液液萃取-高效液相色譜法測定飲用水源地中西維因

朱小亮，許亞南

(江蘇省宿遷環(huán)境監(jiān)測中心，江蘇 宿遷 223800)

西維因又名甲萘威，是一種廣泛應(yīng)用的氨基甲酸酯類廣譜殺蟲劑，性質(zhì)穩(wěn)定不易分解，對生物體具有高毒性，如肌肉顫動、流淚、瞳孔縮小等乙酰膽堿酯酶抑制癥狀，甚至致癌性[1]。因此，必須對水環(huán)境中西維因進行有效監(jiān)測。

隨著檢測技術(shù)的發(fā)展，較多的檢測方法被報道。目前，主要檢測方法有氣相色譜法[2]、氣相色譜-質(zhì)譜法[3]、高效液相色譜法[4-5]、高效液相色譜-質(zhì)譜法[6-7]、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[8-9]。但方法主要是采用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)或液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，對實驗設(shè)備要求較高，檢測成本昂貴。本研究建立了液液萃取-高效液相色譜測定飲用水源地中西維因的方法。水樣經(jīng)二氯甲烷萃取、氮吹濃縮后，用甲醇定容至2 mL直接測定，樣品前處理操作簡捷、靈敏度高、方法穩(wěn)定。

1 實 驗

1.1 儀器與試劑

安捷倫1260液相色譜儀(配備二極管陣列檢測器DAD)、ZORBAX Eclipse XDB-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，美國安捷倫科技公司；RAPid VAP?樣品快速濃縮儀，美國LABCONCO；UPC-20UV康銘超純水機，北京康銘時代公司。

西維因標(biāo)準溶液(濃度為100 μg/mL)，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所；無水硫酸鈉、氯化鈉，分析純，國藥試劑；實驗室用水為自制高純水。

1.2 標(biāo)準曲線的繪制

按照逐級稀釋的方式配制標(biāo)準濃度點，先將西維因(100 μg/mL)標(biāo)準溶液稀釋為濃度為20 μg/mL的混合標(biāo)準使用液，充分搖均備用。將西維因標(biāo)準使用液用甲醇稀釋為0、0.02、0.2、0.4、0.6、1.0、2.0 μg/mL七個濃度點，按照儀器優(yōu)化條件進行測定。

1.3 前處理方法

準確量取待測樣品100 mL置于250 mL分液漏斗中，向其中加入NaCl固體5 g，充分搖均后向樣品中加入二氯甲烷10 mL，把分液漏斗置于萃取振蕩儀上充分震蕩萃取5 min后，靜置，充分分層，有機相通過無水硫酸鈉除水后，接入濃縮瓶中；上層樣品再加入10 mL二氯甲烷以同樣方式再次萃取。最后萃取液通過氮吹濃縮儀濃縮至近干，用甲醇定容至2 mL，混勻，過0.45 μm濾膜后入2 mL的色譜瓶中，待測。

1.4 色譜條件

色譜柱為Eclipse XDB-C18反向柱(4.6 mm×200 mm，5 μm)；流動相為甲醇∶水=55∶45(V/V)；流速為0.5 mL/min；柱溫為40 ℃；二極管陣列檢測器(DAD)波長：220 nm；進樣量：5.0 μL。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜特性

將濃度均為1.0 μg/mL西維因標(biāo)準溶液，流動相甲醇∶水=55∶45(V/V)，流速為0.5 mL/min，按照測試方法分析，色譜圖見圖1。由圖1可知，西維因在色譜圖上出現(xiàn)明顯峰，分離完全，無拖尾現(xiàn)象，基線平穩(wěn)，可用于西維因的定量分析。

圖1 西維因色譜圖

2.2 分析波長的選擇

圖2 西維因紫外波長掃描圖

使用二極管陣列檢測器(DAD)對濃度為1.0 μg/mL西維因標(biāo)準溶液進行全波段(190～400 nm)掃描，以選擇最佳檢測波長，掃描譜圖見圖2。由圖2知，西維因在220 nm與280 nm處有兩個吸收峰，其中在220 nm處的吸收強度較強，故選擇220 nm作為同時測定西維因最佳吸收波長。

2.3 流動相及流速選擇

本實驗以甲醇-水(55∶45，V/V)作為流動相進行分離效果試驗。發(fā)現(xiàn)此流動相體系能對西維因進行分離，同時甲醇具有柱壓低，分離快，峰對稱尖銳，故本實驗選擇甲醇-水為流動相。在西維因濃度均為1.0 μg/mL，在甲醇-水=55∶45(V/V)流動相下，對0.5 mL/min、0.8 mL/min、1.0 mL/min三種流動相流速進行分離效果試驗發(fā)現(xiàn)隨著流速增加，峰形變寬，不利于定量分析，故本實驗選擇流動相流速為0.5 mL/min。

2.4 線性關(guān)系及檢出限

在最佳實驗條件下，按照逐級稀釋的方式，分別配制濃度為0、0.02、0.2、0.4、0.6、1.0、2.0 μg/mL的西維因標(biāo)準溶液，按照檢測方法通過高效液相色譜進行測定，色譜圖見圖3。表明：在0～2.0 μg/mL范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好線性相關(guān)性，西維因曲線方程為y=376.4x+3.956，相關(guān)系數(shù)r=0.9999；對濃度為0.02 μg/mL西維因連續(xù)測定7次，取測定值標(biāo)準偏差的3倍作為方法檢出限，西維因檢出限為0.05 μg/L。

圖3 不同濃度下西維因色譜圖和線性方程

2.5 精密度和準確度實驗

配制0.2 μg/mL的西維因標(biāo)準溶液，在最佳的實驗條件下，考察方法的準確度及回收率，結(jié)果見表1。從表中知，該方法相對標(biāo)準偏差為3.0%～4.2%，平均值為3.4%，回收率為89.9%～103.2%，平均回收率為98.2%。實驗表明該法準確度及準確度較高，可用于飲用水源地中西維因測定。

表1 精密度及回收率實驗

2.6 樣品測定

在最佳檢測條件下，采集宿遷駱馬湖飲用水源地3個水樣，按照檢測方法進行萃取、濃縮、定容后進行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)飲用水源地3個水樣均未檢出西維因。

3 結(jié) 論

通過優(yōu)化色譜工作條件，建立了液液萃取-高效液相色譜測定西維因的方法。在0～2.0 μg/mL范圍內(nèi)，呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，西維因曲線方程為y=367.4x+3.956，相關(guān)系數(shù)r=0.9999，檢出限分為0.05 μg/L。該方法穩(wěn)定性好，操作簡單，靈敏度高，滿足于飲用水源地水中西維因的測定。