馮 平,折帥帥,李 直,史 杰,王玉榮,秦凱星,張 艷
(榆林學院 生命科學學院,陜西榆林 719000)
陜北是羊傳統養殖區,羊存欄占陜西省的59.3%,其中榆林占54%。近年來,由于經濟的快速發展,人民生活水平也大幅度提高,使群眾對畜產品的消費需求也日益提高。從市場來看,羊肉的價格持續走高,羊肉的需求量日益增長,羊養殖行業也迅猛發展起來。羊寄生蟲感染也成為羊養殖業的巨大難題,特別是榆林地區羊場飼養密度大,衛生條件難于保障,寄生蟲的危害是非常大的,它以一種極隱蔽的形式消耗羊的營養,影響羊只健康,損害其繁殖性能,抑制羔羊的生長發育,降低羊產品的產量和質量,嚴重時會導致羊群大批量死亡,給養殖企業造成巨大的經濟損失。盡管采取了多種措施,也開展了驅蟲,但羊的寄生蟲感染仍然得不到解決。楊紅等[1]、岳憲志[2]、秦紹林[3]對羊寄生蟲病進行研究,發現羊寄生蟲病的危害并提出了具體的防治措施。李興如等[4]對陜西地區的羊寄生蟲感染情況開展研究,詳細介紹了陜西地區的主要羊寄生蟲感染情況,并提出了具體的驅蟲方案。有研究用不同驅蟲藥物做了相關驅蟲試驗,從常用驅蟲藥物中篩選出針對羊寄生蟲的驅蟲藥,使用這些驅蟲藥能有效地提高驅蟲效率,并簡化驅蟲工作[5-8]。因此,在常用驅蟲藥中篩選合理有效的驅蟲藥,可為羊生產的驅蟲實踐提供理論依據和技術支持。在動物生產中,畜牧業生產者使用合理有效的驅蟲藥進行驅蟲,可提高驅蟲效率,增加養殖效益,但在實際的驅蟲工作中往往會忽略寄生蟲的耐藥性問題。有關研究[9-12]針對寄生蟲對常用驅蟲藥的耐藥性進行分析,結果發現,寄生蟲普遍存在耐藥性問題,從而影響驅蟲效果。羊消化道寄生蟲主要包括線蟲、球蟲、絳蟲、吸蟲等,其中線蟲、球蟲的感染率較高。不同季節、不同年齡的羊可感染消化道寄生蟲,張艷艷等[13]、閻曉菲等[14]對羊只消化道寄生蟲的感染季節動態變化進行相關試驗,通過對寄生蟲的優勢蟲種和流行規律的研究,提高了驅蟲工作的效率。本試驗通過對陜北白絨山羊消化道線蟲的調查及驅蟲試驗,并對驅蟲后寄生蟲的動態變化進行研究,以期為陜北白絨山羊養殖中寄生蟲驅蟲計劃的制定提供參考。
1.1.1 主要藥品與試劑 伊維菌素注射液:成都中牧生物藥業有限公司(批號:220981028);伊維菌素芬苯達唑預混劑:山東圣地寶藥業有限公司(批號:150056305);芬苯達唑粉劑:湖南加農正和生物技術有限公司(批號:180191289);氯化鈉:天津市大茂化學試劑廠(批號:20180516);氫氧化鈉:天津奧普升化工有限公司(批號:20170620);碘化鉀:天津市科密歐化學試劑有限公司(批號:20180905)。
1.1.2 主要儀器 生物顯微鏡:麥克奧迪實業集團有限公司(型號:BA400Digital);恒溫培養箱:北京科偉永興儀器有限公司(型號:DH 303)。
1.2.1 試驗分組與給藥方法 選取64只陜北白絨山羊,隨機分為4 組,分別為空白飼喂組、伊維菌素注射液組、芬苯達唑粉組、伊維菌素芬苯達唑預混劑組,均為陜西省榆林市綏德縣瑞鑫養羊合作社成年母羊。空白飼喂組為正常飼喂,不進行任何驅蟲;伊維菌素注射液組:驅蟲方式為皮下注射,使用劑量為0.2 mg/kg;芬苯達唑粉組:驅蟲方式為內服,使用劑量為5~7.5 mg/kg;伊維菌素芬苯達唑預混劑組:驅蟲方式為混飼,使用劑量為1 g/kg[15]。
1.2.2 糞便采集 隨機采集試驗羊只糞便,收集于一次性塑料袋內,將袋內空氣排空,密封,置于4 ℃冰箱內備檢。
1.2.3 糞便檢查 驅蟲前,驅蟲后14 d分別對試驗動物的糞便進行線蟲蟲卵檢查及蟲卵種類鑒定;并分別于驅蟲前,驅蟲后14 d、1個月、2個月進行線蟲蟲卵檢查和蟲卵計數。
用飽和食鹽溶液漂浮法檢查被檢糞樣,得出感染率。根據蟲卵、幼蟲的大小、顏色、形態等特征,參考文獻和蠕蟲標準圖譜確定蟲卵種類[16-18],感染線蟲中感染率最高的線蟲種類確定為該羊場優勢蟲種。
用司陶爾蟲卵計數法對有線蟲蟲卵的糞樣進行蟲卵計數[18],得到感染強度結果,用每克糞便中的蟲卵數(EPG)來表示(n/g)。
1.2.4 蟲卵轉陰率、蟲卵減少率的計算 蟲卵減少率=(對照組在試驗14 d后的蟲卵數-試驗組在試驗后14 d的蟲卵數)/對照組在試驗14 d的蟲卵數×100%
蟲卵轉陰率=蟲卵轉陰動物數/試驗動物數×100%
1.2.5 消化道寄生蟲耐藥性評估 根據世界獸醫寄生蟲學促進協會對驅蠕蟲藥耐藥性的檢測方法[19],判定該羊場消化道線蟲是否存在耐藥性。
1.2.6 陜北白絨山羊消化道剖檢查找寄生蟲,并確定驅凈率 驅蟲14 d后,每組選取2只寄生蟲感染強度較小的陜北白絨山羊進行尸體剖檢,查找其消化道內線蟲,得到大概的驅凈率結果[18]。
1.2.7 驅凈率的計算 驅凈率=驅凈蟲體的動物數/全部試驗動物數×100%
通過Excel 2010軟件對驅蟲前,驅蟲后 14 d、1個月、2個月的蟲卵檢查和蟲卵計數所得數據進行整理,蟲卵計數結果表示為“平均值±標準差”。
本試驗共檢出6種線蟲,捻轉血矛線蟲(Hemonchuscontortus),食道口線蟲(Oesophagostomumspp.),毛圓線蟲(Trichostrongylussp.),仰口線蟲(Bunostomumtrigonocephalum),夏伯特線蟲(Chabertiasp.),細頸線蟲(Nematodirussp.),見圖1。

