反復呼吸道感染兒童的免疫狀態與維生素A/E缺乏情況▲

陳潔琳 覃 敏 楊曉祥 譚 杰 莫榮浩 龐夏玲 馮燕華 黃麗蓮 李英喬 江蕙蕓

(廣西壯族自治區婦幼保健院/廣西壯族自治區兒童醫院1 呼吸內科，2 兒童保健科，南寧市 530002，電子郵箱：313372046@qq.com)

反復呼吸道感染是兒童常見的呼吸道疾病，占我國兒科呼吸道疾病就診原因的10%～20%[1]，其發病率較高且有逐年上升的趨勢[2]。兒童呼吸道反復感染的原因除與兒童時期呼吸道特殊解剖結構及生理功能有關外，可以還與營養狀況及免疫狀態有關。脂溶性維生素是人體代謝必不可少的營養素，其中維生素A、E對兒童的氣道發育、免疫系統、呼吸道感染等均有一定影響[3]。本研究分析反復呼吸道感染兒童的免疫狀態與維生素A、E缺乏情況，探討維生素A、E缺乏與兒童發生反復呼吸道感染的關系，為反復呼吸道感染兒童的治療及生活保健提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2017年1月至2019年12月在我院就診的100例反復呼吸道感染患兒作為觀察組，其中87例有咳嗽表現，64例有喘息，47例有鼻塞、流涕。納入標準：(1)年齡在6個月至14歲之間；(2)符合反復呼吸道感染診斷標準[4]，且兩次感染間隔時間大于7 d；(3)近1月內未服用過維生素A、E制劑，未使用免疫球蛋白及激素等藥物。排除標準：合并有其他先天性臟器發育畸形的患兒；合并免疫缺陷的患兒；早產兒；中重度營養不良、重度貧血的患兒；合并腫瘤、結核的患兒；有重大手術史的患兒。另外選取同期在門診進行體檢的80例兒童作為對照組。納入標準：(1)年齡在6個月至14歲之間；(2)近1月內無呼吸道感染癥狀，否認合并其他系統感染；(3)近1個月內未服用過維生素A、E制劑，未使用免疫球蛋白及激素等藥物。排除標準同觀察組。觀察組中男童65例、女童35例，年齡7個月至9歲7個月[1.96(1.81)歲]；對照組中男童49例、女童31例，年齡8個月至9歲5個月[2.10(1.57)歲]。兩組的年齡及性別差異均無統計學意義(均P>0.05)。所有兒童家屬均對本研究知情并簽署知情同意書，本研究獲得醫院倫理委員會批準。

1.2 相關指標的檢測方法 所有入組兒童均采集外周靜脈血2 mL，放置于普通生化管中，室溫避光保存，1 h后離心(3 500 r/min，10 min)，取上清液(至少300 μL)放置于干凈EP管中，4℃避光保存。使用安捷倫1290高效液相色譜儀(購自北京和合醫學診斷技術股份有限公司)，利用高效液相色譜法檢測維生素A、E含量；使用Cobas 8000全自動生化分析儀(購于上海羅氏公司)，利用免疫比濁法測定IgA、IgM、IgG水平；使用貝克曼FC500流式細胞分析儀，利用流式細胞技術測定T淋巴細胞亞群。

1.3 相關判斷標準

1.3.1 維生素A的分級標準[5]：0.3 mg/L≤血清維生素 A含量≤0.5 mg/L為正常；0.2 mg/L≤血清維生素A水平<0.3 mg/L為可疑亞臨床缺乏； 0.1 mg/L≤血清維生素A水平<0.2 mg/L為亞臨床缺乏；血清維生素A水平<0.1 mg/L，同時伴有干眼，為臨床型缺乏。本研究中的維生素A缺乏包括上述可疑亞臨床缺乏、亞臨床缺乏、臨床型缺乏3種類型。

1.3.2 維生素E的分級標準[5]：血清維生素E含量<5 mg/L為缺乏，5 mg/L≤維生素E含量≤7 mg/L為不足，7 mg/L<維生素E含量≤20 mg/L為正常，維生素E含量>20 mg/L為過量。本研究中的維生素E缺乏包含缺乏和不足。

1.3.3 細胞免疫功能異常：CD4+/CD8+<1.0提示細胞免疫抑制；我院檢驗科CD3+T淋巴細胞水平正常范圍為65%～79%，以<65%判定為CD3+T淋巴細胞下降。

1.4 統計學分析 采用SPSS 18.0軟件進行統計分析。符合正態分布的計量資料以(x±s)表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，如不服從正態分布則以M(Q)表示，組間比較采用秩和檢驗；計數資料以例數(構成比)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組血清維生素A、E含量和T淋巴細胞亞群及免疫球蛋白水平的比較 觀察組血清維生素A水平以及IgA、IgG、IgM、CD3+T淋巴細胞水平均低于對照組(均P<0.05)，而兩組血清維生素E含量、CD4+和CD8+T淋巴細胞水平、CD4+/CD8+比值比較，差異均無統計學意義(均P>0.05)。見表1。

