5-羥基-1-甲基海因對百草枯中毒所致肺損傷保護作用的代謝組學研究

高利娜，王光，袁慧雅，劉俊亭

（中國醫科大學 1.法醫學院法醫毒物分析教研室；2.實驗動物部，沈陽 110122）

5-羥基-1-甲基海因 （5-hydroxy-1-methylhydantoin，HMH） 是內源性的抗氧化劑［1-2］，能夠清除羥基自由基，抑制慢性腎臟疾病的進展，對高糖和緩激肽刺激的血管提供保護，改善血管損傷和重構［3-5］。百草枯 （paraquat，PQ） 是廣泛應用的非選擇性廣譜除草劑，具有極強的毒性，口服中毒致死率為60%～80%［6-7］。PQ的中毒機制不清，多認為其肺損傷機制主要是線粒體功能障礙及氧自由基損傷［8］。前期研究［9-10］發現，HMH可通過其抗氧化特性保護PQ所致腎損傷。PQ中毒的靶器官是肺臟，中毒后可出現呼吸窘迫，中毒者多死于急性肺損傷及中毒后進行性肺纖維化。本研究擬通過檢測超氧化物歧化酶 （superoxide dismutase，SOD） 活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA） 含量、血紅素氧合酶1 （heme oxygenase-1，HO-1） 及代謝產物，探討HMH對PQ中毒模型小鼠肺組織的保護作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑：HMH （上海一研生物技術有限公司），PQ （麥克林上海生物有限公司），SOD活性檢測試劑盒 （碧云天生物試劑有限公司），MDA檢測試劑盒 （貝博生物試劑有限公司），山羊抗小鼠IgG、山羊抗兔IgG、小鼠抗β-actin單克隆抗體 （中杉金橋生物科技公司），ECL發光液、BCA蛋白定量試劑盒、HO-1兔多克隆抗體 （武漢三鷹生物技術有限公司）。

1.1.2 實驗動物分組及模型制備：SPF級4周齡雄性昆明小鼠30只，體質量 （30±2） g，購自遼寧長生生物技術股份有限公司，動物合格證號SYXK （遼）2018-0008。采用隨機數字表法將小鼠分為生理鹽水（NS） 組、PQ組、HMH組，每組10只。采用PQ一次性灌胃 （20 mg/kg） 制備PQ中毒動物模型；NS組灌胃等量生理鹽水；HMH組于造模后每天同一時間腹腔注射HMH （100 mg/kg），連續5 d。……