A.捻轉血矛線蟲卵;B.食道口線蟲卵;C.毛圓線蟲卵;D.細頸線蟲卵;E.仰口線蟲卵;F.夏伯特線蟲卵
通過對消化道線蟲感染率的調查可知,陜北白絨山羊消化道寄生蟲的優勢蟲種為捻轉血矛線蟲(Hemonchuscontortus)。驅蟲前,各試驗組與空白對照組的不同種類的消化道線蟲的感染率比較接近,總的感染率也均在81.25%以上,最高的感染率為空白對照組,感染率為93.75%。驅蟲后14 d,與驅蟲前相比,各試驗組的不同種類的消化道線蟲的感染率均有下降,總感染率也均有下降,其中以伊維菌素芬苯達唑預混劑組試驗組的感染率下降最大,詳見表1和表2。

表1 驅蟲前、驅蟲后14 d不同種類線蟲感染率
驅蟲14 d后,伊維菌素注射液組的蟲卵轉陰率為6.25%,芬苯達唑粉組的蟲卵轉陰率為 31.25%,伊維菌素芬苯達唑預混劑組的蟲卵轉陰率為50.00%,見表2。使用供試的3種驅蟲藥后,羊只消化道線蟲的感染率均有所下降,其中伊維菌素注射液組對消化道線蟲的蟲卵轉陰率較低,可能是由于生產中長期使用伊維菌素驅蟲導致羊只嚴重地耐藥性。

表2 陜北白絨山羊驅蟲后14 d蟲卵轉陰率
驅蟲14 d后,伊維菌素注射液組的蟲卵減少為65.00%,芬苯達唑粉組的蟲卵減少率為 84.21%,伊維菌素芬苯達唑預混劑組的蟲卵減少率為77.27%,試驗組的驅蟲驅凈率均為0,見表3。根據世界獸醫寄生蟲促進協會報道,糞便中蟲卵減少率小于95%時均為有耐藥性,而蟲卵減少率越小,耐藥性越大,表明3種試驗藥物中伊維菌素的產生的耐藥性最大,而混合藥物試驗組介于2種試驗單方藥物之間。

表3 陜北白絨山羊驅蟲后14 d蟲卵減少率及驅凈率
驅蟲1個月后陜北白絨山羊消化道線蟲的感染率及感染強度均有所上升,其中伊維菌素驅蟲組其感染率為75%,感染強度為400 n/g;驅蟲2個月后,陜北白絨山羊消化道線蟲的感染率及感染強度達到驅蟲前水平,其中伊維菌素組其感染率為87.50%,感染強度為800 n/g,詳見表4。

