PRV感染仍具有良好效果，該結(jié)果與吳文福等報(bào)道的豬偽狂犬病活疫苗（Bartha株）對(duì)PRV流行毒株能夠提供良好的免疫保護(hù)是相一致的[5]。

綜上結(jié)果表明，Bartha株疫苗有助于控制PRV野毒感染豬群，參考母源抗體消長規(guī)律及PRV野毒感染時(shí)間點(diǎn)制定的免疫方式更加科學(xué)、有效。

4 結(jié)論

通過制定科學(xué)有效的免疫程序，Bartha株疫苗對(duì)現(xiàn)階段流行的PRV毒株感染仍具有保護(hù)效果。