乙拉西坦對(duì)癲癇患者血清HMGB1 GFAP水平的影響

劉文靜 劉 博 王夏紅

鄭州市第二人民醫(yī)院，河南 鄭州 450000

癲癇是由于大腦神經(jīng)異常引起的短暫性大腦功能失調(diào)綜合征，具有反復(fù)發(fā)作特點(diǎn)，發(fā)病率較高，是臨床常見的神經(jīng)內(nèi)科疾病，在神經(jīng)疾病中高居第二位，癲癇患者會(huì)引起認(rèn)知功能障礙，造成認(rèn)知相關(guān)指標(biāo)異常表達(dá)；且會(huì)伴有細(xì)胞因子包括淋巴因子和單核因子水平升高，且隨著疾病嚴(yán)重程度的增加，細(xì)胞因子水平升高，因此控制細(xì)胞因子水平可以對(duì)疾病起到一定的控制作用；另外癲癇患者通常會(huì)伴有免疫功能紊亂，且會(huì)產(chǎn)生炎性反應(yīng)[1-3]。高遷移率組蛋白1(HMGB1)是一類非組蛋白染色體結(jié)合蛋白，在腦發(fā)育過(guò)程中起到重要作用，可以調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞出芽和遷移，參與多種炎性疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，研究顯示癲癇患者血清中HMGB1水平會(huì)升高[4-5]。神經(jīng)元損害在癲癇的發(fā)生過(guò)程中具有重要參與作用，且常會(huì)引起相關(guān)因子表達(dá)異常，在星形膠質(zhì)細(xì)胞過(guò)度活化時(shí)，膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)水平會(huì)升高，從而引起神經(jīng)元異常興奮，是星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性的標(biāo)志物，可直觀反映神經(jīng)元狀態(tài)，是癲癇的誘因之一[6-7]。丙戊酸鈉是γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抑制劑，可以有效控制γ-氨基丁酸的代謝，從而達(dá)到控制癲癇的病灶放電作用，其是治療癲癇常用藥物，但長(zhǎng)期使用易損傷肝腎功能[8]；左乙拉西坦是吡咯烷酮衍生物，可控制神經(jīng)元異常放電，但不會(huì)損傷正常的神經(jīng)元，對(duì)神經(jīng)元具有較好的保護(hù)作用，是臨床常用的抗癲癇藥，可改善患者認(rèn)知功能，在癲癇發(fā)作中控制效果良好，且不影響患者肝腎功能[9]，但其對(duì)HMGB1和GFAP表達(dá)的影響尚不明確，因此該研究探討左乙拉西坦對(duì)癲癇患者血清HMGB1、GFAP水平的影響。

1 資料與方法

1.1基本資料選擇2019-02—2020-06鄭州市第二人民醫(yī)院治療的50例癲癇患者，男27例，女23例，年齡(25.9±7.8)歲；病程(6.4±1.0)a；復(fù)雜部分性發(fā)作25例，部分性發(fā)作繼發(fā)全身性發(fā)作14例，其他11例。將所選患者隨機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，各25例。排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡<16歲；病程<1 a；發(fā)病頻率<1次/月；伴心肝腎等基礎(chǔ)疾病；患有神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者。2組患者基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。本研究獲得本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)，且所有患者均已簽訂知情同意書。

表1 2組患者基本資料比較Table 1 Comparison of basic data of patients in 2 groups

1.2方法對(duì)照組給予丙戊酸鈉5～10 mg/(kg·d)的基礎(chǔ)上每周劑量增加5 mg/kg，劑量增至20～30 mg/(kg·d)時(shí)停止增加并維持該劑量。觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上給予左乙拉西坦10 mg/(kg·d)的基礎(chǔ)上每周劑量增加10 mg/kg，劑量增至20～40 mg/(kg·d)時(shí)停止增加并維持該劑量。2組患者均治療6個(gè)月。

1.3觀察參數(shù)(1) 評(píng)價(jià)臨床療效[10]：評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：顯效：治療期間內(nèi)腦電圖改善明顯且無(wú)復(fù)發(fā)作情況；有效：腦電圖有改善，發(fā)作頻率低于50%，且發(fā)作時(shí)間縮短較明顯；無(wú)效：未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)。總有效率包括有效率和顯效率。(2)檢測(cè)認(rèn)知狀態(tài)相關(guān)參數(shù)、血清中細(xì)胞因子、神經(jīng)膠質(zhì)酸性蛋白(GFAP)和高遷移率組蛋白1(HMGB1)認(rèn)知狀態(tài)相關(guān)參數(shù)包括腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)和髓鞘堿性蛋白(MBP)；淋巴因子包括白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-4和IL-10；單核因子包括腫瘤壞死因子(TNF-α)、IL-6和IL-8。分別于治療前和治療后24 h采取患者空腹靜脈外周血，3 000 r/min離心后取上清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)認(rèn)知狀態(tài)相關(guān)參數(shù)、淋巴因子、單核因子、GFAP和HMGB1。(3)評(píng)價(jià)治療期間不良反應(yīng)發(fā)生情況。

