理肺湯對(duì)哮喘患者血清Th1/Th2細(xì)胞平衡和炎癥因子的影響*

海南省中醫(yī)院

呂佳杰 周明萍 (海口 570203)

提要 目的：研究理肺湯對(duì)哮喘患者血清Th1/Th2細(xì)胞平衡和炎癥因子的影響。方法：選取2016年7月至2018年3月在我院診治的64例支氣管哮喘患者，隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，每組32例。對(duì)照組患者接受常規(guī)哮喘治療，觀察組患者在此基礎(chǔ)上加用理肺湯。比較2組患者治療前后血清中白細(xì)胞介素-4(IL-4)、干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)和白細(xì)胞介素-10(IL-10)的含量及Th1/Th2細(xì)胞平衡指數(shù)。結(jié)果：2組患者治療前各項(xiàng)指標(biāo)差異無顯著性(P>0.05)。治療后，觀察組患者的IL-4濃度顯著低于對(duì)照組，而IFN-γ顯著高于對(duì)照組(均P<0.05)，Th1/Th2細(xì)胞平衡指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；觀察組患者的IL-2顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而IL-5則顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，但2組患者治療后的IL-10濃度差異無顯著性(P>0.05)。結(jié)論：理肺湯能夠有效調(diào)節(jié)支氣管哮喘患者Th1/Th2細(xì)胞平衡，對(duì)與B細(xì)胞相關(guān)的免疫功能亦具有較好的改善作用。

支氣管哮喘是常見的呼吸科疾病，由多種炎性細(xì)胞參與，以氣道高反應(yīng)和肺部炎癥及氣道重塑等為主要病理變化的慢性炎性氣道疾病。[1]免疫調(diào)劑功能失衡如Th1/Th2失衡、免疫過激等被認(rèn)為是支氣管哮喘重要的發(fā)病機(jī)制之一。[2]中醫(yī)中藥治療已被證實(shí)在多種免疫調(diào)劑相關(guān)疾病中有較好的療效[3]，因此進(jìn)一步研究中醫(yī)中藥對(duì)支氣管哮喘患者免疫功能的調(diào)節(jié)，能夠?yàn)橹夤芟木C合治療提供新的思路。本次研究采用的理肺湯是根據(jù)大量臨床實(shí)踐總結(jié)得出，研究其對(duì)支氣管哮喘患者Th1/Th2細(xì)胞平衡及其他炎癥因子的影響，為該方在臨床治療支氣管哮喘的進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供依據(jù)。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2016年7月至2018年3月在我院就診治療支氣管哮喘的患者共64例，采用隨機(jī)數(shù)表原則將患者分為對(duì)照組和觀察組，每組各32例。其中對(duì)照組患者男16例、女16例，年齡20～67歲、平均(35.05±9.12)歲，病程5～25年、平均(10.3±6.2)年；觀察組患者男18例、女14例，年齡18～66歲、平均(34.67±9.96)歲，病程2～25年、平均(9.6± 6.3)年。2組患者的性別、年齡、病程等一般資料比較，差異無顯著性(P>0.05)，具有可比性。本次研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)我國《支氣管哮喘防治指南(2016年版)》中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。[4]以反復(fù)發(fā)作喘息、氣急、胸悶或咳嗽為主要臨床表現(xiàn)；查體：雙肺可聞及散在或彌漫性，且以呼氣相為主的哮鳴音，呼氣相延長；上述癥狀及體征可經(jīng)治療緩解或自行緩解；若臨床癥狀不典型，需至少具備以下任意1項(xiàng)試驗(yàn)陽性：⑴支氣管激發(fā)試驗(yàn)或運(yùn)動(dòng)激發(fā)試驗(yàn)陽性；⑵呼氣流量峰值(PEF)日內(nèi)(或2周)波動(dòng)率≥20%；⑶支氣管舒張?jiān)囼?yàn)陽性，第1秒用力呼氣容積(FEV1)增加≥12%，且 FEV1 增加絕對(duì)值≥200 mL。

1.2.2 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn):按照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[5]制定。主要癥狀：有發(fā)作性痰鳴氣喘，且發(fā)作時(shí)喉中哮鳴有聲、呼吸困難。次要癥狀：咳嗽咳痰、時(shí)有噴嚏、流涕、噯氣、乏力等。

