肌腱蛋白C在百草枯中毒肺損傷中的作用

張迪，劉倩倩，彭瑾瑾，劉志，劉曉偉，劉偉

（中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院急診科，沈陽 110001）

百草枯 （paraquat，PQ） 是一種高毒性的有機雜環(huán)類除草劑，由于其低成本和高效的除草性能，在發(fā)展中國家廣泛應用［1］。PQ中毒的死亡率高達60%～80%。肺臟是PQ中毒后損傷的主要靶器官，早期為明顯肺水腫、肺出血等急性肺損傷表現，后期發(fā)展為不可逆的肺間質纖維化而導致死亡［2］。目前PQ中毒肺損傷機制并不完全清楚。在肺損傷的病理過程中，細胞外基質發(fā)揮維持肺泡結構及組織損傷修復等重要的生物學作用［3］。肌腱蛋白C（tenascin-C，TNC） 作為一種細胞外基質成分，當氧化損傷、組織修復以及炎癥介質刺激時，其表達明顯升高［4-5］。此外，在前期研究［6］中發(fā)現，PQ中毒患者血清TNC表達明顯升高，而且是中毒預后的獨立危險因素。目前，關于TNC在PQ引起的肺損傷中的表達規(guī)律及機制分析國內外尚無報道。本研究中將利用PQ中毒小鼠模型，探討TNC在PQ中毒肺損傷小鼠模型中的表達規(guī)律，這將有助于對PQ中毒肺損傷機制的進一步理解，并為診治提供新的思路。

1 材料與方法

1.1 材料

C57BL/6 雄性小鼠購自中國醫(yī)科大學實驗動物部。RIPA裂解液，SDS-PAGE凝膠配制試劑盒，BCA蛋白定量試劑盒，蛋白標準品 （碧云天生物技術研究所），SDS-PAGE上樣緩沖液 （康為世紀），蛋白Marker （美國Thermo Fisher Scientific公司），ECL發(fā)光液底物 （美國Bio-rad公司），PQ （美國Sigma公司），TNC、α-平滑肌肌動蛋 白 （α-smooth muscle actin，α-SMA）、轉化生長因子-β1 （transforming growth factor-β1，TGF-β1）、核因子-κB p65 （nuclear factorκB p65，NF-κB p65） 抗體 （英國Abcam公司），GAPDH抗體、辣根過氧化物酶羊抗鼠IgG抗體、辣根過氧化物酶羊抗兔IgG抗體 （美國Proteintech公司），TRIzol試劑 （美國Life Technologies公司），PrimeScript RT Master Mix，TB Premix Ex TaqⅡ（日本TaKaRa公司），免疫組化試劑盒 （北京中杉金橋生物技術有限公司）。……