2 結(jié)果

2.1 2組療效比較2組總有效率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2、圖1。

表2 2組療效比較 [n(%)]Table 2 Comparison of curative effect of 2 groups [n(%)]

2.2治療前后2組患者認(rèn)知狀態(tài)相關(guān)參數(shù)水平變化情況比較治療前對(duì)照組和觀察組患者血清中BDNF和MBP水平均無(wú)差異(P>0.05)；治療后2組BDNF水平升高，MBP水平降低，觀察組升高或降低幅度均大于對(duì)照組(P<0.05)。見表3。

2.3治療前后2組患者血清中淋巴因子水平變化情況比較治療前2組淋巴因子水平比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，治療后觀察組與對(duì)照組相比降低幅度更大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

圖1 2組臨床療效Figure 1 Clinical efficacy of 2 groups

表3 2組治療前后認(rèn)知狀態(tài)參數(shù)水平變化比較Table 3 Comparison of changes in cognitive status parameters before and after treatment in the 2

表4 2組治療前后淋巴因子水平變化比較Table 4 Comparison of changes in lymphokine levels before and after treatment in the 2

2.4治療前后2組患者血清中單核因子水平變化情況比較治療前對(duì)照組和觀察組單核因子TNF-α、IL-6和IL-8水平均無(wú)較大差異(P>0.05)；治療后2組單核因子水平均降低，且觀察組降低幅度較對(duì)照組明顯，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

2.5治療前后2組血清GFAP和HMGB1水平變化情況比較治療前2組患者血清GFAP和HMGB1水平無(wú)差異(P>0.05)；治療后2組均降低，且觀察組降低幅度大于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表6和圖2。

表5 2組治療前后單核因子水平變化比較Table 5 Comparison of changes in monocyte factor levels before and after treatment in the 2

表6 2組患者治療前后血清中GFAP和HMGB1水平變化比較Table 6 Comparison of changes in serum GFAP and HMGB1 levels before and after treatment in the 2

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05圖2 2組患者治療后血清中GFAP和HMGB1水平比較Figure 2 Comparison of serum GFAP and HMGB1 levels after treatment in the two groups

2.6 2組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較2組患者治療期間總不良反應(yīng)發(fā)生率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表7。

表7 2組不良反應(yīng)情況比較Table 7 Comparison of adverse reactions in the 2 groups

3 討論

左乙拉西坦屬于吡咯烷酮類衍生物，是抗癲癇的新型藥物，其具有與傳統(tǒng)抗癲癇藥物不同的作用機(jī)制，左乙拉西坦與中樞神經(jīng)突觸囊泡蛋白親和力較高，其可與該蛋白結(jié)合，阻斷神經(jīng)元N型通道，阻礙海馬體的神經(jīng)回路，使腦皮層GABA受體減少，減少負(fù)性變構(gòu)調(diào)節(jié)劑對(duì)神經(jīng)元的抑制作用，進(jìn)而保護(hù)中樞神經(jīng)，起到抗癲癇的作用[11-12]。有研究顯示左乙拉西坦可提高患者認(rèn)知功能，且能保護(hù)神經(jīng)免受損傷，從而發(fā)揮抗癲癇作用[13]。本研究顯示，觀察組治療總有效率比對(duì)照組明顯增高，且不良反應(yīng)稍低，提示左乙拉西坦治療癲癇可以提高臨床療效。