表1 兩組兒童血清維生素A、E水平和T淋巴細胞亞群及免疫球蛋白水平的比較(x±s)

2.2 兩組維生素缺乏和細胞免疫功能異常的發生率的比較 觀察組維生素A缺乏、細胞免疫抑制、CD3+T淋巴細胞下降的發生率均高于對照組(均P<0.05)。見表2。

表2 兩組維生素缺乏及細胞免疫功能異常的發生率的比較[n(%)]

3 討 論

在機體的免疫功能中，T淋巴細胞及免疫球蛋白均對人體的免疫狀態具有重要影響，其中CD3+T淋巴細胞代表外周血成熟T細胞總數，其可以反映細胞免疫功能水平[6]；CD4+T淋巴細胞為輔助性T細胞(helper T cell,Th)，可分為Th1、Th2、Th17、調節性T細胞等；在Th2的輔助作用下，B細胞合成并分泌免疫球蛋白及抗體，參與免疫應答。CD4+/CD8+比值是反映機體免疫平衡狀態的指標， 當CD4+T淋巴細胞數值下降明顯大于CD8+T淋巴細胞數值時兩者比值<1.0，則提示機體處于免疫抑制狀態；當CD4+T淋巴細胞數值下降時，其轉化為各亞型細胞可能會受阻，其中Th2受到影響時，會累及產生免疫球蛋白的B細胞，從而導致IgA、IgG、IgM水平降低。 本研究中，觀察組血清IgA、IgG、IgM、CD3+T淋巴細胞水平均低于對照組，細胞免疫抑制、CD3+T淋巴細胞下降的發生率均高于對照組(均P<0.05)，提示與普通兒童相比，反復呼吸道感染兒童存在免疫失衡，機體處于免疫抑制狀態更為常見。

維生素A在胚胎發育、視力、基因表達、生殖和免疫功能中都占據重要地位，通過補充維生素A可降低發展中國家嬰幼兒的死亡風險[7]。國內研究表明，維生素A缺乏與兒童反復呼吸道感染有相關性[8-9]。本研究中，觀察組血清維生素A水平低于對照組，且維生素A缺乏發生率高于對照組(P<0.05)，這提示維生素A缺乏可能與兒童反復呼吸道感染有關，與上述研究結果相似。結合維生素A在維持正常免疫功能中的作用，以及反復呼吸道感染兒童存在免疫失衡的情況，我們推測維生素A缺乏或可引起機體免疫功能異常，而這或為導致兒童發生反復呼吸道感染的可能機制之一。有學者也發現，補充維生素A可降低呼吸道感染率，并改善反復呼吸道感染兒童的免疫功能[10]。然而本研究未能進一步分析各分型Th變化與維生素A水平的關系，今后可通過分析維生素A的缺乏對Th分型的轉化有無影響，從而更進一步探討維生素A缺乏與免疫應答的關聯點。

抗氧化是維生素E最具代表性的功能，其還通過參與紅細胞完整性的維持、血紅蛋白的合成，以及影響細胞因子的分泌及多種免疫細胞的增殖分化等，而參與免疫應答[11]。本研究中，兩組兒童的維生素E含量及維生素E缺乏發生率差異并無統計學意義(P>0.05)。分析原因主要為：維生素E缺乏的發生率在人工喂養的早產兒及低出生體重兒較高[11-12]；維生素E廣泛存在于自然界中，隨著攝入食物種類的豐富，維生素E缺乏率相對下降；本研究排除早產兒及營養不良等兒童，納入的研究對象為6月齡以上的兒童，而大于該年齡段兒童的膳食攝入種類較廣泛，故而對大部分出生發育正常兒童來說，維生素E缺乏較少見。今后在關于維生素E的研究中，建議放寬納入對象的年齡段，擴大樣本量，進一步研究維生素E攝入量與免疫功能的相關性。

綜上所述，反復呼吸道感染兒童血清維生素A水平降低且機體免疫狀態失衡，更易出現維生素A缺乏與免疫抑制；維生素A缺乏或通過影響機體的免疫狀態而導致反復呼吸道感染的發生。反復呼吸道感染為兒科常見的臨床現象，其在兒科門診就診原因中的占比逐漸增高。而根據世界衛生組織提供的數據，全球5歲以下兒童中近30%的兒童存在維生素A缺乏[13]，而挑食及偏食使兒童更容易出現維生素A缺乏，其影響機體生長發育的同時可導致免疫功能下降，進而使機體陷入反復感染的循環中。由此可見，補充維生素A對于反復呼吸道感染兒童來說刻不容緩。