雌激素對Min6細胞線粒體自噬的影響

李思怡，白博文，張媚，王雨佳，周鑫宇，趙玉巖

（中國醫科大學附屬第一醫院內分泌與代謝病科，沈陽 110001）

糖尿病是一種并發癥眾多，病程長的慢性疾病。胰島β細胞數量減少和功能受損從而導致胰島素分泌減少是糖尿病患者血糖升高的重要原因，因此，雌激素能夠降低糖尿病患病風險可能與其對胰島β細胞的保護作用有關。雌激素可以防止胰島β細胞凋亡，維持胰島素分泌，延緩糖尿病發病［1］。流行病學調查發現，絕經后婦女的糖尿病發病率比絕經前婦女高。多個研究［2-3］證實，雌激素替代療法可以顯著降低絕經后婦女的糖尿病患病風險。線粒體自噬既可以維持線粒體結構與功能穩定，又可以減少線粒體數量從而影響細胞存活，關于線粒體自噬對胰島β細胞影響的研究目前較為少見。本文通過研究雌激素對胰島β細胞 （Min6細胞） 線粒體自噬的影響，探討雌激素對胰島β細胞的保護作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 細胞：實驗用Min6細胞購自北京協和細胞庫。

1.1.2 試劑：RPMI 1640培養基 （美國Gibco公司），胎牛血清 （美國Gibco公司），0.25%胰蛋白酶 （美國Gibco公司），雌二醇 （美國Sigma公司），二甲基亞砜（DMSO，美國Sigma公司），Beclin-1 Antibody （英國Abcam公司），LC3B Antibody （英國Abcam公司），HSP60 Antibody（英國Abcam公司），TOM20 Antibody （英國Abcam公司），GAPDH Antibody （英國Abcam公司），辣根酶標記山羊抗兔IgG （中國中杉金橋生物技術有限公司），BCA 蛋白定量試劑盒 （中國弗德生物科技有限公司），ECL化學發光試劑盒 （中國碧云天生物技術公司）。

1.1.3 儀器：細胞培養箱 （美國Thermo公司），超凈工作臺 （中國蘇州凈化設備有限公司），透射電子顯微鏡 （日本JEOL公司），全自動酶標儀/熒光酶標儀 （瑞士Tecan公司），電泳儀 （美國Bio-Rad公司），電轉膜裝置 （美國Bio-Rad公司），圖像分析軟件 （美國Scoin Corporration）。……