溶血和脂濁對ELIsA法檢測HBsAg 的影響分析

閆月明

【摘 要】目的：為了探索解決實際工作中ELIsA法檢測HBsAg中溶血和脂濁對ELIsA法檢測HBsAg 的影響。結論：ELISA法檢測HBsAg標本質量很重要，會直接影響檢驗結果，采血要空腹、避免溶血和脂血。從實驗結果可以看出溶血對檢驗結果有一定的影響，可以造成假陰性。脂血對ELISA法檢測HBsAg無影響。

【關鍵詞】ELIsA法;HBsAg;溶血和脂濁;影響因素

【中圖分類號】R446.6 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-8714（2020）02-00-01

乙肝是我國發病率比較高的傳染病，乙肝病毒感染人體后很難消除，HBsAg是感染乙肝病毒在人體最早出現的血清學標志物。目前，臨床用ELIsA法檢測HBsAg，因其靈敏度高，特異性強等優點而受到廣泛應用，但我們在實際工作中碰到結果前后不一致，重復性不好，花板等現象，且結果不因檢測者的改變而穩定。現對實際工作中各種影響因素，進行如下分析探討：

1 材料與方法

1.1材料 ELISA法檢測 HBsAg試劑為上海科華公司提供所有試劑均在有效期內。標準品由寧夏臨檢中心提供。

1.2標本來源 本院健康體檢各類人群368例，采集靜脈血，分離血清。

1.3方法? 嚴格按照試劑說明書進行操作，加樣量、水浴溫度、孵育時間、洗板、拍板嚴格操作規程，配置新鮮清洗液，用洗板機洗滌。可疑結果平行反復2次[1]，用標準品對本批次試劑盒進行質量控制，HBsAg陰性、陽性結果均在控。

1.4結果判斷 ELISA雙抗體夾心法檢測HBsAg在檢測線和對照線位置出現兩條紫紅色線結果為陽性，僅在對照線位置出現紫紅色線結果為陰性，試紙條上對照線位置未出現紫紅色結果為無效。

2 結果

2.1人群篩查結果368例檢測標本HBsAg，正常檢測其中陽性35例，陽性率9.5%。

2.2將未溶血無脂血標本35例陽性血樣，人為用清潔竹簽造成溶血后檢測HBsAg，出現3例假陰性，假陰性率為8.7%。

2.3讓35名陽性患者中有復查檢驗結果并且自愿配合的人復檢結果，采集到餐后脂血20份，復查陽性結果符合率為100%。

3 討論

ELISA法檢測HBsAg中溶血和脂濁是臨床檢驗中最常見的干擾因素，從實驗結果可以看出溶血對檢驗結果有一定的影響，可以造成假陰性。原因有可能是實驗中酶標反應孔因為溶血阻礙了實驗出現后帶現象，造成假陰性。脂血對ELISA法檢測HBsAg無影響。[2.3.4]

ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點，但是ELISA法易受到加樣量、反應溫度恒定、反應時間準確、洗滌徹底性等諸多因素的影響，而且操作步驟較多，整個實驗過程至少需要2h左右，在實驗前校正加樣器，保證吸樣量的精確，洗板前，應檢查洗板機針孔有無堵塞，保證孵育時間、水浴溫度穩定。

ELISA法檢測HBsAg標本質量很重要，會直接影響檢驗結果，采血時要空腹、避免溶血和脂血標本，盡量當天標本當天完成，不能完成要及早分離出血清，在冰箱保存。總之，ELISA實驗的影響因素比較多，在實際工作中要嚴格操作規范，避免各種因素的影響，以保證檢驗結果準確可靠。

參考文獻

[1] 葉應嫵， 王毓三， 申子瑜. 全國臨床檢驗操作規程， 第3版.南京：東南大學出版社， 2006，618-621.

[2] 孫正偉，薛瑞賢.酶聯免疫一步法檢測HBsAg前帶現象的初步探討.中華醫學檢驗雜志，，16（6）：279

[3] 周紅妹，黃小虎.ELISA法檢測HBsAg影響因素分析[J].中國熱帶醫學，2006，6（10）：1867 .

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