蟲草素對人肝癌細胞遷移及侵襲的機制研究

李輝，劉登湘，韓翠平

（邢臺市人民醫院 1. 肝膽外科，2. 放療科，3. CT 室，河北 邢臺 054031）

肝癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，具有惡性程度高、進展迅速、高病死率等特點，在惡性腫瘤中，肝癌的病死率居第2 位[1]。隨著醫療條件的改善，肝癌患者生存率得到較大幅度的提高，但是其高轉移率和高復發率成為腫瘤治療的最大障礙[2]。癌細胞轉移過程是多基因參與調控的復雜過程，該過程涉及基因的異常表達和相關信號傳導通路的異常激活[3]。蟲草素即3'- 脫氧腺苷，是北冬蟲夏草和冬蟲夏草的主要活性成分。蟲草素具有廣泛的藥理作用，如抑菌、抑制蛋白激酶活性、抑制病毒等[4-5]。研究顯示，蟲草素能通過激活AMPK 信號通路抑制耐藥性非小細胞肺癌進展[6]。還有文獻報道，蟲草素可通過激活AMPK 和抑制AKT 信號通路增強膠質瘤細胞對替莫唑胺的化學敏感性。提示蟲草素具有抗腫瘤作用[7]。本文觀察蟲草素對肝癌細胞遷移和侵襲的影響，并對其作用機制進行探討，為肝癌的治療提供新的理論依據。

1 材料與方法

1.1 細胞、試劑及儀器

人肝癌細胞株Bel-7402 購自中國科學院上海細胞庫。胰酶、胎牛血清（FBS）和RPMI 1640 培養基（美國Gibco 公司），甲基噻唑基四唑（MTT）和蟲草素（美國Sigma 公司），二甲基亞砜（DMSO）（國藥集團），GAPDH、ERK、p-ERK、EGFR、p-EGFR、MMP-2 和MMP-9 抗體（美國CST 公司），聚合酶鏈反應引物由生工生物工程（上海）股份有限公司設計合成，SYBY Green PCR Kit（大連TaKaRa 公司），Infinite M200 酶標儀（美國Tecan 公司），GE-680 凝膠成像儀（美國Bio-Rad 公司）。

1.2 實驗方法

1.2.1 MTT 法檢測蟲草素對細胞活力的影響取對數生長期的模型細胞，以每孔7×103個細胞接種于96 孔板中。……