二年殘孔菌菌絲體黃酮提取工藝的研究

魯 鐵，尚浩樂，徐海江，孫冰冰，伍燁菱，張向陽，陳懷中，江 行，郭茗睿，姬曉娜

(1.河南城建學院 生命科學與工程學院，河南 平頂山 467036；2.平頂山健康食品協同創新中心，河南 平頂山 467036)

二年殘孔菌隸屬于擔子菌門、傘菌綱、多孔菌目、皺孔菌科、殘孔菌屬，多生在蘋果樹、楓楊、櫟以及一些闊葉樹上，全世界廣布種[1]。二年殘孔菌應用領域廣泛，子實體擁有多種生理活性物質。國內學者研究表明，該真菌含有抑制腫瘤細胞增殖和胰蛋白酶作用的生物酶類[2]，對腫瘤細胞的凋亡具有一定的誘導作用[3]，且在染料合成[4]、工業脫色[5]等方面具有較大的開發潛力。目前報道對二年殘孔菌的研究主要側重于化學成分及功效、發酵條件的研究，對其活性物質黃酮的提取工藝及優化尚未見報道。黃酮類化合物能夠抵抗心律失常和改善冠脈循環，還能夠促進胰島B細胞的恢復，降低血糖和血清膽固醇，改善糖耐量，調節對抗腎上腺素的升血糖作用[6-7]。天然來源的黃酮類化合物是拓寬生藥資源的潛在產物。

以二年殘孔菌發酵獲得菌絲體為實驗材料，利用超聲輔助醇提法[8]提取其總黃酮，之后采用硝酸鋁比色法，以蘆丁標準液作為參考，測量提取液在510 nm處的吸光值，利用測得的吸光值繪制蘆丁標準曲線，進而計算出黃酮類化合物的含量，并探究超聲提取時間、乙醇溶液的濃度和料液比這三個單因素對提取實驗的影響，之后利用響應面分析[9]優化確定其最佳的提取條件。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 菌株