1.3 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴患者需符合上述相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且目前處于慢性期；⑵性別不限，年齡在18～70歲；⑶患者愿意加入本次研究并簽署知情同意書。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴患者為哮喘急性發(fā)作期；⑵其他疾病所引起的喘息、氣急、胸悶和咳嗽；⑶合并有其他器官系統(tǒng)嚴(yán)重疾病、惡性腫瘤者；⑷合并有其他肺部疾病；⑸近6個(gè)月有中藥服用史者；⑹妊娠或處于哺乳期女性；⑺對(duì)所有藥物有過敏史者；⑻存在認(rèn)知障礙或精神疾病者。

2 治療方法

2.1 對(duì)照組 采用常規(guī)哮喘治療，包括相對(duì)應(yīng)級(jí)別劑量的糖皮質(zhì)激素、必要時(shí)支氣管擴(kuò)張劑等。

2.2 觀察組 在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上加用理肺湯。理肺湯組成為：生黃芪15 g，桂枝、白術(shù)各9 g，紫菀、五味子各6 g，茯苓12 g，干姜、肉桂、木香、厚樸、甘草各9 g，砂仁6 g。加減：氣虛甚者加黨參10 g，黃芪增至30 g；陰虛甚者加沙參、麥冬各10 g，女貞子15 g；若氣陰兩虛者加太子參15 g，山茱萸10 g，五味子增至12 g；表證甚者加炙麻黃6 g，桑葉、連翹各10 g；伴肝氣郁結(jié)甚者加桑白皮10 g，黛蛤散6 g(包煎)，木蝴蝶10 g；伴痰濕內(nèi)盛者厚樸增至15 g，加白芥子6 g；伴痰熱明顯者加全瓜蔞15 g，膽南星6 g；伴血瘀甚者加赤芍、紅花各10 g。每日1劑，加入500 mL水中煎煮2次至200 mL,分早、中、晚3次分服，連續(xù)服用7 d為1個(gè)療程。2組均連續(xù)治療1月。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析。計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)(率)的形式表示，組間采用卡方檢測進(jìn)行比較；計(jì)量資料經(jīng)正態(tài)分布和方差分析后，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示，組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，配對(duì)資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。P<0.05為差異有顯著性。

3 療效觀察

3.1 觀察項(xiàng)目 抽取患者空腹靜脈血3 mL，采用高速離心法(1 500 r/min，10 min)分離血清和血細(xì)胞，提取血清。采用酶聯(lián)免疫吸附法，檢測血清中白細(xì)胞介素-4(IL-4)、干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-5(IL-5)和白細(xì)胞介素-10(IL-10)的濃度。IL-4濃度檢測采用人白介素4 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(武漢伊萊瑞特生物科技有限公司)；IFN-γ采用人干擾素-γ ELISA檢測試劑盒[研域(上海)試劑有限公司]；IL-2采用人白細(xì)胞介素-2 ELISA試劑盒(南京森貝伽生物科技有限公司)；IL-5采用人白介素-5 ELISA定量檢測試劑盒(上海研生生化試劑有限公司)；IL-10采用人白介素ELISA檢測試劑盒(上海一研生物科技有限公司)。比較2組患者治療1個(gè)月后上述指標(biāo)，同時(shí)計(jì)算IFN-γ/IL-4為Th1/Th2細(xì)胞平衡指數(shù)進(jìn)行比較。

3.2 治療結(jié)果

3.2.1 2組患者治療前后Th1/Th2細(xì)胞平衡情況比較：2組患者治療前IL-4、IFN-γ以及Th1/Th2細(xì)胞平衡指數(shù)差異無顯著性(P>0.05)。治療后，觀察組患者的IL-4濃度顯著低于對(duì)照組，而IFN-γ顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，觀察組的Th1/Th2細(xì)胞平衡指數(shù)則顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。詳見表1。

表1 2組患者治療前后Th1/Th2細(xì)胞平衡(IFN-γ/IL-4)情況

3.2.2 2組患者治療前后炎癥因子情況：2組患者治療前IL-2、IL-5和IL-10濃度差異無顯著性(P>0.05)。治療后，觀察組患者的IL-2顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而IL-5則顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，但2組患者治療后的IL-10濃度差異無顯著性(P>0.05)。詳見表2。

