頭孢菌素類抗生素口服固體制劑的有關物質質量評價

梅芊，李茜，李楊，劉英

(河南省食品藥品檢驗所，鄭州 450018)

β-內酰胺類抗生素按作用機制可分為青霉素類和頭孢菌素類。1945年意大利醫學博士Giuseppe Brotzu[1]從撒丁島卡利亞里市一個污水排放口附近的海水中分離出一種真菌，定義為頂頭孢霉菌(Cephalosporin acremonium，現為Acremonium chrysogenum )。1954年牛津大學的Guy Newton和Edward Abraham從該株真菌中分離得到頭孢菌素N，1955年又從頭孢菌素N中分離出頭孢菌素C，這是第一個具有廣譜抗菌和耐青霉素酶特點的頭孢菌素，但抗菌效力較弱。1962年禮來公司的Robert Morin發現裂解頭孢菌素C上的側鏈D-α-氨基己二酸可得到7-氨基頭孢烷酸(7-ACA)，通過在其C7位上進行化學側鏈修飾可以得到更新型、更高效的頭孢菌素類抗生素。1964年第一個頭孢菌素類抗生素藥物(先鋒霉素)應用于臨床，而頭孢菌素類抗生素因其廣譜、低毒、易于給藥和良好的藥代動力學特性，成為目前使用最廣泛的抗菌藥物之一。頭孢菌素類的作用機制與青霉素類相同，主要通過干擾細菌細胞壁主要成分肽聚糖的合成而發揮抗菌作用。根據頭孢菌素類抗生素的開發年代、抗菌譜、抗菌活性、腎毒性及對β-內酰胺酶的穩定性可分為五代[2]。

2018年我省對口服頭孢菌素類抗生素藥品進行有關物質專項監督抽驗，抽得樣品共7個品種58批次。本文按檢驗標準對所有樣品進行有關物質檢查，并對結果進行分析，同時對發現的問題進行探討，為口服頭孢菌素類抗生素的有關物質分析及質量控制提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器與試劑

Waters e2695/2489液相色譜儀(美國Waters公司)，Agilent 1200液相色譜儀(美國Agilent公司)，XPE205電子天平(梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司)。甲醇、乙腈為色譜純(MERCK公司)，鹽酸、醋酸鈉、10%四丁基氫氧化銨溶液、磷酸、乙酸、磷酸氫二鈉、氫氧化鈉、磷酸二氫銨、甲酸、25%四甲基氫氧化銨溶液、乙二胺四醋酸二鈉、磷酸二氫鉀、氫氧化鉀均為分析純，水為MillQ去離子水。

1.2 樣品

頭孢氨芐對照品(130408-201411，94.4%)，雙氫苯甘氨酸對照品(130434-201403，94.7%)，7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸(130416-201006，98.5%)，α-苯甘氨酸(130415-200904，99.8%)，α-對羥基苯甘氨酸(130435-200502，99.4%)均由中國食品藥品檢定研究院提供。

58批次樣品由河南省食品藥品檢驗所監督辦抽自省內經營單位57批次、醫療機構1批次，共7個品種。按照生產企業所屬省份，覆蓋全國14個省、自治區、直轄市，共29家，有一定的抽樣代表性。具體抽樣信息見表1。

2 試驗方法

2.1 色譜條件

色譜柱為Kromasil 100-5-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)，進樣量20 μL。各品種有關物質色譜條件見表2。

2.2 標準規定

各品種供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，按表3的檢驗標準規定限值進行判定。

3 試驗結果

本次抽驗樣品中，不同企業的同一品種相同劑型樣品有關物質含量差異較小，且均遠低于標準規定限值，表明目前上市的頭孢菌素類抗生素有關物質總體情況均良好。

3.1 頭孢拉定

頭孢拉定膠囊檢出主要雜質17個，7-ADCA結果為未檢出0.01%，均值為0.03%；雜質13含量最高，均值為1.3%；雜質2～雜質6含量相對較高，均值在0.03%～0.14%之間；其余雜質含量均較低，均值不大于0.01%；不同企業間的樣品同一雜質含量差異較小。

3.2 頭孢克肟

抽驗頭孢克肟品種包含4個劑型，頭孢克肟片、膠囊、分散片有關物質標準為中國藥典2015年版二部，不同劑型樣品中均為雜質5含量最高，除雜質2外，其余雜質的含量基本無差異，見圖1。頭孢克肟咀嚼片有關物質執行標準為國家食品藥品監督管理局標準YBH02452012，共檢出14個雜質，見圖2，同一企業不同批次間結果基本一致。