表4 驅蟲后1月、2月陜北白絨山羊消化道線蟲的動態變化
驅蟲1個月后,陜北白絨山羊消化道線蟲的感染率及感染強度均有所上升,但未達到驅蟲前水平,說明供試的驅蟲藥對消化道線蟲的再感染和發展仍然具有一定的抑制。驅蟲2個月后,羊只消化道線蟲的感染率及感染強度均達到甚至超過驅蟲前水平,提示在陜北白絨山羊驅蟲生產實踐中,應在春季驅蟲后2個月進行再次驅蟲,從而提高生產效率。
本試驗共計檢測出6種類型的消化道線蟲其中捻轉血矛線蟲為優勢蟲種,這與馮平等[20]的報道基本一致,其原因可能是捻轉血矛線蟲產卵遠遠多于其他消化道線蟲,具有感染性的捻轉血矛第三期幼蟲可在放牧環境中長期生存,最大生存周期長達一年半。本試驗在蟲卵檢查時檢出細頸線蟲蟲卵,而幼蟲培養時,未發現細頸線蟲三期幼蟲,其原因可能是細頸線蟲從蟲卵發育至具有感染性的第三期幼蟲約所需時間較長,且其蟲卵在4月初到10月底均可發育,在4月底到5月初只可發育出少量的第三期幼蟲,幼蟲培養時間為4月15日至25日,培養時間較短,因此沒有觀察到細頸線蟲[21]。本試驗表明該羊場陜北白絨山羊消化道線蟲感染情況較為嚴重,且多為混合感染。
現在市場上銷售的驅蟲藥種類較多,其中以伊維菌素和芬苯達唑類藥物最為常見。此次試驗選取伊維菌素注射液、芬苯達唑粉與伊維菌素芬苯達唑預混劑3種常見驅蟲藥,旨在從3種驅蟲藥中找出驅蟲效果較好的一種作為羊場的指導用藥。使用伊維菌素注射液驅蟲后蟲卵轉陰率較低,蟲卵減少率較低,伊維菌素不僅可驅除消化道寄生蟲,而且可驅殺體表寄生蟲,近年來在生產中使用率較高,從而使感染羊只的寄生蟲對伊維菌素產生了一定的耐藥性,導致生產中使用伊維菌素的驅蟲效果越來越差,這與敖登高娃[9]、王鵬龍等[10]的研究結果相似。本次試驗中檢出優勢蟲種為捻轉血矛線蟲,而該蟲種易對伊維菌素產生耐藥性,也是造成伊維菌素組蟲卵轉陰率低的可能原因,這與王瑞[12]的研究結果相符。
芬苯達唑粉也是一種廣譜、高效、低毒的驅蟲藥,可抑制蠕蟲蟲卵的孵化和發育,對蠕蟲的成蟲、幼蟲和蟲卵均具有高效的殺滅作用[16,22],試驗中單獨應用芬苯達唑粉驅蟲效果優于伊維菌素,這與周忠勇等[23]的試驗結果相似。在本次試驗中,伊維菌素芬苯達唑預混劑的驅蟲效果比2種單制劑驅蟲藥的驅蟲效果好,馮興明等[24]曾進行過相似的驅蟲試驗,得出復方制劑驅蟲效果優于單制劑驅蟲效果,這與本試驗的研究結果一致。建議驅蟲藥的后期研發中,不僅要注重單一驅蟲成分的藥品的研發,同時也要注重不同成分的組合制劑的研發,以期提高驅蟲藥生物利用度、降低寄生蟲耐藥性,確保更好的驅蟲效果,提高養殖 效益。
線蟲春季高潮顯著、秋季次之、夏季感染率最低,因此在常規的驅蟲生產計劃中,一般是1 a進行2次驅蟲,即春季驅蟲和秋季驅蟲。本試驗是在原來春季驅蟲計劃的基礎上開展春季驅蟲,并在驅蟲后對其開展動態監測,直至寄生蟲的感染率和感染強度均發展到驅蟲前水平。從驅蟲后寄生蟲發展的動態來看,驅蟲后效果明顯但其藥效持續時間較短,驅蟲2個月后線蟲感染率及感染強度均上升至驅蟲前水平。根據研究結果,建議陜北白絨山羊養殖過程中,每2個月驅蟲1次,以最大程度的減少寄生蟲帶來的危害和經濟損失。
羊場寄生蟲病是羊場疫病防治的重要內容,在羊生產中需定期進行寄生蟲感染情況檢測,其中包括感染率、感染強度、優勢蟲種的鑒別,寄生蟲感染率和感染強度達到一定水平需進行定向驅蟲。研究寄生蟲的動態變化可找到其流行規律,為確定最佳驅蟲時間及驅蟲藥物、制定科學合理的防制措施提供依據。做到預防性驅蟲,可以減少寄生蟲病對羊場造成的危害,從而有效地提高養殖場的經濟效益。