表2 2組患者治療前后炎癥因子比較

4 討論

支氣管哮喘是由多種細(xì)胞(主要包括淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞等)參與的以氣道慢性炎癥為主要特質(zhì)的疾病，與氣道高反應(yīng)性相關(guān)。多表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的喘息、氣促、胸悶、咳嗽等癥狀，可自行緩解或經(jīng)治療后緩解。但若診治不及時(shí)，病程遷延可導(dǎo)致氣道不可逆性的縮窄和氣道重塑。[6-7]對(duì)于支氣管哮喘的治療，以長期吸入性糖皮質(zhì)激素治療為基礎(chǔ)，急性發(fā)作時(shí)采用beta2激動(dòng)劑使支氣管平滑肌松弛緩解癥狀。[8-9]此外，消除病因及誘發(fā)因素、對(duì)肌體的免疫功能進(jìn)行調(diào)節(jié)等都是支氣管哮喘綜合治療中重要途徑。[10]中醫(yī)中藥在調(diào)節(jié)患者免疫功能上發(fā)揮了較大的作用。已有大量研究證實(shí)，中醫(yī)中藥對(duì)小兒腦癱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、特應(yīng)性皮炎等疾病的免疫調(diào)節(jié)治療有著積極作用。[11-13]因此，深入探討中醫(yī)中藥在支氣管哮喘綜合治療中的應(yīng)用意義重大。

既往研究發(fā)現(xiàn)，Th1/Th2的失衡可能是導(dǎo)致支氣管哮喘嚴(yán)重程度的關(guān)鍵因素。[14]黃偉強(qiáng)等人的研究表明，在支氣管哮喘患者中外周血Th1/Th2亞群細(xì)胞比例有顯著下降。[15]IFN-γ是Th1亞群細(xì)胞分泌的特異性細(xì)胞因子，能促進(jìn)Th1細(xì)胞的分化，從而抑制Th2細(xì)胞相關(guān)因子的釋放及IgE的生成，減輕氣道炎癥。[16]而IL-4是Th2亞群分泌的細(xì)胞因子，并能誘導(dǎo)Th2細(xì)胞分化，刺激B淋巴細(xì)胞增殖以產(chǎn)生IgG和IgE，并介導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞的黏附分子的表達(dá)，導(dǎo)致嗜酸粒細(xì)胞聚集而引起氣道炎癥。[17]通常，在肌體功能正常狀態(tài)下，IFN-γ與IL-4相互拮抗使Th1/Th2保持動(dòng)態(tài)平衡，但當(dāng)人體與外界抗原發(fā)生反應(yīng)時(shí)，二者比例失衡，Th2細(xì)胞增多使IL-4因子分泌增多，IFN-γ分泌減少，釋放大量炎癥，黏液堆積于氣道而引發(fā)哮喘。[18]本研究結(jié)果顯示，與治療前比較，治療后的支氣管哮喘患者IL-4水平明顯下降而IFN-γ水平顯著上升，且Th1/Th2指數(shù)即IFN-γ/IL-4顯著上升，與既往研究相類似。[19]表明IL-4抑制了Th2細(xì)胞的增殖，IFN-γ激活了Th1，同時(shí)促進(jìn)了Th1/Th2細(xì)胞平衡，抑制了炎癥的生成。除了IL-4和IFN-γ外，還有很多細(xì)胞因子與Th1、Th2細(xì)胞亞群有關(guān)。其中IL-2是Th1細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，其與IFN-γ共同作用，抑制Th2細(xì)胞亞群的增值。[20]IL-5則可通過選擇性誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞聚集到氣道黏膜表面而引發(fā)哮喘。IL-10則可以通過抑制抗原提呈，抑制T細(xì)胞活化。[21]

理肺湯是由李友林教授制定，以溫潤辛金培本為原則，在既往的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，理肺湯能夠有效改善哮喘大鼠肺組織的病例損傷，減少炎性細(xì)胞浸潤，并能改善Th1/Th2失衡。[22-23]而本研究則進(jìn)一步證實(shí)，在人體中理肺湯亦有效改善支氣管哮喘患者Th1/Th2的失衡，增強(qiáng)Th1細(xì)胞活性，抑制Th2細(xì)胞活性，這為該方在臨床治療支氣管哮喘方面的進(jìn)一步推廣提供了客觀依據(jù)。以外，筆者還發(fā)現(xiàn)，理肺湯還能改善哮喘患者IL-2和IL-5的表達(dá)；但與對(duì)照組相比，觀察組患者的IL-10表達(dá)無明顯差異，提示理肺湯可能對(duì)以抗原提呈為主的T細(xì)胞免疫無明顯作用，更多地參與B細(xì)胞免疫功能。

綜上所述，理肺湯能夠有效調(diào)節(jié)支氣管哮喘患者Th1/Th2細(xì)胞平衡，對(duì)與B細(xì)胞相關(guān)的免疫功能亦具有較好的改善作用。