表1 抽驗樣品信息

表2 有關物質色譜條件

表3 各品種有關物質標準規定限值

3.3 頭孢氨芐

抽驗頭孢氨芐片僅1批次，未檢出7-ADCA，α-苯甘氨酸含量為0.006%，其他單個雜質為0.1%，其他各雜質和為0.2%，均遠低于規定限值。

頭孢氨芐膠囊共19批次，檢出5個雜質，各企業間樣品的7-ADCA、α-苯甘氨酸、其他單個雜質及其他各雜質和含量差異較小，均遠低于標準規定限度。

3.4 頭孢呋辛酯

抽驗頭孢呋辛酯片、膠囊共檢出6個雜質，典型色譜圖見圖3，其中△3-異構體含量相對較高，且各企業間差異稍大，但均低于規定限度，△3-異構體為降解產物[13]，故其含量的差異可能與企業間不同生產工藝有關；其余雜質含量基本一致。

3.5 頭孢泊肟酯

抽驗頭孢泊肟酯片共檢出18個雜質，見圖4，雜質C+雜質B-Ⅱ的含量最高，且企業間差異較大；其余雜質含量均較低，企業間結果基本一致，差異較小。

3.6 頭孢地尼

頭孢地尼膠囊僅抽到1批次，檢出雜質G與雜質H和為0.2%，雜質I為0.1%，雜質J為0.1%，雜質M與雜質N和為0.1%，雜質Q為0.1%，雜質S為0.04%，各雜質峰面積和為0.5%，均低于規定限度。

3.7 頭孢羥氨芐

本次抽驗抽取頭孢羥氨芐片僅1批，僅檢出α-對羥基苯甘氨酸，含量為0.04%，其他雜質均未檢出。

4 討論

4.1 樣品的有關物質總體質量

按規定質量標準檢驗結果顯示，本次我省頭孢菌素類抗生素口服固體制劑的專項監督抽驗樣品有關物質情況良好。

4.2 質量標準探討

由于β-內酰胺抗生素的不穩定性及其生產工藝特點，使其有關物質的含量相對較高，種類也較多，這也是β-內酰胺抗生素產生速發型過敏或其他嚴重不良反應的主要來源，所以有關物質研究是其質量控制的重點也是難點[14]。本次抽樣有關物質測定結果顯示各品種檢出雜質數目較少，且大部分雜質的含量均遠低于標準規定限值，說明各生產廠家的生產工藝能很好地控制質量標準下規定的有關物質，對產品質量起到了一定的控制作用。但各品種的現行標準中有關物質項尚不完善，主要體現在以下幾個方面。

圖1 頭孢克肟片、膠囊、分散片的有關物質含量圖

圖2 頭孢克肟咀嚼片的有關物質含量圖

圖3 頭孢呋辛酯類制劑的有關物質含量圖

圖4 頭孢泊肟酯片的有關物質含量圖

4.2.1 色譜條件

流動相緩沖液鹽濃度高(0.2mol/L)，在做大批量樣品的評價性檢驗工作時，易造成鹽的析出，堵塞色譜系統，造成色譜柱柱壓明顯升高[15]。

4.2.2 雜質限度

國外藥典已增加對已知雜質的控制，且在限度控制方面較中國藥典更為嚴格。如BP2019中頭孢拉定[16]有關物質項下，除控制單雜、總雜外，對特定雜質A、B、C、D、E、F、G均單獨控制，而中國藥典2015年版二部中頭孢拉定[17]有關物質項僅對雙氫苯甘氨酸、7-氨基去乙酰氧基頭孢烷酸單雜和總雜進行控制，且各限值均比EP規定限值低。對原料中有關物質的嚴格控制是影響制劑中雜質水平的首要因素，從產品安全性方面考慮，建議中國藥典對頭孢拉定及其制劑中的有關物質限度進行完善和提高，收錄英國藥典中雜質A～雜質F的結構，結合該品種歷年國家藥品評價性抽驗的探索性研究結果，增加對特定雜質的定量控制。

4.2.3 質量標準的統一

個別產品未收載于藥典，同一品種不同劑型的產品質量標準不統一，如頭孢克肟分散片、膠囊劑、片劑均收載于中國藥典，而頭孢克肟咀嚼片執行國家食品藥品監督管理局局頒標準。兩個標準中有關物質的色譜條件存在差異，限度規定也不同，一定程度上增加了對該品種有關物質質量進行評價和比較的難度，不利于該品種質量水平的提高。

為更客觀地反映各品種有關物質的質量情況，并與其不良反應建立關聯，保證用藥安全，建議統一各劑型的質量標準，改進標準中有關物質的色譜系統，結合我國每年的藥品評價性抽驗相關研究內容，對各品種確定的已知雜質進一步研究并按需要寫入標準進行控制，持續提高質量標準。