彭書旺,陳露陽
(湖南中醫藥大學第一附屬醫院 胃腸甲狀腺血管外科,湖南 長沙 410007)
甲狀腺癌是最常見的惡性腫瘤之一,居惡性腫瘤發病率的第7位,在女性中居第4位,是增長最快的惡性腫瘤之一[1-3]。甲狀腺癌術后預后較好,但仍有約30%患者出現復發轉移,因此探索甲狀腺癌復發轉移的機制具有重要意義[4-5]。MIR31HG 在不同癌癥中作用不同,YANG 等[6]發現MIR31HG 在胰腺導管癌中發揮促癌作用。而YAN 等[7]發現MIR31HG 在肝細胞癌中發揮抑癌作用。目前尚未有研究報道MIR31HG在甲狀腺癌中的作用。本研究擬通過臨床資料分析及體外實驗研究MIR31HG 在甲狀腺癌中的作用機制。
選取2018年8月—2019年4月在湖南省中醫藥大學第一附屬醫院行甲狀腺癌根治術的48例患者的新鮮癌組織及癌旁組織標本,男女各24例。人永生化正常甲狀腺細胞系Nthy-ori 3-1、人甲狀腺乳頭狀癌(papillary carcinoma of thyroid,PTC)細胞系TPC-1、K1及BCPAP 由湖南省中醫藥大學基礎醫學院實驗室饋贈,Trizol RNA 提取試劑、RNA 保護液及轉染試劑Lipofectamine 2000 均購自美國Thermo Fisher公司,RNA 逆轉錄試劑盒購自北京全式金生物技術有限公司,qRT-PCR 試劑盒購自上海翊圣生物科技有限公司,BCA 法蛋白濃度檢測試劑盒購自上海碧云天生物技術有限公司,PTEN 抗體(ab32199)購自美國Abcam公司,pan-Akt 抗體(#4685)、p-Akt(Ser473)抗體(#4060)購自美國Cell Signaling Technology公司,內參GAPDH(10494-1-AP)抗體、鼠二抗及兔二抗購自美國Proteintech公司,RPMI 1640 無血清培養基及FBS 購自以色列Biological Industries公司,lncRNA MIR31HG 小干擾RNA 序列及對照序列由廣州銳博生物技術有限公司合成,lncRNA MIR31HG 引物及內參Actin 引物由上海生工生物工程股份有限公司合成。
1.2.1 數據庫分析筆者利用GEPIA 在線數據庫(http://gepia.cancer-pku.cn)分析lncRNA MIR31HG 在各種癌癥及甲狀腺癌中的表達?!?br>