長鏈非編碼RNA PCGEM1通過轉(zhuǎn)化生長因子β2/Smad2信號(hào)通路調(diào)控口腔鱗狀細(xì)胞癌侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究

翁旭 李勁松 范松

1.汕頭市中心醫(yī)院口腔科，汕頭 515031；2.中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院口腔科，廣州 510120

口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcino-ma，OSCC）是口腔癌的一種高發(fā)類型，發(fā)病率約占口腔癌的85%[1]，具有發(fā)病迅速、轉(zhuǎn)移率高等特點(diǎn)[2]，但發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確。癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜過程，也是導(dǎo)致治療失敗和死亡的主要原因之一，因此尋找新的治療靶點(diǎn)尤為迫切。長鏈非編碼RNA（long-chain noncoding RNA，lncRNA）是一類不編碼蛋白的RNA分子，長度介于200～100 000 nt[3]。研究[4]表明，lncRNA在腫瘤細(xì)胞周期、侵襲轉(zhuǎn)移及化療耐藥等相關(guān)的信號(hào)通路方面均發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，其作用類似于癌基因或抑癌基因。lncRNA PCGEM1是一種在前列腺癌細(xì)胞中特異性高表達(dá)的lncRNA，可促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的增殖和遷移[5]。目前關(guān)于lncRNA PCGEM1在OSCC中的作用研究報(bào)道甚少，本研究探討lncRNA PCGEM1對(duì)OSCC細(xì)胞增殖侵襲及遷移的影響。

1 材料和方法

1.1 組織標(biāo)本

收集2016年6月—2018年3月于汕頭市中心醫(yī)院接受手術(shù)治療的80例OSCC患者的癌組織及距離癌組織超過2 cm處的正常組織，用以上組織構(gòu)建組織芯片免疫組織化學(xué)染色，80例患者的組織標(biāo)本中有20例出現(xiàn)了不同程度缺失，剩余60例經(jīng)組織病理學(xué)檢測(cè)證實(shí)為原發(fā)性O(shè)SCC，納入本研究。60例患者年齡36～75歲，中位年齡53歲。所有患者均同意本研究并簽署知情同意書，且經(jīng)汕頭市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)后收集標(biāo)本。

1.2 細(xì)胞及主要試劑和儀器

人正常口腔黏膜上皮細(xì)胞（oral mucosa epithelial cell，OMEC）及人源OSCC細(xì)胞株KB、BcaCD885、SCC-4、CAL27、SCC-15均購自美國模式培養(yǎng)物保藏所（American Type Culture Collection，ATCC）。

DMEM培養(yǎng)基、SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR）檢測(cè)試劑盒（TOYOBO公司，日本），Trizol 試……