馬博,卜三平,劉鴿
(1.巴音郭楞職業技術學院,庫爾勒 841000;2.新疆維吾爾自治區畜牧總站,烏魯木齊 830000)
奶牛乳房炎與蹄病、酮病并稱為奶牛場三大常見疾病[1~5],而乳房炎是危害奶牛場發展的三大疾病之首。奶牛乳房炎給奶牛場的生產工作帶來嚴重影響,并存在危害人們健康的危險,防治奶牛乳房炎是一項非常重要的工作。引起奶牛乳房炎的原因是多方面的[6~12],其中病原微生物感染是主要原因[13],引發奶牛乳房炎的主要致病菌有兩類:一類是接觸傳染性致病菌,主要包括鏈球菌、金黃色葡萄球菌、支原體、牛棒狀桿菌等[14];一類是環境性病原菌,主要是一些革蘭氏陰性菌,如大腸埃希桿菌、腸道桿菌、停乳鏈球菌、糞腸球菌等[15]。引起奶牛乳房炎的致病菌有上百種,其中最常見的是大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌[16]。本試驗主要對從某規模化奶牛場采集的乳樣進行了大腸桿菌的分離鑒定,目的是為后續治療試驗做好準備。
1.1.1 樣品來源
在新疆石河子地區的某規模化奶牛場進行了乳房炎流行病學調查,調查發現部分臨床型乳房炎奶牛和隱性乳房炎奶牛,選擇12頭臨床型乳房炎奶牛的20個患乳區乳樣和12頭隱性乳房炎奶牛的16個患乳區乳樣進行細菌分離與鑒定。
1.1.2 主要試劑
瓊脂糖、革蘭氏快速染色液、Taq DNA聚合酶、DL-2000 DNA Marker(購自TaKaRa有限公司,大連);細菌基因組DNA提取試劑盒(引物由北京睿博興科生物技術有限公司完成);強力霉素(DO)、青霉素(P)、林可霉素(CD)、阿洛西……