癲癇會(huì)降低患者的認(rèn)知功能，因此認(rèn)知功能相關(guān)指標(biāo)的水平也會(huì)發(fā)生變化。BDNF可以促進(jìn)神經(jīng)元活性及生長(zhǎng)，而癲癇患者的BDNF水平較低，其對(duì)神經(jīng)元受損后的保護(hù)和修復(fù)作用會(huì)降低，因此提升BDNF水平有助于提高患者的認(rèn)知功能[14]。MBP作為髓鞘組織的重要組成部分，位于髓鞘膜的表面，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損時(shí)，其會(huì)被釋放入血，可直接反應(yīng)神經(jīng)功能的受損程度[15]。星形膠質(zhì)細(xì)胞參與了癲癇的生理及病理過(guò)程，活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞可以分泌多種因子起到保護(hù)神經(jīng)元的作用，使細(xì)胞外的K+濃度處于相對(duì)穩(wěn)態(tài)，維持神經(jīng)元電活動(dòng)正常，具有抗癲癇作用，但當(dāng)星形膠質(zhì)細(xì)胞受損而過(guò)度活化時(shí)，會(huì)損傷其調(diào)節(jié)K+穩(wěn)態(tài)的作用，致使神經(jīng)元異常興奮，導(dǎo)致癲癇反復(fù)發(fā)作，而GFAP是星形膠質(zhì)細(xì)胞的特征性標(biāo)記物，其水平越高表明患者認(rèn)知功能受損程度越嚴(yán)重。星形膠質(zhì)細(xì)胞保護(hù)神經(jīng)功能的作用機(jī)制之一可能是其數(shù)量和形狀的改變[16]。左乙拉西坦具有保護(hù)神經(jīng)免受損害的作用，可能是抗癲癇的作用機(jī)制之一。另外左乙拉西坦是吡咯烷酮類衍生物，主要作用靶點(diǎn)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的突觸囊泡蛋白2A，其作用機(jī)制受γ-氨基丁酸受體的敏感性影響。左乙拉西坦可有效的將Na+通道阻斷，并部分阻斷Ca2+通道，是癲癇樣放電指數(shù)降低，并將放電持續(xù)的時(shí)間縮短，有效控制癲癇發(fā)作[17]。有研究表明可以通過(guò)控制GFAP水平實(shí)現(xiàn)改善患者認(rèn)知功能、抑制癲癇發(fā)作的作用。本研究顯示觀察組認(rèn)知狀態(tài)相關(guān)參數(shù)均優(yōu)于對(duì)照組，說(shuō)明左乙拉西坦可以改善癲癇患者認(rèn)知狀態(tài)。

機(jī)體炎癥與癲癇的發(fā)生、發(fā)展具有一定的關(guān)系，炎癥反應(yīng)會(huì)破壞血腦屏障，這可能是癲癇發(fā)病的病理基礎(chǔ)[18]。神經(jīng)元的異常放電會(huì)誘導(dǎo)腦細(xì)胞合成并分泌多種細(xì)胞因子，包括淋巴因子和單核因子，可以對(duì)神經(jīng)介質(zhì)產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響腦細(xì)胞的功能和狀態(tài)，且細(xì)胞因子在神經(jīng)系統(tǒng)的分泌和修復(fù)過(guò)程具有一定的作用，可以直接反映癲癇引起的認(rèn)知功能障礙，IL-2會(huì)使神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加，IL-6會(huì)使細(xì)胞膜去極化，TNF-α可以使谷氨酸興奮性神經(jīng)遞質(zhì)興奮增加，并使神經(jīng)元的興奮性提高[19]。左乙拉西坦可以對(duì)免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)控，降低谷氨酸興奮，降低細(xì)胞因子水平，減輕神經(jīng)元的損傷，使炎癥反應(yīng)有所緩解[20]。本研究結(jié)果中觀察組治療后細(xì)胞因子水平均降低，表明左乙拉西坦可以有效改善炎性反應(yīng)，提高免疫功能。

HMGB1與癲癇的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程有密切關(guān)系，可作為損傷細(xì)胞應(yīng)激狀態(tài)時(shí)表達(dá)的“危險(xiǎn)信號(hào)”，提示機(jī)體所處微環(huán)境比較危險(xiǎn)，致癇灶中神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞變性會(huì)導(dǎo)致HMGB1大量釋放，與細(xì)胞膜上受體TLR2、TLR4、RAGE、活化的COX-2和NK-κB結(jié)合從而誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)[21]。HMGB1-TLR4通路介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)會(huì)影響絡(luò)氨酸激酶調(diào)節(jié)的磷酸化作用，致使Ca2+大量釋放，引起神經(jīng)元異常放電，達(dá)到閾值時(shí)則會(huì)引起癲癇發(fā)作[22]。左乙拉西坦可以通過(guò)活化TLR4進(jìn)而激活NK-κB信號(hào)通路，降低神經(jīng)元凋亡，發(fā)揮抗癲癇作用[23]。本研究顯示觀察組治療后HMGB1水平明顯降低。

左乙拉西坦治療癲癇可以提高臨床療效，改善患者認(rèn)知功能，減輕炎癥反應(yīng)，提高免疫功能，并能降低血清HMGB1和GFAP水平，不良反應(yīng)發(fā)生率較低。