牛OPU卵子體外受精和早期胚胎培養的方法研究

王志仙，朱宏波，張普，馮春濤，藺惠良，劉玉，李樹靜，余文莉

（1.石家莊天泉良種奶牛有限公司，石家莊 050200；2.北京安伯胚胎生物技術有限公司，北京 100089；3.河北天和肉牛養殖有限公司，石家莊 050200）

在牛胚胎生產中，通過經陰道超聲穿刺吸取卵泡中的卵細胞（Ovum Pick-Up：OPU）的技術，完全與體外胚胎生產技術相關聯，已成為有競爭力的、可替代超數排卵的一項技術（IVEP）[1]。據國際胚胎移植協會2016年的統計，2016年全球共生產OPU-IVP胚胎666 215枚，超過體內胚胎632 638枚的生產數量，占2016年牛胚胎生產總量的51.29%，比2015年OPU胚胎生產提高了8.73%；鮮胚及凍胚移植總量達448 113枚，占2016年移植胚胎總量的46.45%。

隨著基因組選擇技術在牛上的迅速發展，人們越來越有興趣使用OPU-IVP技術來增加每個供體的胚胎數和后代數，從而增強下一代的選擇強度。基因組選擇將DNA標記技術和基因組學整合到傳統的評價體系中，使經濟性狀的遺傳進展速度提高了一倍，縮短了世代間隔，提高了選擇準確性[2]。

自OPU-IVP技術興起以來，如何優化體外胚胎生產的各個環節，提高OPU胚胎的生產效率，一直是眾多研究的重點。本研究的目的是通過對OPU來源的卵母細胞使用不同系列的培養液培養、不同精子處理方法、不同脫顆粒細胞方法，比較其體外受精卵裂率和體外培養桑囊率，以從胚胎生產效率和操作簡便程度兩方面綜合考慮，確定適合的培養液系統和操作方法，為進一步建立完善、高效的OPU胚胎生產體系提供試驗依據。

1 材料和方法

1.1 主要儀器及設備

活體采卵操作系統（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司）；……