咸陽地區經皮冠狀動脈介入術后冠心病患者CYP2C19基因多態性分析*

許 濤，高玉芳，楊 磊，王 蕊

(陜西省咸陽市中心醫院檢驗科，陜西咸陽 712000)

冠心病是指冠狀動脈粥樣硬化使血管腔狹窄或阻塞，和(或)因冠狀動脈功能性改變導致心肌缺血、缺氧或壞死而引起的心臟病，亦稱缺血性心臟病。既往研究表明，冠心病是人類病死率最高的常見疾病之一[1]，居我國人群死亡原因的第2位[2]。國內冠心病指南推薦冠心病經皮冠狀動脈介入術(PCI)后抗栓采用抗血小板藥物進行治療，常用藥物氯吡格雷(商品名：波立維)可與阿司匹林聯合使用或單獨使用[3]。隨著氯吡格雷的廣泛應用，有報道顯示部分患者在服用氯吡格雷后，抗栓效果不佳，出現對氯吡格雷無反應或低反應[4]。氯吡格雷是一種前體藥物，本身無抗血小板聚集活性，需經細胞色素氧化酶P450(CYP450)酶家族催化生成活性的中間產物，影響抗血小板聚集活性[5]。目前研究較多的基因是CYP450中的重要成員CYP450 2C19(CYP2C19)，其基因的多態性可影響氯吡格雷活性產物生成[6]。本研究通過探討咸陽地區PCI后冠心病患者CYP2C19基因多態性的分布情況，為指導臨床個性化抗血小板治療提供理論依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取咸陽地區于本院心血管中心行PCI并服用氯吡格雷進行抗血小板治療的冠心病患者279例作為研究對象，患者間無血緣關系，年齡42～78歲，其中男180例，女99例。采集患者靜脈血2 mL于EDTA-K2抗凝管中待測。

1.2試劑與儀器 采用樂普(上海)醫療器械有限公司的CYP2C19基因突變檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)，ABI stepone Plus熒光PCR儀，高速離心機，渦旋振蕩器。

1.3方法 嚴格按照試劑說明書配制擴增反應液，取1 μL抗凝全血與擴增反應液混勻后進行PCR擴增。

1.4統計學處理 采用SPSS19.0統計軟件進行數據分析處理。按Hardy-Weinberg遺傳平衡定律驗證數據的群代表性。計數資料以例數或百分率表示，采用χ2檢驗進行比較。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1樣本人群經Hardy-Weinberg平衡檢驗結果 本文檢測CYP2C19基因的2個位點(681位點和636位點)，經Hardy-Weinberg遺傳平衡定律檢驗，2個位點的等位基因頻率符合遺傳平衡法則，說明樣本與群體差異無統計學意義(χ2=10.49,P>0.05)。在279例冠心病患者中，CYP2C19基因型分布以正常代謝型(*1/*1)、中間代謝型(*1/*2)最多，分別占109例(39.07%)、109例(39.07%)。見表1。

表1 CYP2C19基因型分布情況(%)

2.2CYP2C19等位基因頻率分布結果 CYP2C19基因多態性分布中，等位基因*2的出現頻率最高，為32.08%；等位基因*1的出現頻率為61.83%;等位基因*3的出現頻率為6.09%。

2.3CYP2C19基因代謝型頻率分布結果 咸陽地區CYP2C19基因代謝型分布顯示，CYP2C19正常代謝型(*1/*1)為109例(39.07%)，CYP2C19中間代謝型(*1/*2、*1/*3)為127例(45.52%)，CYP2C19慢代謝型(*2/*3、*2/*2、*3/*3)為43例(15.41%)。見表2。

表2 CYP2C19基因代謝型頻率分布

2.4不同地區CYP2C19基因代謝型分布結果 將國內不同地區(咸陽、沈陽、華南、喀什)漢族冠心病人群CYP2C19基因代謝型分布結果進行比較，發現正常代謝型、中間代謝型、慢代謝型分布差異均無統計學意義(χ2=1.954，P=0.924)。見表3。

表3 不同地區CYP2C19基因代謝型分布結果比較[n(%)]

3 討 論

氯吡格雷是噻吩吡啶類抗血小板藥物，廣泛應用于治療心血管疾病。氯吡格雷是一種前體非活性藥物，需經腸道吸收后在肝臟經CYP2C19酶氧化為活性中間產物[7]，是血小板二磷酸腺苷受體亞基12(P2Y12)受體的強效特異性拮抗劑。P2Y12受體是抑制血小板聚集和預防動脈粥樣硬化血栓事件的有效藥物靶點[8]。氯吡格雷活性中間產物可阻斷二磷酸腺苷(ADP)與血小板表面P2Y9受體結合，使纖維蛋白原無法與血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受體結合，從而抑制血小板相互聚集，約15%的給藥劑量發揮抗血小板主要作用[12]。在形成活性中間代謝產物過程中，由CYP2C19基因合成的CYP2C19酶起更重要的作用[10]。

CYP2C19至少有35個等位基因，而等位基因的多態性將影響酶的表達及活性。在亞洲人群中，CYP2C19等位基因*2、CYP2C19等位基因*3是兩種最常見的功能缺失型基因。在本研究中，咸陽地區冠心病患者CYP2C19*1/*1與*1/*2基因型所占比例最高，然而，CYP2C19*1/*2、*1/*3、*2/*3、*2/*2、*3/*3基因型所占比例高達60.93%，CYP2C19多態性與氯吡格雷的代謝有關[11]，影響人體的藥物療效。CYP2C19等位基因*2頻率為32.08%，高于CYP2C19等位基因*3的6.09%。有研究報道，CYP2C19等位基因*2、*3的攜帶者與氯吡格雷血漿活性有關，可導致氯吡格雷抗血小板聚集能力減弱[12-13]。

本研究中，咸陽地區漢族冠心病患者CYP2C19基因的3種代謝型(正常代謝型、中間代謝型、慢代謝型)分布和沈陽[14]、華南[15]、喀什[10]地區漢族的CYP2C19基因代謝型分布基本一致，但咸陽地區CYP2C19基因的代謝型分布中，中間代謝型和慢代謝型分別占比為45.52%和15.41%，慢代謝型發生率(15.41%)略高于其他地區。有研究報道，在接受氯吡格雷經PCI治療的患者中，中間代謝型和慢代謝型會明顯增加重大心血管不良事件的發生率[16-17]。

美國食品藥品監督管理局根據CYP2C19*2*3基因表達產物代謝氯吡格雷的能力，將人群分為三類代謝型：正常代謝型(*1/*1)、中間代謝型(*1/*2、*1/*3)、慢代謝型(*2/*2、*2/*3、*3/*3)。對于中間代謝型，可加大氯吡格雷劑量或換用普拉格雷；對于慢代謝型，則可用普拉格雷或替卡格雷米替代。

由于本研究僅收集279例標本代表咸陽地區，可能會引起結果的偏差，有待后續研究納入更多的地區和更多的數據進行驗證。

綜上所述，咸陽地區漢族冠心病患者有相當一部分人群攜帶CYP2C19等位基因*2*3，通過對CYP2C19基因型的檢測，有助于個性化使用抗血小板聚集藥物或調整抗血小板聚集藥物劑量，以減少因用藥不當造成的血栓事件發生。